烏龍茶種質資源的RAPD分析與離體保存.pdf

1、福建茶樹種質資源十分豐富,本研究以福建的30份烏龍茶茶樹品種(系)為研究對象,采用RAPD分子標記技術,分析品種間的遺傳多樣性與親緣關系。同時,以離體保存的金鳳凰為材料,研究了烏龍茶種質限制性離體保存方法。主要研究結果如下:
　　 1.茶樹富含多酚、多糖等雜質,增加了提取高質量DNA的難度。本研究在前人研究基礎上,摸索出一套操作簡單、快速提取茶樹DNA的改良CTAB法。結果表明,提取的茶樹DNA在質量和數(shù)量上均可滿足RAPD-P

2、CR要求。
　　 2.從37條RAPD隨機引物中篩選出11條多態(tài)性引物,對30份茶樹品種(系)進行RAPD—PCR擴增,共擴增獲得125條譜帶,其中多態(tài)性條帶為108條,多態(tài)性百分率為86.40％。應用NTsys2.10e軟件,進行遺傳相似性系數(shù)計算,30份茶樹品種之間的遺傳相似系數(shù)在0.41～0.83之間。結果表明,烏龍茶茶樹種質資源的遺傳變異寬廣,多態(tài)性高,遺傳資源豐富。
　　 3.依據(jù)RAPD結果,對供試的茶樹品種

3、進行聚類分析,構建了聚類樹狀圖,揭示了不同茶樹品種之間的親緣關系和遺傳相似性。當以相似系數(shù)為0.40劃分時,將30份茶樹資源分為3個類群,其中筲綺品種單獨為一類,大部分原產(chǎn)于安溪的茶樹品種(系)聚為一大類。金觀音的母本是鐵觀音,RAPD分析得到兩者的Nei遺傳相似系數(shù)分別是0.82,顯示金觀音與鐵觀音親緣關系較近,驗證了將RAPD技術作為品種親緣關系鑒定的可靠性。RAPD分析結果,為以后育種工作奠定理論依據(jù),提高育種效率。
　　

4、 4.在烏龍茶茶樹種質離體保存研究中,以金鳳凰品種為材料,比較了不同濃度的甘露醇、蔗糖等滲透劑以及PP333和ABA兩種生長抑制劑等因素對茶樹試管苗的限制性離體保存的影響。結果表明,在1／2MS培養(yǎng)基中添加15 g／L甘露醇的處理,保存效果最好,最適培養(yǎng)基為1／2MS+15 g／L甘露醇,7個月后比較各處理存活率,此培養(yǎng)基上最高,為82.2％。適合金鳳凰長期離體繼代的基本培養(yǎng)基是1／2MS,最適的蔗糖、PP333和ABA的濃度分別是:3