性激素對奶牛輸卵管上皮細(xì)胞前列腺素受體表達(dá)的調(diào)控作用.pdf

1、目的：為進(jìn)一步研究奶牛輸卵管中前列腺素類化合物及其受體的生殖生理作用提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)，本文分析研究了奶牛輸卵管上皮細(xì)胞前列腺素受體種類及性激素（雌激素和孕酮）對這些受體表達(dá)的調(diào)控作用。
　　方法：1）應(yīng)用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)奶牛輸卵管上皮細(xì)胞。2）分別用不同濃度（10-9～10-5mol/L）的前列腺素類化合物（PGE2、PGD2、butaprost）作用于第三代傳代輸卵管上皮細(xì)胞，然后應(yīng)用Elisa技術(shù)檢測奶牛輸卵管

2、上皮細(xì)胞中第二信使cAMP含量的變化。3）分別用不同濃度（10-12～10-8mol/L）雌激素和孕激素，按4h和24h作用傳代的第三代輸卵管上皮細(xì)胞，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測奶牛輸卵管上皮細(xì)胞中前列腺素類受體的種類及其mRNA表達(dá)的變化。4）雌激素受體阻斷劑和孕激素受體阻斷劑分別與相應(yīng)的受體激素共同作用于細(xì)胞，通過熒光定量RT-PCR技術(shù)進(jìn)一步證實(shí)性激素（E2和P4）對奶牛輸卵管上皮細(xì)胞中前列腺素受體表達(dá)的調(diào)控作用。

3、>　　結(jié)果：首先，成功培養(yǎng)獲得了奶牛輸卵管上皮細(xì)胞的原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞，且第三代細(xì)胞生長良好，可用于上皮細(xì)胞中cAMP量和前列腺素受體mRNA表達(dá)的檢測。其次，PGE2、PGD2和butaprost對上皮細(xì)胞的處理后，細(xì)胞中cAMP含量發(fā)生顯著的變化，且PGE2、PGD2和butaprost可濃度依存性的升高cAMP含量，證明奶牛輸卵管上皮細(xì)胞中存在前列腺素受體 EP2、EP4和DP受體。最后，雌激素和孕激素對奶牛輸卵管上皮細(xì)胞前列腺素

4、受體 mRNA表達(dá)的調(diào)控作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，奶牛輸卵管上皮細(xì)胞中存在前列腺素受體EP1、EP2、EP3、EP4、FP和TP受體。此外，低濃度（10-12mol/L）的雌激素和孕激素對奶牛輸卵管上皮細(xì)胞中前列腺素受體mRNA的表達(dá)具有調(diào)控作用。
　　結(jié)論：奶牛輸卵管上皮細(xì)胞中存在前列腺素受體EP1、EP2、EP3、EP4、FP和TP受體。雌激素和孕激素對前列腺素類受體的表達(dá)具有調(diào)控作用，提示在奶牛輸卵管上皮細(xì)胞性激素－前列腺素－前列