除草微生物禾長(zhǎng)蠕孢菌種誘變改良及分子鑒定.pdf

1、草害是制約農(nóng)作物產(chǎn)量的主要因子之一。目前，雜草的防治主要依賴(lài)化學(xué)除草劑，但其對(duì)環(huán)境的負(fù)面影響日益受到人們的關(guān)注，減少化學(xué)除草劑的使用是未來(lái)農(nóng)業(yè)的發(fā)展趨勢(shì)。發(fā)展微生物除草劑，實(shí)現(xiàn)雜草的生物防治，可以大幅度減少化學(xué)除草劑的使用，實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。禾長(zhǎng)蠕孢稗草專(zhuān)化型(HelminthosporiumgramineumRabenhf.sp.echinochloae，簡(jiǎn)稱(chēng)HGE)，是本實(shí)驗(yàn)室從感病的稗草上分離獲得、由中國(guó)科學(xué)院微生物研究所完成

2、菌種鑒定。HGE對(duì)稗草的致病力強(qiáng)，對(duì)水稻安全，是稗草生物防治的潛力菌。為進(jìn)一步提高該菌種的孢子產(chǎn)量和代謝產(chǎn)物產(chǎn)量，采用紫外誘變對(duì)該菌種進(jìn)行了改良。 經(jīng)過(guò)篩選和評(píng)價(jià)，獲得適合液體發(fā)酵和固體發(fā)酵的突變菌株M1和M3。其中突變菌株M1菌落生長(zhǎng)疏松，氣生菌絲多，菌落呈灰白色至白色，與出發(fā)菌株HGE有顯著區(qū)別，該突變菌株生長(zhǎng)速度快，菌絲體和發(fā)酵液毒素產(chǎn)量分別達(dá)到7.0g/L和15.98mg/L。另一突變菌株M3菌落生長(zhǎng)緊密，氣生菌絲少，菌

3、落呈黑色，與出發(fā)菌株HGE相似。突變菌株M3的孢子產(chǎn)量達(dá)到1.21×107/皿，比出發(fā)菌株提高21％。兩突變菌株均具有良好的遺傳穩(wěn)定性，對(duì)水稻、玉米等作物安全。利用RAPD-PCR方法對(duì)出發(fā)菌株和突變菌株M1和M3進(jìn)行了分子鑒定，初步說(shuō)明突變菌株的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變。對(duì)出發(fā)菌株和突變菌株的固體發(fā)酵和液體發(fā)酵工藝進(jìn)行了初步研究，確定了相應(yīng)的最佳發(fā)酵條件。其中固體發(fā)酵的最佳條件是稗草基質(zhì)培養(yǎng)基中添加生長(zhǎng)因子③，以2菌塊/克稗草干物質(zhì)接種，2