河南省土壤中芽孢桿菌多樣性研究.pdf

1、土壤中蘊含著豐富的微生物資源，芽孢桿菌是其中具有重要應用價值的微生物類群。有些菌種可以分泌多種酶，可應用于工業(yè)生產;有些菌種能產生對昆蟲毒性較強的蛋白，可生產微生物農藥;有些菌種可作為多種分泌蛋白基因表達受體，在基因工程領域中有較高的應用價值。為了探索河南省不同區(qū)域芽孢桿菌的多樣性，并期望從分離菌株中發(fā)現具有應用價值的菌株，本研究從河南省不同區(qū)域采集土壤樣品，采用純培養(yǎng)的方法，分離獲得芽孢桿菌。利用特異性引物擴增法，進行基于16S rR

2、NA序列的系統(tǒng)發(fā)育分析，同時對部分代表菌株進行形態(tài)學觀測及生理生化分析，以期挑選出具有較大研究價值的菌株。結果如下:
　　 通過分離與篩選，從河南省土壤中共得到341株產芽孢細菌。經16S rRNA序列分析，總共被分為了24個OTUs(operational taxonomic unit)，分屬于5個屬。其中Bacillus有20個種，Lysinibacillus有1個種， Ornithinibacillus有1個種，Brevi

3、bacillus有1個種， Paenibacillus有1個種。經分析，河南省土壤中產芽孢細菌的優(yōu)勢種是Bacillus megaterium和Bacillus simplex，常見種為Bacillus subtilis、Bacilluscereus、Bacillus licheniformis和Bacillus amyloliquefaciens。根據各地土質和植被的不同，將河南省劃分為中東部、西部、南部、北部四個不同區(qū)域，其中中東部

4、優(yōu)勢種是Bacillus subtilis、Bacillus megaterium和Bacillus cereus，西部優(yōu)勢種是Bacillusmegaterium和Bacillus cereus，南部優(yōu)勢種是Bacillus megaterium、 Bacillus simplex和Bacillus endophyticus，北部優(yōu)勢種是Bacillus subtilis、 Bacillus megaterium、 Bacillusc

5、ereus和Bacillus simplex。多樣性指數分析表明，中東部物種比其它區(qū)域更豐富，北部物種較少。結果顯示同種芽孢桿菌在不同的環(huán)境條件下分布不同，如Bacillusmegaterium在西部比例高達50％，而北部只有21％。同時在四個區(qū)域中都存在特有的菌種，表明了芽孢桿菌分布的多樣性。Unifrac計算得到的數據表明，不同區(qū)域間的物種存在著差異性。
　　 通過對24個OTU中的代表菌株的形態(tài)學觀察和生理生化分析，篩選出