水稻葉片衰老相關(guān)基因的鑒定.pdf

1、水稻是世界上最重要的糧食作物之一，亦是功能基因組學(xué)研究的模式作物。葉片衰老是葉片發(fā)育的最后一個(gè)階段。通過對(duì)水稻葉片衰老機(jī)理的研究，有計(jì)劃地控制或延緩衰老的發(fā)生具有重要的理論價(jià)值和實(shí)踐意義。盡管近年來鑒定了不少衰老相關(guān)突變體和衰老相關(guān)基因，但水稻葉片衰老的機(jī)理仍然不甚明了。本研究的思路就是從基因芯片中挑選在衰老過程中變化幅度較大的基因，對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步分析，從而鑒定這些基因在水稻葉片衰老過程中的功能，加深對(duì)水稻葉片衰老相關(guān)分子機(jī)理的認(rèn)識(shí)，最

2、終為延緩葉片衰老提供可行的材料。
　　 本研究主要涉及候選基因在水稻抽穗后不同發(fā)育時(shí)期劍葉中的表達(dá)量檢測(cè)、候選基因?qū)Σ煌に靥幚淼捻憫?yīng)情況、植物表達(dá)載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化、再生植株的分子檢測(cè)、相關(guān)突變體的表型鑒定和分子鑒定等。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.完成11個(gè)衰老相關(guān)候選基因(A1、A2、A3、A4、A6、A7、A10、A12、A14、A15及A16)的超表達(dá)載體構(gòu)建和其中3個(gè)基因(A2、A6、A12)的dsRNA干

3、涉載體構(gòu)建；
　　 2.利用實(shí)時(shí)定量PCR對(duì)衰老相關(guān)候選基因(A2、A4、A6、A12、A16)在水稻抽穗后不同發(fā)育時(shí)期劍葉中的表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)，證明A2、A4、A6及A12是葉片衰老上調(diào)表達(dá)基因，A16為葉片衰老下調(diào)表達(dá)基因；
　　 3.利用實(shí)時(shí)定量PCR對(duì)衰老相關(guān)候選基因(A2、A4、A6、A12、A16)在不同激素處理下的表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)，證明A2、A4、A6、A12及A16對(duì)不同的激素有明顯響應(yīng)；
　　 4.