桑葉發(fā)酵改性和在肉牛瘤胃中降解特性的研究.pdf

1、飼料資源緊缺已成為制約我國養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要因素，桑樹是農(nóng)業(yè)部列入我國飼料目錄中的植物。桑葉作為新型飼料資源，具有營養(yǎng)豐富，品質(zhì)優(yōu)良，飼用價(jià)值高等特點(diǎn)，是潛在的蛋白質(zhì)飼料資源。已有研究表明，桑葉作為飼料可以改善畜禽水產(chǎn)品質(zhì)，增強(qiáng)動(dòng)物健康。但在養(yǎng)殖過程中也普遍出現(xiàn)采食量不高、日糧中添加量高則影響生長速度等問題。近年來，一些地方開始規(guī)模化種植飼料桑，采用機(jī)械化采收方式來降低生產(chǎn)成本，出現(xiàn)桑枝葉飼料中木質(zhì)素、粗纖維含量較高，動(dòng)物采食適口性差、日

2、糧中添加量低等問題，影響飼料桑利用及產(chǎn)業(yè)發(fā)展。本論文通過體外人工發(fā)酵方法，篩選出能夠改善桑葉飼用品質(zhì)的適宜菌株，分析測定這些菌株菌體生長特點(diǎn)以及生理生化特性，并對它們應(yīng)用于桑葉發(fā)酵的工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，以達(dá)到改善桑葉品質(zhì)的目的。同時(shí)研究了桑葉中主要營養(yǎng)成分在具有多種發(fā)酵微生物的肉牛瘤胃中的消化率，獲得桑葉在反芻動(dòng)物體內(nèi)降解特性的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴選取分屬于霉菌、酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌四類菌中的18個(gè)菌株分別發(fā)

3、酵桑葉，觀察、測定其外觀形態(tài)、pH、粗纖維、粗蛋白以及粗脂肪含量的變化。結(jié)果表明，經(jīng)不同的菌株發(fā)酵桑葉后，其外觀形態(tài)、pH以及粗纖維、粗蛋白、粗脂肪含量均發(fā)生了顯著的變化(P＜0.05)，其中康寧木霉(編號40505)發(fā)酵桑葉后的發(fā)酵產(chǎn)物中粗蛋白含量最高，達(dá)31.27%；蠟狀芽孢桿菌(編號19375)發(fā)酵桑葉后的產(chǎn)物中粗纖維含量最低，降至12.71%；植物乳桿菌(編號21801)發(fā)酵桑葉后產(chǎn)物中粗脂肪含量最高，達(dá)5.71%。將康寧木霉、

4、產(chǎn)脘假絲酵母、蠟狀芽孢桿菌、植物乳桿菌等四個(gè)菌株作為改善桑葉品質(zhì)的適宜菌株。⑵觀察四個(gè)適宜菌株的菌落和菌體特征，測定產(chǎn)酶特性和生長曲線，全面了解其生理生化特性。結(jié)果表明，四株菌均具有產(chǎn)蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶活性，其中康寧木霉產(chǎn)蛋白酶活性最高，可達(dá)到107.173U/mL，蠟狀芽孢桿菌產(chǎn)纖維素酶活性最高，達(dá)116.815U/mL，植物乳桿菌的產(chǎn)脂肪酶活性最高，達(dá)到38.209U/g。⑶通過對發(fā)酵菌種的優(yōu)化確定了最佳的菌種組合為康寧木霉、

5、產(chǎn)脘假絲酵母、蠟狀芽孢桿菌、植物乳桿菌等四個(gè)菌株的發(fā)酵組合，最佳接種量為5%且蠟狀芽孢桿菌、植物乳桿菌、產(chǎn)脘假絲酵母、康寧木霉的接種比例為2:1:1:1；結(jié)合單因素試驗(yàn)以及正交試驗(yàn)優(yōu)化發(fā)酵條件得出最佳的發(fā)酵條件為pH=7，發(fā)酵時(shí)間84h，發(fā)酵溫度30℃。并且在最佳發(fā)酵條件下發(fā)酵桑葉后產(chǎn)物中的粗蛋白的含量高達(dá)36.30%，真蛋白含量高達(dá)22.12%，粗纖維含量降至9.63%。⑷分別測定桑葉的常規(guī)營養(yǎng)成分以及桑葉中干物質(zhì)(DM)、有機(jī)物(O

6、M)、粗蛋白(CP)、中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)在云嶺牛瘤胃中6h、12h、24h、36h、48h、72h的實(shí)時(shí)降解率以及有效降解率，結(jié)果顯示，桑葉降解前粗蛋白含量高達(dá)20.99%，飼料相對值(RFV)達(dá)到2.22，粗飼料等級達(dá)特級水平；桑葉DM、CP、OM在肉牛瘤胃中72h的降解率分別達(dá)到87.62%、96.29%、87.71%，接近于完全降解，各營養(yǎng)成分的有效降解率也分別達(dá)到DM68.38%、CP74.60%、N