共軛亞油酸誘導(dǎo)小鼠附睪脂肪減少發(fā)生機(jī)制的研究.pdf

1、為了了解共軛亞油酸(CLA)誘導(dǎo)的動物脂肪減少的發(fā)生機(jī)制，本研究在兩組(n=12)6周齡雄性昆明小鼠的日糧中分別添加1.5％的CLA(試驗組)或亞油酸(LA，對照組)，13天后麻醉處死采樣，對附睪脂肪組織的分解、合成以及附睪脂肪細(xì)胞的分化與凋亡進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，與對照組相比，日糧中含有CLA的小鼠的采食量與體重?zé)o顯著差異(P>0.05)，但附睪脂肪組織含量及附睪脂肪組織中瘦素表達(dá)水平顯著下降(P<0.01)，小鼠出現(xiàn)胰島素抵抗、高血

2、脂以及脂肪細(xì)胞形態(tài)發(fā)生異常，以上結(jié)果表明CLA已成功誘導(dǎo)出脂肪營養(yǎng)不良的小鼠模型。熒光定量PCR和Westernblotting檢測發(fā)現(xiàn)，附睪脂肪組織中pcrilipin1的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平都顯著下降。perilipin1的正調(diào)節(jié)因子過氧化物酶體增殖體激活受體γ(PPARγ)的mRNA表達(dá)水平顯著下降(P<0.01)，而perilipin1的負(fù)調(diào)節(jié)因子腫瘤壞死因子α(TNFα)的mRNA水平顯著升高(P<0.01)；熒光素酶報告

3、基因系統(tǒng)檢測發(fā)現(xiàn)，在3T3L1細(xì)胞的培養(yǎng)液中添加CLA能抑制perilipin1的啟動子活性。為進(jìn)一步研究perilipin1減少引起的功能變化，經(jīng)小鼠附睪脂肪的體外培養(yǎng)試驗發(fā)現(xiàn)，CLA能夠增加脂肪組織的基礎(chǔ)脂解率(P<0.01)，但顯著減弱脂肪組織在激素刺激下產(chǎn)生的脂解反應(yīng)。因此CLA能夠造成脂肪營養(yǎng)不良小鼠的脂肪組織中Perilipin1表達(dá)的下降并導(dǎo)致附睪脂肪組織的異常脂解，成為脂肪組織減少的原因之一。在脂肪合成的研究中，用熒光定

4、量PCR分析脂肪合成的關(guān)鍵酶ACC、SCD、FAS以及它們的主要激活因子SREBP-1c的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ACC、SCD、SREBP1-C的表達(dá)下降(P<0.01)，表明脂肪的從頭合成受到抑制，熒光定量PCR對LPL的mRNA表達(dá)水平檢測發(fā)現(xiàn)其mRNA表達(dá)也顯著下降(P<0.01)，表明血液中供應(yīng)脂肪合成的原料短缺，造成脂肪合成減少。根據(jù)試驗數(shù)據(jù)，試驗組小鼠脂肪組織中的PPARγ的mRNA表達(dá)顯著下降(P<0.01)，脂肪細(xì)胞形態(tài)學(xué)異常，