蓖麻矮桿莖桿差異表達(dá)基因的cDNa-AFLP分析.pdf

1、我國蓖麻種植面積及產(chǎn)量均居世界前列。目前的蓖麻的品種普遍植株較高，不僅造成營養(yǎng)成分的大量浪費(fèi)，且由于株高較高、成熟期不統(tǒng)一等原因?qū)е虏灰子跈C(jī)械化收割。本研究通過現(xiàn)代生物技術(shù)手段篩選與調(diào)控蓖麻株高、葉型及產(chǎn)量相關(guān)的基因，以期為培育出節(jié)間較短、莖體粗壯而長(zhǎng)度適中、高產(chǎn)的蓖麻矮化良種奠定基礎(chǔ)。
　　cDNA-AFLP技術(shù)結(jié)合了RT-PCR和AFLP兩項(xiàng)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，很好的應(yīng)用于分析差異表達(dá)基因、優(yōu)勢(shì)機(jī)理、功能標(biāo)記分析、基因表達(dá)特性等多項(xiàng)研

2、究之中。
　　本研究以蓖麻BC2F2代矮桿和父本莖稈為試材，采用cDNA-AFLP技術(shù)分析始花期莖稈的差異表達(dá)基因，并對(duì)其進(jìn)行回收、克隆和序列分析，最后將得到的序列進(jìn)行生物信息學(xué)檢索及功能注釋。蓖麻矮化相關(guān)基因的發(fā)掘，為揭示蓖麻矮化的分子機(jī)制找到新的突破口。主要研究結(jié)果如下:
　　1.成功建立了蓖麻cDNA-AFLP技術(shù)體系。
　　2.利用所建立的技術(shù)體系分析始花期矮化株莖桿的基因表達(dá)差異。利用115對(duì)引物組合進(jìn)行了選

3、擇性擴(kuò)增，共得到差異條帶458條，通過回收、克隆獲得了其中128條目的片段，并對(duì)其進(jìn)行了序列測(cè)定。
　　3.將得到的測(cè)序序列與NCBI數(shù)據(jù)庫進(jìn)行同源性比對(duì)及功能檢索。結(jié)果表明，其中92條基因所表達(dá)的蛋白與已知蛋白具有較高的同源性，其余36條基因?yàn)槲粗?。發(fā)現(xiàn)的同源基因所表達(dá)蛋白有:調(diào)節(jié)植物莖伸長(zhǎng)蛋白或激素合成;調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)與分化的轉(zhuǎn)錄起始因子;在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中通過調(diào)控基因表達(dá)或信號(hào)傳導(dǎo)而影響細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的蛋白;對(duì)光刺激、溫度