2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、軟腐病是小白杏貯藏期間的主要侵染性病害,是造成腐爛損失的重要原因。長期以來,人們認(rèn)為防治果實采后病害最有效的方法是使用化學(xué)殺菌劑,但此方法存在著農(nóng)藥殘留、環(huán)境污染和病原菌抗藥性等諸多弊端,迫切需要新的更安全的保鮮方法來取代化學(xué)殺菌劑。微生物防治是選擇對果實以及人體不造成危害的微生物,利用微生物之間的拮抗作用,達到抑制病原菌生長的目的。
  本研究分離鑒定出引起小白杏軟腐病的主要致病菌,針對此致病菌分離篩選出拮抗菌株BY11,并對拮

2、抗菌株進行鑒定,將拮抗菌與氯化鈣和殼聚糖進行復(fù)配,通過響應(yīng)面試驗,優(yōu)選出一種復(fù)合生物保鮮劑,并驗證了其在小白杏上的保鮮效果。主要結(jié)果如下:
  1.軟腐病病原菌的分離和鑒定:從發(fā)病果實的病健交界處取樣,分離篩選出11株菌,依據(jù)柯赫氏法則,最終得到1株引起小白杏軟腐病的主要致病菌;應(yīng)用rDNA-ITS分子標(biāo)記分析和傳統(tǒng)真菌形態(tài)學(xué)鑒定相結(jié)合的方法,鑒定致病菌株為少孢根霉(Rhizopus oryzae)。
  2.拮抗菌的分離和

3、篩選:用稀釋平板法,從果實表面、果實傷口、葉片以及果園根際土壤中共分離得到112個菌株。應(yīng)用平板對峙法,離體篩選出10株有拮抗作用的菌株。進一步通過果實接種法,活體篩選出能明顯抑制少孢根霉的拮抗菌BY11和CA4,室溫下(約25℃)抑菌率分別為79.17%和66.67%。
  3.拮抗菌的鑒定:首先采用傳統(tǒng)的鑒定方法,對BY11和CA4的表型、營養(yǎng)特征和生理生化特性進行了分類鑒定,進而采用26SrDNA和16SrDNA分子鑒定方法

4、,通過同源性比對及系統(tǒng)發(fā)育分析,鑒定拮抗菌BY11為粘性圓紅酵母(Rhodotorula mucilaginosa),CA4為婁徹氏鏈霉菌(Streptomyces rochei)的變種。
  4.拮抗菌BY11生長曲線的測定:采用比濁法,在600nm波長下測定菌液OD值,確定細胞濃度。研究BY11的生長曲線、最適pH、最適溫度、最佳碳源、最佳氮源。實驗得出拮抗菌BY11在培養(yǎng)48h時進入穩(wěn)定期,最適生長溫度為28℃,最適pH為6

5、,最佳碳源為蔗糖,氮源為尿素。
  5.最佳保鮮劑的配制:將拮抗菌與氯化鈣和殼聚糖進行復(fù)配,并確定貯藏溫度。通過單因素實驗,確定復(fù)合保鮮劑和溫度的因素水平。應(yīng)用響應(yīng)面實驗對保鮮劑進行優(yōu)化配比,通過多元回歸分析,經(jīng)失擬項和決定系數(shù)檢驗,證明模型可靠性較好。最終得出小白杏的最佳保鮮劑配方為:拮抗菌濃度為108CFU/ml,殼聚糖濃度為0.5%,氯化鈣濃度為1.5%;貯藏溫度為5℃。
  6.保鮮劑的效果驗證:采用保鮮劑處理小白杏

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