蘑菇疣孢霉病生防菌FJ-08的初步研究.pdf

1、培養(yǎng)過程中發(fā)現,經分離獲得一株蘑菇疣孢霉病生防菌FJ-08,該菌對福建省廣泛分布的三類疣孢霉菌有拮抗作用。通過形態(tài)特征的觀察、生理生化實驗、16SrDNA測序鑒定以及采用VITEK全自動微生物鑒定儀進行鑒定。鑒定結果表明該菌為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)。
　　 FJ-08的培養(yǎng)條件研究結果表明:其對數生長期在30h-72h,72h后逐漸進入衰亡期。FJ-08的最適生長溫度為37℃,適宜生長的pH范圍為6.0

2、-8.0,且FJ-08的最適pH為pH6.5。接種量為7.00％時,FJ-08的生長量達到最大。FJ-08的最適裝液量為100mL,/250mL。通過四因子三水平的正交實驗結果顯示:FJ-08培養(yǎng)條件的最優(yōu)組合為:溫度37℃、pH值6.5、裝液量125mL/250mL、接種量9％。影響OD值的主要因素是溫度和pH值,且溫度的影響較pH更大。營養(yǎng)條件的研究表明,FJ-08對有機氮的利用較好,其中酵母浸膏為最佳利用氮源。D-半乳糖為FJ-0

3、8的最佳利用碳源,但結合來源及性價比進行綜合考慮,采用以蔗糖為碳源的培養(yǎng)基更合適。FJ-08培養(yǎng)的最適酵母浸膏濃度為7.5％、蔗糖濃度為6.5％。
　　 通過FJ-08提取液的LC-MS檢測結果,推測FJ-08提取液中起作用的成分可能是表面活性素和伊枯草菌素。
　　 從不同處理方法對疣孢霉與雙孢蘑菇菌絲生長的影響可知,甲醇對蘑菇As.0002+1菌絲生長的影響很大。隨著甲醇添加量的增加,As.0002+1菌絲生長長度越來

4、越短,到X4(培養(yǎng)基中添加2mL甲醇)時菌絲幾乎不生長。另外D2(培養(yǎng)基中直接添加發(fā)酵液)其中的As.0002+1菌絲生長要優(yōu)于D1,進一步說明了甲醇對As.0002+1的嚴重影響。D2與D3(培養(yǎng)基中添加粗提物)相比,兩者對As.0002+1菌絲生長的影響也達到了顯著水平。但D2對M.p.001菌絲生長的抑制作用比As.0002+1強。另外,D2(培養(yǎng)基中直接添加發(fā)酵液)對疣孢霉菌絲生長抑制顯著,雖然對蘑菇的菌絲生長的影響也達到了顯著

5、水平,但其抑菌率要遠遠小于對疣孢霉的抑菌率。因此,在防治疣孢霉上,選擇D2最為合適。且當濃度達到x1(培養(yǎng)基添加0.5mL的發(fā)酵液)時,其對疣孢霉的抑菌作用達到顯著,而對蘑菇的影響最小。
　　 雙孢蘑菇(As.2796)栽培方面,同一處理中,三類疣孢霉對As.2796的感染比例不同。不同處理中,三類疣孢霉對As.2796的感染比例也各異。此外,三種處理均使得三類疣孢霉對As.2796的感染比例比對照要低得多:用提取液處理,三類疣