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1、為評(píng)估目前國(guó)內(nèi)凡納濱對(duì)蝦苗種的遺傳變異情況,本文以引進(jìn)美國(guó)佛羅里達(dá)州邁阿密SPF凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)親本(QB)、F1、F2代,及由在中國(guó)養(yǎng)殖多代的凡納濱對(duì)蝦為親本培育的Fn代為試驗(yàn)對(duì)象,通過(guò)AFLP標(biāo)記技術(shù)和ITS-1序列對(duì)4個(gè)群體進(jìn)行遺傳多樣性分析,為我國(guó)凡納濱對(duì)蝦的健康養(yǎng)殖和進(jìn)一步進(jìn)行良種選育,建立凡納濱對(duì)蝦良種繁育體系提供參考依據(jù),以促進(jìn)我國(guó)的對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。1.利用AFLP對(duì)4個(gè)不同世代
2、的凡納濱對(duì)蝦群體進(jìn)行遺傳分析,探討親本、F1代、F2代和Fn代4個(gè)世代群體間的遺傳差異。選取10對(duì)AFLP引物組合對(duì)4個(gè)世代凡納濱對(duì)蝦群體共80尾個(gè)體進(jìn)行比較分析,共擴(kuò)增出483個(gè)位點(diǎn),其中348個(gè)為多態(tài)位點(diǎn);4代群體的多態(tài)位點(diǎn)比例為:61.90%、49.28%、50.52%、46.38%;4代群體的Shannon多樣性指數(shù)分別為:0.3134、0.2621、0.2594、0.2262;結(jié)果表明QB與F1代,F(xiàn)2代與Fn代相互間遺傳距離
3、更為緊密。2.對(duì)凡納濱對(duì)蝦ITS-1序列進(jìn)行了克隆測(cè)序,并對(duì)ITS-1序列進(jìn)行了分析,結(jié)果顯示,凡納濱對(duì)蝦ITS-1序列長(zhǎng)度為614bp,已登錄GenBank數(shù)據(jù)庫(kù),登錄號(hào)為GQ392035。與從GenBank中檢索到的8種對(duì)蝦的ITS-1序列比較顯示,相似性在39.29%-71.84%之間;根據(jù)凡納濱對(duì)蝦與其他9種對(duì)蝦ITS-1序列的同源性構(gòu)建進(jìn)化樹,得出了凡納濱對(duì)蝦與細(xì)角濱對(duì)蝦、南方濱對(duì)蝦、白濱對(duì)蝦的關(guān)系更為接近。利用AMOVA軟件
4、對(duì)四個(gè)不同世代的32尾凡納濱對(duì)蝦進(jìn)行遺傳多樣性分析,結(jié)果顯示QB與F1代,F(xiàn)2代與Fn代更為接近。利用最小自由能對(duì)32尾凡納濱對(duì)蝦ITS-1序列進(jìn)行二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè),結(jié)果為QB有1個(gè)特殊結(jié)構(gòu),F(xiàn)1有1個(gè),F(xiàn)2有3個(gè),F(xiàn)n有3個(gè)。除QB的特殊結(jié)構(gòu)外,其余的特殊結(jié)構(gòu)主要是由于ITS-1序列前約200個(gè)堿基中(GCA)n、(GCC)n和(GCGA)n三種微衛(wèi)星數(shù)目的差異所造成的。
本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)進(jìn)口親本與F1代的親緣關(guān)系更為接近,而
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