2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、番茄(Solanum lycopersicum)是典型的呼吸躍變型果實(shí),在后熟過(guò)程中發(fā)生了許多重要的生理變化。在激素水平上,伴隨著乙烯的大量合成;在顏色轉(zhuǎn)變上,葉綠素的降解和番茄紅素的合成使番茄果實(shí)在外觀上由綠轉(zhuǎn)紅;在果實(shí)質(zhì)地上,由于水解酶的作用使果實(shí)逐漸軟化。WRKY轉(zhuǎn)錄因子是植物特有的一類轉(zhuǎn)錄因子,已有的研究表明 WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物形態(tài)建成、物質(zhì)代謝、生物及非生物脅迫響應(yīng)等過(guò)程中發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。近年來(lái)在擬南芥、水稻等模式植

2、物上的研究已經(jīng)表明 WRKY轉(zhuǎn)錄因子參與了對(duì)植物葉片衰老的調(diào)控,但對(duì)采后果實(shí)后熟調(diào)控方面的研究非常罕見(jiàn)。本論文在本課題組的研究基礎(chǔ)上,以番茄為實(shí)驗(yàn)材料,分析了對(duì)乙烯產(chǎn)生明顯響應(yīng)的SlWRKY在葉片和果實(shí)中的表達(dá)模式、篩選其下游基因、驗(yàn)證與其互作的蛋白,從多方面進(jìn)一步探討了 WRKY轉(zhuǎn)錄因子是否參與了番茄果實(shí)后熟階段的調(diào)控。主要研究結(jié)果如下:
  1、采用熒光定量技術(shù)檢測(cè)了9個(gè) SlWRKY基因在四個(gè)發(fā)育時(shí)期的番茄葉片,六個(gè)自然成熟

3、時(shí)期番茄果實(shí)中的實(shí)時(shí)表達(dá)情況。結(jié)果表明,(1)SlWRKY16、SlWRKY17、SlWRKY22、SlWRKY23、SlWRKY25、SlWRKY31、SlWRKY33、SlWRKY53、SlWRKY54都在葉片初始進(jìn)入衰老狀態(tài)時(shí)表達(dá)量最高,其中 SlWRKY25、SlWRKY33、SlWRKY54的變化幅度最大,相對(duì)幼葉的表達(dá)量升高了160-200倍;(2)SlWRKY16、SlWRKY17、SlWRKY22、SlWRKY23、Sl

4、WRKY25、SlWRKY31、SlWRKY33、SlWRKY53、SlWRKY54在番茄果實(shí)成熟期都有不同程度的上調(diào)表達(dá),但具有不同的上調(diào)模式。(3)SlWRKY16、SlWRKY17、SlWRKY23、SlWRKY25表達(dá)量在粉紅期出現(xiàn)峰值,SlWRKY31、SlWRKY33、SlWRKY53、SlWRKY54在全紅期的表達(dá)量達(dá)到峰值。SlWRKY22的表達(dá)量則呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)。
  2、使用熒光共聚焦顯微鏡觀察融合YFP的

5、重組載體在本氏煙草中的表達(dá)情況,結(jié)果表明:SlWRKY17、SlWRKY22、SlWRKY23、SlWRKY25、SlWRKY31、SlWRKY33、SlWRKY53、SlWRKY54均定位于細(xì)胞核。
  3、將啟動(dòng)子活性載體和過(guò)表達(dá)載體共同轉(zhuǎn)化煙草葉片,檢測(cè)SlWRKYs對(duì)衰老相關(guān)基因啟動(dòng)子活性的影響,數(shù)據(jù)分析結(jié)果顯示:SlWRKY對(duì)SlACO1、SlACO3、SlPAO的啟動(dòng)子活性沒(méi)有產(chǎn)生明顯影響;SlWRKY16、SlWRK

6、Y23、SlWRKY33、SlWRKY53使SlPPH啟動(dòng)子的提高了2-3倍,SlWRKY25使SlPDS的啟動(dòng)子活性上升了6倍。SlWRKY16、SlWRKY17也使SlPSY1的啟動(dòng)子活性有2-3倍的提高。SlWRKY16和SlWRKY17的共同作用則表現(xiàn)出對(duì)SlPSY1啟動(dòng)子更加強(qiáng)烈的調(diào)控作用,使其活性提高了接近4倍。
  4、通過(guò)熒光雙分子互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證SlWRKYs與轉(zhuǎn)錄因子SlERF2b、SlERF7、SlRIN之間是否

7、存在相互作用。結(jié)果表明,SlERF2b與 SlWRKY17、SlWRKY54,SlERF7與 SlWRKY17、SlWRKY33,SlRIN與 SlWRKY17、SlWRKY53、SlWRKY17與SlWRKY16、SlWRKY54之間均存在蛋白水平的互作關(guān)系。
  5、對(duì)SlWRKY23、SlWRKY53進(jìn)行原核表達(dá),并純化獲得高純度的蛋白。這些蛋白在體外與包含W-box的核酸探針?lè)磻?yīng),結(jié)果顯示SlWRKY23能夠與SlACO1

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