大腸腫瘤相關(guān)基因SNC44-li結(jié)構(gòu)、表達(dá)和功能分析.pdf

1、目的:1.研究SNC44cDNA克隆的結(jié)構(gòu)(全長序列測定、開放閱讀框分析、融合蛋白制 備);2.采用定量RT-PCR、NorthernBlot方法研究SNC44/li基因在大腸癌、胃癌、乳腺癌等腫瘤組織中的表達(dá)及在這些腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的潛在意義;3.用原位雜交方法研究SNC44/Ii基因在正常大腸粘膜與大腸癌組織的表達(dá)定位;4.探討SNC44/Ii基因正義、反義重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞對其生長曲線、細(xì)胞周期和CD44、pgp等相關(guān)蛋白表達(dá)的

2、影響或調(diào)控.第一部分:SNC44cDNA克隆結(jié)構(gòu)分析;第二部分:SNC44/Ii基因在不同組織中表達(dá)和定位研究;第三部分:SNC44/Ii基因融合蛋白的制備;第四部分:SNC44/Ii基因的功能研究.結(jié)論:1.SNC44cDNA克隆的全長序列分析表明:(1)SNC44cDNA共130bp,與人類HLAⅡ類抗原相關(guān)恒定鏈(Ii)mRNA99﹪同源;開放閱讀框與Ii(P33)完全一致,SNC44就是Ii基因.(2)SNC44/Ii基因上有6

3、51bp的ORF,編碼217個氨基酸;該研究制備了54KD的SNC44/Ii(33KD)-GST(21KD)融合蛋白.2.SNC44/Ii在部分腫瘤及正常組織中的表達(dá)研究表明:(1)SNC44/Ii大腸癌中低表達(dá)(P<0.05);隨著Duke's分期的進(jìn)展有進(jìn)一步降低的趨勢.(2)SNC44/Ii在胃癌、乳腺癌有低表達(dá)的趨 勢(P>0.05).(3)SNC44/Ii在腫瘤細(xì)胞系中表達(dá)水平較低.(4)RT-PCR、NorthernBlot