肉雞組織中癸氧喹酯檢測(cè)方法及殘留消除規(guī)律的研究.pdf

1、癸氧喹酯(decoquinate)化學(xué)名為6-癸氧基-7-乙氧基-4-羥基-3-喹啉羧酸乙酯,屬化學(xué)型喹啉類(lèi)抗球蟲(chóng)藥,主要用于預(yù)防肉仔雞的球蟲(chóng)病。由于癸氧喹酯引入中國(guó)時(shí)間較短,有關(guān)癸氧喹酯在動(dòng)物組織中的殘留研究報(bào)道匱乏。本研究應(yīng)用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法成功建立了肉雞各組織中癸氧喹酯殘留檢測(cè)方法并分析癸氧喹酯在肉雞體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征及各組織中藥物殘留消除規(guī)律,為該藥殘留監(jiān)控提供技術(shù)支持。目前該系列檢測(cè)方法未見(jiàn)有研究報(bào)道。主要研究結(jié)果如下:

2、
　　 1、首次建立雞血漿中癸氧喹酯的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。血漿樣品經(jīng)乙腈提取,氮?dú)饬鞔蹈?采用0.1％甲酸乙腈溶液和0.1％甲酸水溶液為流動(dòng)相,溶解殘?jiān)?。采用電噴霧正離子電離模式,多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)檢測(cè)模式,以?xún)?nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。結(jié)果表明:癸氧喹酯在1 ng／mL～200 ng／mL范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r2均大于0.99；0.5、1、50ng／mL3個(gè)添加水平的回收率為85.0％～96.9％,批內(nèi)、批間相對(duì)

3、標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于15％,方法檢出限為0.1 ng／mL,定量限為0.25 ng／mL。該方法簡(jiǎn)單快速、靈敏度高、選擇性強(qiáng),可用于雞血漿中癸氧喹酯的藥動(dòng)學(xué)研究。
　　 2、首次建立雞肉、雞肝和雞腎組織中癸氧喹酯殘留的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。樣品經(jīng)乙腈提取,正已烷脫脂,HLB固相萃取小柱凈化；采用0.1％甲酸乙腈溶液和0.1％甲酸水溶液為流動(dòng)相,電噴霧正離子電離模式,多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)檢測(cè)模式,以?xún)?nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。結(jié)

4、果表明:癸氧喹酯在1.0、10、100μg／kg3個(gè)添加水平的回收率均在75.5％～102.7％范圍內(nèi),批內(nèi)、批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于15％,方法檢出限為0.25μg／kg,定量限為0.5μg／kg。
　　 3、首次建立雞糞便中癸氧喹酯的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。樣品經(jīng)乙腈提取,HLB固相萃取小柱凈化；采用0.1％甲酸乙腈溶液和0.1％甲酸水溶液為流動(dòng)相,電噴霧正離子電離(ESI+)模式,多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)檢測(cè)模

5、式,以?xún)?nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。結(jié)果表明:癸氧喹酯在5.0、10、100μg／kg3個(gè)添加水平的回收率均在84.4％～100.1％范圍內(nèi),批內(nèi)、批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于15％,方法檢出限為2.5μg／kg,定量限為5μg／kg。
　　 4、癸氧喹酯在肉雞體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究。選用10只健康青腳麻雞,按10mg／kgb.w.的劑量進(jìn)行單次灌服癸氧喹酯在肉雞體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)研究。肉雞口服給藥癸氧喹酯的血漿藥時(shí)數(shù)據(jù)符合一級(jí)吸收二室開(kāi)放模型,

6、主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù):吸收半衰期為2.614h,分布半衰期為3.944h,消除半衰期為19.334h,達(dá)峰時(shí)間長(zhǎng)達(dá)15h,達(dá)峰濃度較低,為43.048ng／mL,藥物在血漿中的平均滯留時(shí)間為47.065h。結(jié)果表明肉雞口服癸氧喹酯后吸收慢且不完全,但吸收進(jìn)入血漿中的癸氧喹酯消除緩慢。
　　 5、癸氧喹酯在肉雞體內(nèi)的殘留消除規(guī)律研究。選用36只健康青腳麻雞,按10mg／kg b.w.的劑量進(jìn)行單次灌服癸氧喹酯在肉雞胸肌、腿肌、肝臟和腎臟

7、組織中的殘留消除規(guī)律研究。結(jié)果表明:停藥1d,癸氧喹酯在肝臟中殘留量最高,達(dá)242μg／kg,在胸肌中最低為42μg／kg,停藥3d后癸氧喹酯均從不同組織中迅速消除,且殘留量均小于300μg／kg,遠(yuǎn)低于農(nóng)業(yè)部235號(hào)公告所規(guī)定的2000μg／kg最高殘留限量要求,證明現(xiàn)行的休藥期5d是合理的。停藥后0～5d,肝臟中癸氧喹酯的殘留量在幾種常見(jiàn)組織中均最高,肝臟可作為動(dòng)物源性食品中癸氧喹酯殘留監(jiān)控靶組織。
　　 6、雞糞中癸氧喹酯

8、殘留消除規(guī)律的研究。選用6只健康青腳麻雞,按10mg／kgb.w.的劑量進(jìn)行單次灌服癸氧喹酯在肉雞糞便中的殘留消除規(guī)律研究。結(jié)果表明:停藥第1d癸氧喹酯的殘留量就高達(dá)85.261 mg／kg,用藥劑量的65.6％被排泄；停藥2d后殘留量迅速下降至2.835mg／kg,用藥劑量的75.9％被排泄,表明癸氧喹酯在肉雞體內(nèi)吸收率低,生物利用度差,大部分藥物未經(jīng)吸收就直接通過(guò)糞便排出體外。糞便是癸氧喹酯在肉雞體內(nèi)的主要排泄途徑。
　　

9、7、福建省肉用雞癸氧喹酯殘留狀況調(diào)查。分別隨機(jī)選取了我省八地市70個(gè)肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查,共發(fā)放問(wèn)卷70份,回收問(wèn)卷70份,并按照隨機(jī)原則在各設(shè)區(qū)、市市場(chǎng)遵照官方取樣程序進(jìn)行取樣,共抽取了雞肉樣品和雞肝樣品各74份,并應(yīng)用所建立的檢測(cè)方法進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明:我省大部分養(yǎng)殖場(chǎng)從未使用過(guò)癸氧喹酯抗球蟲(chóng)藥,抽檢的148份雞肉和雞肝樣品中也均未檢出癸氧喹酯殘留,表明癸氧喹酯在我省仍是一種有效的抗球蟲(chóng)藥,具有很大的發(fā)展前景。
　　 綜上所述