豬舍環(huán)境氣載需氧菌的檢測及大腸桿菌氣溶膠的發(fā)生與傳播.pdf

1、微生物氣溶膠是畜禽舍環(huán)境污染的重要因素之一，氣溶膠的生物污染可以引起一系列傳染病的流行。目前，對畜禽舍環(huán)境中氣載微生物的研究，主要集中在某一特定時間段內和某些特定的病原菌上。關于畜禽舍環(huán)境中氣載需氧菌在一年四季中的動態(tài)變化、分布規(guī)律以及其傳播特點涉及較少。因此，本研究以山東省最常見的封閉式和半封閉式豬舍為研究對象，于2008年3月到2009年2月對其環(huán)境中氣載需氧菌進行檢測，并對其分布特征和危害進行了分析和評估；同時，以大腸桿菌為指示菌

2、，利用其ERIC（Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus）序列的特點和對不同抗生素耐藥性的差異，來分析不同來源大腸桿菌的同源性，從而揭示了微生物氣溶膠傳播的特點。
　　 本實驗從2008年3月到2009年2月，以5％血瓊脂培養(yǎng)基為采樣介質，利用Andersen-6級微生物空氣采樣器收集豬舍環(huán)境中空氣樣品，然后通過培養(yǎng)計數(shù)，分析氣載需氧菌濃度的動態(tài)變化和粒徑分布特點。封閉式豬

3、舍環(huán)境氣載需氧菌濃度在9.07×104～28.23×104 CFU/m3空氣；半封閉式豬舍環(huán)境氣載需氧菌濃度為12.02×104～24.95×104 CFU/m3空氣。冬季最高，夏季最低。氣載需氧菌主要分布在采樣器的A-D級上，F(xiàn)級最少。豬舍環(huán)境中氣載需氧菌含量不僅高，而且季節(jié)性波動較大，每天約有4.0×105CFU和4.9×106 CFU氣載需氧菌可分別進入人和豬的小支氣管或直接侵入肺泡，從而對人及豬的健康構成潛在威脅。
　　

4、 采用同一工作日由豬的糞便、舍內、外空氣中分離到的大腸桿菌菌株，每個取樣點取10株，選擇氟哌酸（NOR）、頭孢哌酮（CFP）、氯霉素（CMP）、復合磺胺（SXT）、慶大霉素（GEN）、鏈霉素（STR）、四環(huán)素（TET）、利福平（RIF）、紅霉素（ERY）、青霉素（P-G）、妥布霉素（TOB）、呋喃妥因（Ni）十二種藥敏紙片，進行耐藥性測定。結果顯示，豬舍內、舍外下風向空氣中分離到的菌株都對RIF、ERY、P-G耐藥，這在一定程度上可以證

5、明舍內微生物氣溶膠包括耐藥細菌可隨氣體交換傳播到周圍環(huán)境中，使其周圍環(huán)境受到微生物污染。
　　 采用Andersen-6級空氣微生物樣品收集器和RCS-離心式采樣器分別在4個豬場舍內空氣、舍外上風向10、50m和下風向10、50、100、200、400 m不同距離收集大腸桿菌氣溶膠，計算每一個采樣點的大腸桿菌的濃度；與此同時，采集豬的糞便、分離大腸桿菌。利用ERIC-PCR鑒定技術，擴增不同測量點收集的大腸桿菌的DNA條帶，形成

6、聚類圖譜。通過每一個采樣點分離的大腸桿菌遺傳相似性分析以及大腸桿菌濃度變化比較，確認動物舍微生物氣溶膠向舍外環(huán)境的傳播模式。結果顯示：4個豬場舍內空氣中大腸桿菌的濃度為21～35 CFU/m3空氣，遠遠高于舍外上風和舍外下風處的大腸桿菌濃度（P<0.05），但是舍外下風不同距離間的大腸桿菌濃度差異并不顯著（P>0.05）。ERIC-PCR結果表明，52.4％糞便大腸桿菌（4個豬舍分別為：2/4，50％；2/4，50％；3/6，50％；4