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文檔簡介
1、阿維菌素(AVM)和伊維菌素(IVM)是兩種大環(huán)內酯類抗寄生蟲藥,在我國畜禽和水產養(yǎng)殖上已獲廣泛應用。為了監(jiān)測鯽魚肌肉(包括皮)中AVM和IVM殘留情況,以及為制定合理的休藥期提供科學依據,本文建立了鯽魚肌肉(包括皮)中AVM和IVM高效液相色譜-熒光(HPLC-FLD)多殘留檢測方法,分別研究了AVM和IVM在鯽魚肌肉(包括皮)中的殘留消除規(guī)律,并對重慶市部分地區(qū)的鯽魚進行了肌肉(包括皮)中AVM和IVM的殘留檢測。 鯽魚肌肉
2、(包括皮)中AVM和IVM多殘留檢測的方法學研究:樣品用乙腈提取,正己烷脫脂凈化,多拉菌素作內標,經1-甲基咪唑和三氟乙酸酐的乙腈溶液在室溫下避光衍生化并在甲醇中水解后,進行HPL-FLD檢測分析。色譜條件為,流動相:甲醇/水(94/6,v:v);流速:1.0mL/min;,檢測波長:激發(fā)波長365nm,發(fā)射波長475nm;柱溫:35℃;進樣量:20μL。結果,AVM和IVM在5~100ng/g范圍內具有良好線性,R2均為0.9998;
3、檢測限分別為0.8ng/g和1 ng/g,定量限分別為2.7 ng/g和3.4 ng/g;AVM和IVM的提取回收率分別為92.15%~104.53%和91.32%~103.03%;方法回收率分別為90.50%~104.54%和94.08%~106.38%:日內和日間變異系數分別小于9.29%、7.74%和5.84%、6.71%。該方法高效、靈敏、簡便,其靈敏度、回收率和重現(xiàn)性等符合有關獸藥殘留檢測要求,可用于鯽魚肌肉中AVM和IVM的
4、多殘留檢測。 AVM和IVM在鯽魚肌肉中的殘留消除規(guī)律研究:試驗模擬水產養(yǎng)殖實際,在27~31℃的自然水溫中,分兩個試驗進行,每個試驗的試驗組飼養(yǎng)45 g左右的健康鯽魚100尾,50尾作對照組。試驗一,在魚缸中單次潑灑AVM乙醇溶液,使水體中AVM濃度為1.32 ng/mL;試驗二組,在魚缸中單次潑灑IVM乙醇溶液,使水體中IVM濃度為1.23 ng/mnL。對照組不添加藥物。給藥后0、1、3、5、8、10、11、14、16、2
5、1、25、28、32和35 d取樣,采集鯽魚肌肉(包括皮)樣品,用本研究所建立的方法分別檢測鯽魚肌肉(包括皮)中AVM和IVM殘留量。結果,給藥后0 d(給藥后4和5 h即為零休藥期),鯽魚肌肉(包括皮)中AVM含量為13.68±4.68 ng/g,IVM含量為8.1±1.67 ng/g;AVM和IVM殘留濃度均在給藥后第3 d達到峰值,分別為36.38±6.20 ng/g和25.47+3.16 ng/g;AVM殘留濃度約在給藥后第10
6、 d降至一半,IVM約在給藥后第11 d天降至一半:鯽魚肌肉(包括皮)中AVM在給藥后第32 d未檢出,WM在給藥后第28 d未檢出。鯽魚肌肉(包括皮)中AVM的藥動學主要參數分別為:峰殘留量(Cmax)為31.42 ng/g,達峰時間(Tmax)為3.53 d,曲線下面積(AUC)為469.88d.ng/g,消除半衰期(t2/2)為7.48 d。消除曲線方程:LnC=-0.0922t+3.8985,用此方程計算消除半衰期t1/2e為7
7、.52 d。鯽魚肌肉(包括皮)中IVM的藥動學主要參數分別為:Cmax為24.51ng/g,Tmax為3.91 d,AUC為293.13d ng/g,t1/2k為4.42d。消除曲線方程:LnC=-0.1382t+3.9202,用此方程計算消除半衰期t1/2e為5.01 d。結果表明:鯽魚對水中的這兩種藥物中吸收快,蓄積濃度不高,滯留時間較長,消除較為緩慢。目前,國內外尚無AVM和IVM在鯽魚體內的MRL(最高殘留限量)及休藥期(WDT
8、)規(guī)定,本研究分別參照歐盟(EC)和中國農業(yè)部法規(guī)中規(guī)定的AVM(標記殘留物AVM B1a)在羊肌肉的MRL20μg/kg和25 μg/kg,通過WDT公式計算,AVM對于鯽魚的WDT理論上分別為9.79 d和7.37 d;通過WT1.4軟件分析,WDT分別為14.97 d和12.64 d,考慮理論與實際的差別,建議延長至19 d;參照歐盟(EC)和中國農業(yè)部法規(guī)規(guī)定的WM(標記殘留物IVM H2B1a)在羊肌肉的MRL20 μg/kg
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