肌纖維發(fā)生相關(guān)因子在不同類型雞與鵪鶉雜交禽中的差異表達(dá).pdf

1、雞和鵪鶉的雜交種不僅綜合了雙方的體型、產(chǎn)肉、肉質(zhì)等優(yōu)良性狀，而且會導(dǎo)致其雜交后代遺傳物質(zhì)的表達(dá)規(guī)律出現(xiàn)不同于雙親的變化；肉雞和蛋雞經(jīng)過長期人工選育造成了其體重和生長速度的懸殊。因而以蛋種雞和肉種雞與母鵪鶉進(jìn)行雜交，產(chǎn)生不同類型的雜交禽--蛋雜交禽和肉雜交禽，在胚胎期肌肉發(fā)育過程中某個相關(guān)因子的差異表達(dá)可能導(dǎo)致肌纖維組織學(xué)特性的異同，從而造成肌肉性狀的差異。本實驗以蛋用型種公雞和肉用型種公雞為父本，鵪鶉為母本進(jìn)行雜交，分別獲得蛋雜交禽和肉

2、雜交禽，在此基礎(chǔ)上首先通過肌肉組織切片技術(shù)和肌纖維直徑的測量，觀察比較雞、鵪鶉、蛋雜交禽和肉雜交禽的肌纖維組織學(xué)的差異，然后通過掃描電鏡觀察其肌纖維超微結(jié)構(gòu)的差異，其次應(yīng)用Real-timePCR檢測胚胎期影響肌纖維發(fā)生相關(guān)因子（MyoD、MSTN、p21、IGF-1、MLP、MyoG）的差異表達(dá)，并結(jié)合相應(yīng)時期的肌肉組織切片觀察、超微結(jié)構(gòu)和肌纖維直徑測量，篩選出可能對肌肉性狀有重要影響的主要候選基因。具體結(jié)果如下：
　?。?）通

3、過肌肉組織切片技術(shù)觀察比較雞、鵪鶉、蛋雜交禽和肉雜交禽在胚胎期雞肉發(fā)育的不同階段，結(jié)果表明雞、蛋雜交禽和肉雜交禽的肌肉發(fā)育進(jìn)程比鵪鶉大約慢兩天，用目鏡測微尺測量肌纖維間距發(fā)現(xiàn)雞肌纖維間距>肉雜交禽>蛋雜交禽>鵪鶉。
　　（2）肌纖維直徑的測量結(jié)果顯示：雞肌纖維直徑>肉雜交禽>蛋雜交禽>鵪鶉，每個類群間存在極顯著差異（P<0.01）；同時肌纖維直徑隨著胚胎的發(fā)育而增粗。
　?。?）MyoD、MSTN和MLP基因在四個類群中存在

4、差異表達(dá)，推測MyoD、MSTN和MLP可能是造成肌肉性狀差異的主要候選基因。
　?。?）通過超微結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)鵪鶉第17天可以明顯觀察到肌節(jié)，其他三個類群觀察不到；但由于單束肌纖維外包裹有肌膜、肌內(nèi)膜、肌束膜和肌外膜，對肌纖維超微結(jié)構(gòu)的觀察造成了影響，應(yīng)用SEM觀察胚胎期肌肉發(fā)育過程中肌纖維的超微結(jié)構(gòu)有待進(jìn)一步研究。
　?。?）MyoG基因在肉雜交禽和蛋雜交禽中比雞和鵪鶉提前2天高表達(dá)，為進(jìn)一步驗證MyoG基因可能是導(dǎo)致雜交