ACTH肌注構(gòu)建雞免疫抑制模型及AvBD6的拮抗效應(yīng).pdf

1、應(yīng)激性免疫抑制(stress-induced immunosuppression，SIS)是養(yǎng)雞業(yè)的重要威脅。為了研究禽類防御素對應(yīng)激性免疫抑制的效應(yīng)，采用形態(tài)學和免疫學相關(guān)研究手段，首先通過肌肉注射促腎上腺皮質(zhì)激素(Adrenocorticotropic hormone，ACTH)建立雞應(yīng)激性免疫抑制模型，并對該模型進行了評價；在此基礎(chǔ)上對禽β-防御素6(avinβ-defensin-6，AvBD6)對應(yīng)激性免疫抑制的效應(yīng)進行了評價。

2、
　　 1外源性ACTH肌肉注射建立免疫抑制模型及其評價
　　 連續(xù)7天給21日齡羅曼褐蛋公雞(170±20g)腿部肌肉注射不同劑量(0、15、30、45IU/kgBW·d)的ACTH后，通過有關(guān)生理學和免疫學指標對該模型進行了評價。結(jié)果顯示：
　　 45U/kgBW·d組的體重、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)顯著低于對照組(p<0.05)，組織學觀察顯示45IU/kgBW·d組的三個免疫器官內(nèi)淋巴細胞數(shù)量顯著減

3、少、間質(zhì)明顯增生。
　　 血清皮質(zhì)酮濃度和腎上腺指數(shù)呈ACTH劑量依賴性升高趨勢，但僅45IU/kgBW·d組的血清皮質(zhì)酮濃度和腎上腺指數(shù)顯著高于對照組(p<0.05)，組織學觀察顯示腎上腺皮質(zhì)部細胞肥大和增生明顯。
　　 各劑量組的血清IgG、IgA、IL-2、IFN-γ，呈現(xiàn)ACTH劑量依賴性的下降，且各劑量組間差異顯著(p<0.05)。
　　 各劑量組的法氏囊、脾臟的IgG陽性反應(yīng)物的面密度、法氏囊、脾臟、

4、腸道和肝臟的禽β-防御素6陽性反應(yīng)物的面密度，均表現(xiàn)出ACTH劑量依賴性的下降，且各劑量組間差異顯著(p<0.05)。
　　 ACTH處理組的血糖值僅在注射ACTH后2小時顯著高于對照組(p<0.05)；隨著時間的推移，血糖值恢復(fù)正常且各劑量組間差異不顯著。
　　 本研究表明，15、30、45U/kg·d的ACTH連續(xù)7天肌肉注射可引起雞應(yīng)激性免疫抑制。血清皮質(zhì)酮升高、腎上腺肥大和腎上腺皮質(zhì)細胞增生肥大可用于評價持續(xù)應(yīng)激

5、，而血糖不適合評價持續(xù)應(yīng)激；免疫抑制評價指標則包括免疫器官萎縮，組織中免疫細胞數(shù)量、IgG和禽β-防御素6陽性反應(yīng)物的面密度下降，以及血清IgG、IgA、IFN-γ和IL-2水平降低。
　　 2 AvBD6對應(yīng)激性免疫抑制的拮抗效應(yīng)
　　 根據(jù)試驗需要設(shè)計了五個處理組：空白對照組(注射溶劑PBS)、ACTH組(注射25IU/kgBW的ACTH)、BD6組(注射10μg/kg BW的AvBD6)、A/BD6組(提前注25I

6、U/kgBW的ACTH3d，然后注10μg/kg BW的AvBD6，均注射6天)、BD6/A組(提前注10μg/kg BW的AvBD63天，然后注射25IUk/gBW的ACTH，均注射6天)。第12天采樣分析表明，各采樣時間點的血糖值和體重組間差異均不顯著。
　　 BD6組的胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著高于對照組(p<0.05)；而ACTH組的胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著低于對照組(p<0.05)，但腎上腺指數(shù)顯

7、著高于對照組(p<0.05)。A/BD6組和BD6/A組的器官指數(shù)同對照組之間無顯著差異。ACTH組血清皮質(zhì)酮水平顯著高于其他四組(p<0.05)，而其他四組的血清皮質(zhì)酮水平無組間差異。循環(huán)IgG和IgA水平，BD6組顯著高于CK組(p<0.05)，CK組顯著高于ACTH組(p<0.05)，A/BD6組、BD6/A組和CK組三組之間差異不顯著。AvBD6能夠顯著提高IL-1、IFN-γ的水平(p<0.05)。同時，提前3d注射AvBD6