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1、目的:1.觀察不同濃度胰島素對(duì)人腎近端小管上皮細(xì)胞(HK-2)hUAT基因表達(dá)的影響。2.觀察不同濃度的雌激素和睪酮對(duì)HK-2細(xì)胞hUAT基因表達(dá)的影響。 方法:體外培養(yǎng)HK-2細(xì)胞,使其呈單層貼壁細(xì)胞,將其置于不含血清的培養(yǎng)液中24h,然后分別加入不同濃度的胰島素、雌激素和睪酮,培養(yǎng)48h后收集細(xì)胞抽提總RNA,熒光定量PCR共擴(kuò)增hUAT和GAPDH片段,應(yīng)用SDS軟件計(jì)算hUAT mRNA相對(duì)表達(dá)量。應(yīng)用SPSS11.0軟
2、件進(jìn)行t檢驗(yàn)和單因素方差分析,顯著性標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05。 結(jié)論:(1)高胰島素血癥可能通過下調(diào)腎小管hUAT基因表達(dá)和促進(jìn)腎小管對(duì)尿酸的重吸收,使腎臟尿酸排泄減少,導(dǎo)致高尿酸血癥。(2)雌激素可能通過上調(diào)hUAT基因表達(dá),促進(jìn)腎臟尿酸排泄,預(yù)防高尿酸血癥的發(fā)生。這可能是絕經(jīng)前后女性高尿酸和痛風(fēng)發(fā)病率明顯不同的重要原因。(3)睪酮可能通過下調(diào)hUAT的基因表達(dá),使腎臟尿酸排泄減少,這可能是男性高尿酸和痛風(fēng)發(fā)病率明顯高于女性的重要原
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