大麗花衰老相關(guān)基因XTH的表達(dá)特征和功能分析.pdf

1、 碩士學(xué)位論文 論文題目 大麗花衰老相關(guān)基因 XTH 的 表達(dá)特征和功能分析 研 究 生 姓 名 王 蕾 指導(dǎo)教師姓名 談建中 專 業(yè) 名 稱 園林植物與觀賞園藝 研 究 方 向 園林植物生物技術(shù) 論文提交日期 2013 年 4 月 大麗花衰老相關(guān)基因 XTH 的表達(dá)特征和功能分析 中文摘要 I 大麗花衰老相關(guān)基因 XTH 的表達(dá)特征和功能分析 中文摘要 植物衰老是基因表達(dá)、 蛋白質(zhì)合成以及內(nèi)外因素綜合調(diào)控的發(fā)育過(guò)程，

2、 屬于細(xì)胞的程序化死亡，該過(guò)程涉及衰老相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控作用。木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶/水解酶(Xyloglucan endotransglycosylase/hydrolase, XTH)是一種由多種 XTHs 基因編碼可以引起細(xì)胞壁中纖維素微纖網(wǎng)結(jié)構(gòu)改變的細(xì)胞壁重構(gòu)水解酶， 可參與細(xì)胞壁的擴(kuò)展和降解， 并在呼吸躍變型果實(shí)及乙烯敏感型切花的衰老過(guò)程中起到重要的調(diào)控作用。 在乙烯非敏感型的大麗花（Dahlia pinnata Cav）中，雖然

3、已克隆了 DpXTH1 和 DpXTH2基因，但其在衰老過(guò)程中的調(diào)控機(jī)理尚不清楚。本研究以大麗花‘單瓣黃’品種為試驗(yàn)材料，利用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)，分別對(duì)不同發(fā)育時(shí)期的花瓣、葉片、愈傷組織，不同的組織器官（根、莖、葉片、花瓣） ，外源乙烯及 1-MCP 處理后的花瓣中DpXTH1 和 DpXTH2 基因的表達(dá)特征及功能進(jìn)行分析，主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： （1）設(shè)計(jì) DpXTH1 和 DpXTH2 的實(shí)時(shí)定量 PCR 特異引物，檢測(cè)了 1

4、8s rRNA 、β-actin 和 GAPDH 三個(gè)內(nèi)參基因在大麗花花瓣衰老過(guò)程中的表達(dá)穩(wěn)定性。 結(jié)果表明內(nèi)參基因 β-actin 在大麗花各組織發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)最為穩(wěn)定，適用于后續(xù)試驗(yàn)的定量分析。 （2）大麗花的花瓣生長(zhǎng)可分為現(xiàn)蕾期、初花期、盛花期和衰敗期，檢測(cè)結(jié)果表明 DpXTH1 和 DpXTH2 的表達(dá)均在花瓣發(fā)育前期呈上調(diào)表達(dá)，至盛花期達(dá)到峰值，之后隨著花瓣的衰敗表達(dá)量有所下降，說(shuō)明大麗花花瓣衰老過(guò)程與 XTH 基因表達(dá)之間

5、存在著某種關(guān)系。 （3） 以大麗花盛花期的花瓣、 葉、 根、 莖為材料進(jìn)行定量分析， 結(jié)果表明 DpXTH1和 DpXTH2 兩個(gè)基因在根中均不表達(dá)， 在莖和葉片中表達(dá)豐度極低， 在花瓣中高豐度表達(dá)，說(shuō)明 DpXTH1 和 DpXTH2 為大麗花花瓣組織特異性基因，它們的表達(dá)及功能與花瓣細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)。 （4）取大麗花的幼葉、成熟葉和老葉 3 個(gè)生長(zhǎng)階段為材料進(jìn)行定量分析，檢測(cè)結(jié)果表明 DpXTH1 和 DpXTH2 的表達(dá)量均