利用cDNa-AFLP技術對大白菜、蘿卜雜交種差異表達基因的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、雜種優(yōu)勢是生物界普遍存在的十分重要的生物學現象,并在多種動植物中得到成功的利用。蕓薹屬(Brassica)作物是雜種優(yōu)勢利用最為普遍的一類作物。國內外學者在近一個世紀對雜種優(yōu)勢機理的研究中做了大量的理論和實驗探討,在方法和指導思想上取得了一些進展,提出了許多的學說。雜種優(yōu)勢產生的機理仍然是一個末解之謎,還有許多問題需要深入研究。
   本文以大白菜和蘿卜雜交種及其親本為材料,應用cDNA-AFLP技術研究基因的差異表達,方法如下

2、:在蓮座期剪取嫩葉,提取葉子的總RNA,利用反轉錄酶將其反轉錄成cDNA后進行AFLP(amplifiedfragmentlengthpolymorphism)指紋圖譜分析。cDNA-AFLP操作中選擇EcoRⅠ和MseⅠ對雙鏈cDNA進行限制性酶切,得到的粘性末端分別連接上人工接頭,預擴增后再用64對選擇性引物擴增并在6%聚丙烯酰胺凝膠電泳后用銀染方法染色進行指紋圖譜分析。
   本研究共得到44個在雜種F1特異表達的差異片段

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