禾長(zhǎng)蠕孢菌用于稗草生防綜合評(píng)價(jià)及功能改造研究.pdf

1、湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文禾長(zhǎng)蠕孢菌用于稗草生防綜合評(píng)價(jià)及功能改造研究姓名：黃世文申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：羅寬200405014、HGE菌對(duì)稗草的致病性較高，但其流行病學(xué)條件要求也較高。以25107孢子，M2以上濃度的HGE菌噴霧接種，接種后保持25—28℃、RH95％以上、12—18小時(shí)黑暗的環(huán)境條件，HGE菌對(duì)15—20葉期的稗草秧苗的株感病率、株死亡率均可達(dá)85％以上，干重防效達(dá)75％以上。HGE菌對(duì)1O50葉期

2、的稗苗的感病株率達(dá)80％以上，對(duì)103O葉期株死亡率85％以上，干重防效最高的是3O葉期，達(dá)83％以上。5、HGE菌在PDA培養(yǎng)基上產(chǎn)生黑色毒素、在改良Fries(IFL)和稗汁葡萄糖培養(yǎng)液中震蕩發(fā)酵培養(yǎng)均能產(chǎn)生寄主專(zhuān)化性毒素。毒素對(duì)稗草具有明顯的抑制作用，對(duì)水稻無(wú)毒。毒素與孢子混用，或先噴毒素后噴孢子液對(duì)稗草的致病性強(qiáng)于單獨(dú)噴霧孢子或毒素。發(fā)酵濾液經(jīng)濃縮、萃取獲得粗毒素，粗毒素稀釋200倍對(duì)稗草具有較強(qiáng)的毒性。粗毒素經(jīng)紫外光譜分析，有

3、4個(gè)吸收峰值，與小麥根腐長(zhǎng)蠕孢菌毒素相似，推測(cè)為萜類(lèi)化合物。其成分和化學(xué)結(jié)構(gòu)有待進(jìn)一步研究、分析。6、HGE菌對(duì)稗草的致病機(jī)理：HGE菌孢子液噴霧接種后，首先通過(guò)孢子分泌毒素使稗草葉片產(chǎn)生斑點(diǎn)，致使稗植株長(zhǎng)勢(shì)減弱，抗性下降；同時(shí)孢子從兩端細(xì)胞萌發(fā)產(chǎn)生芽管，芽管穿過(guò)葉片表皮細(xì)胞進(jìn)入葉肉組織，繼續(xù)繁殖、侵染，導(dǎo)致葉片病斑擴(kuò)大、枯死，最終導(dǎo)致感病植株枯死。7、HGE菌在液體培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)可產(chǎn)生大量菌絲體。粉碎菌絲體進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，可使菌絲體產(chǎn)

4、生孢子，但孢子量不多。用HGE菌的菌絲體、PDA菌塊及其孢子懸液作為接種體，接種到固體培養(yǎng)基上，進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng)，可大量生產(chǎn)HGE菌孢子，孢子產(chǎn)量隨接種體量、濃度的增加而提高。以孢予懸液作接種體時(shí)孢子產(chǎn)量最高。8、從十多種廉價(jià)、易得的農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)物質(zhì)中篩選出以稗草植株為主要基質(zhì)的HGE菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基。添加少量化合物并優(yōu)化參數(shù)后，HGE菌在稗草基質(zhì)培養(yǎng)基上平均每克干物質(zhì)產(chǎn)孢量為679106個(gè)孢子，最大產(chǎn)孢量達(dá)到797106／克干物質(zhì)。產(chǎn)孢量

5、比國(guó)外同類(lèi)研究提高了近3倍，該技術(shù)已申報(bào)國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利。9、用亞硝基胍州TIG)誘變HGE菌，獲得誘變菌株1262，其孢子產(chǎn)量比原始菌株(HGE)提高526％。再以1262為出發(fā)菌株，用60c“射線(xiàn)650Gy劑量輻照57min，有775％的菌株產(chǎn)孢量高于出發(fā)菌株，其中代號(hào)為FIIl2l、FIIIl6和FIIl40的輻照菌株的產(chǎn)孢量分別比1262提高544％、515％和417％?；瘜W(xué)和物理技術(shù)相結(jié)合處理稗草生防潛力菌，獲得的突變菌株產(chǎn)孢量比