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文檔簡(jiǎn)介
1、仔豬腹瀉是目前嚴(yán)重危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要疾病,引起仔豬腹瀉的病毒源主要是豬傳染性胃腸炎病毒(Poorcine transmissibLe gastroenteritis,TGEV)、豬流行性腹瀉病毒(Poricine epidemic diarrhoea,PEDV)和輪狀病毒(Rotavirus,RV)。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)制備抗仔豬病毒性腹瀉的高免全蛋粉和明膠.海藻酸-IgY微膠囊發(fā)揮被動(dòng)免疫作用,對(duì)該病進(jìn)行預(yù)防及治療。
1、采
2、用豬流行性腹瀉、傳染性胃腸炎、輪狀病毒油乳苗(以下簡(jiǎn)稱‘三聯(lián)苗’)與不同的佐劑混合免疫雞群的方法。間接ELISA檢測(cè)結(jié)果:佐劑中添加胸腺肽免疫組免疫效果明顯優(yōu)于僅用油佐劑免疫組,其產(chǎn)生的IgY效價(jià)高且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。先用弱毒苗做基礎(chǔ)免疫,再用油佐劑苗加強(qiáng)免疫效果明顯優(yōu)于僅用油佐劑苗免疫組。因此,以弱毒苗進(jìn)行基礎(chǔ)免疫,再用胸腺肽油佐劑苗進(jìn)行加強(qiáng)免疫是制備IgY的最佳方法。
2、利用噴霧干燥技術(shù)制備微膠囊及高免全蛋粉,通過(guò)對(duì)噴霧干
3、燥工藝條件的優(yōu)化,獲得制備微膠囊最佳工藝為:進(jìn)風(fēng)溫度170℃、進(jìn)料速度10 mL/min、干燥速度lOs、出口溫度70℃;制備高免全蛋粉最佳工藝為:進(jìn)風(fēng)溫度180℃、進(jìn)料速度10mL/min、干燥速度5s、出口溫度70℃,在上述條件下制備微膠囊及高免全蛋粉,性狀最好且IgY活性保持較高水平。
為保護(hù)IgY口服時(shí)不受酸、堿及胃蛋白酶的破壞,本試驗(yàn)選用天然材料明膠和海藻酸鈉作為壁材,按上述篩選噴霧干燥的最佳工藝,研究制各明膠.
4、海藻酸鈉-IgY微膠囊的成囊條件。經(jīng)篩選優(yōu)化確定微膠囊成囊的最佳條件為:明膠濃度4%,海藻酸鈉0.75%,Tween-801%,成囊溶液pH值4.0。以此條件制備微膠囊的包封率為75%,IgY活性保持在80%以上。通過(guò)人工胃腸液的體外釋放試驗(yàn)表明,微膠囊在人工胃液2h的釋放率不超過(guò)10%,人工腸液4h的釋放率達(dá)到超過(guò)80%。采用間接ELISA方法和SDS-PAGE電泳對(duì)微膠囊中IgY結(jié)構(gòu)和活性進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示,微膠囊通過(guò)人工胃液再進(jìn)入
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