Bcl11a和Bcl11b基因抑制病毒增殖功能研究.pdf

1、Bcl11a和Bcl11b是鋅指蛋白樣轉錄因子，分別對B淋巴和T淋巴細胞的發(fā)育、分化和增殖起到重要調節(jié)作用。已有的研究也表明Bcl11a和Bcl11b作為核轉錄因子調控了一系列下游基因的表達，對細胞的增殖、周期調控和免疫的調節(jié)發(fā)揮了重要作用。同時，這兩個基因還被證實不僅與癌癥有密切關系，也可以抑制HIV-1病毒在細胞內的轉錄和復制，發(fā)揮一定的抗病性。
　　鑒于Bcl11a和Bcl11b基因在淋巴細胞中的特異表達和對淋巴細胞生長發(fā)育

2、具有重要作用，然而，在免疫反應及抗豬圓環(huán)病毒PCV2的功能不清楚，本研究以小鼠和PK15細胞為試驗對象，豬圓環(huán)病毒2型PCV2為病原，主要采用基因敲除、基因超表達、熒光定量、Western blot和免疫熒光等方法，對Bcl11a和Bcl11b抑制PCV2增殖的作用和機理進行了初步研究。同時，還以昆明小鼠為攻毒對象，初步探討了PCV2對淋巴細胞發(fā)育的影響。
　　主要研究成果如下:
　　(1)半敲除Bcl11a后（Bcl11

3、a+/-，Bcl11a表達量降低一半）小鼠免疫能力顯著降低，血清中PCV2病毒含量顯著上升，PCV2對脾臟細胞的感染能力也增強，對脾臟等免疫器官的損傷更加嚴重。
　　(2)超表達Bcl11a和Bcl11b能顯著抑制PCV2在PK15細胞中的增殖，病毒mRNA、DNA和蛋白水平都顯著降低。
　　(3) Bcl11a、Bcl11b和PCV2病毒沒有明顯的共定位。
　　(4) Bcl11a可以通過抑制Caspase3的活性抑

4、制由PCV2引起的細胞凋亡，而Bcl11b通過抑制NF-κB的表達并促進抗凋亡蛋白bcl2、抗病毒蛋白IRF3和MX1的表達，抑制病毒增殖，減少細胞凋亡，說明Bcl11a、Bcl11b抑制病毒增殖的機制可能是通過不同途徑實現(xiàn)的。
　　(5) PCV2能導致發(fā)育中的淋巴細胞大量損耗，尤其是對B淋巴細胞的影響非常明顯。PCV2也可以抑制體外培養(yǎng)淋巴細胞的增殖，并對淋巴細胞發(fā)育相關重要基因有顯著的抑制作用，說明PCV2可以抑制早期淋巴細