緊密連接蛋白、上皮細胞鈣粘蛋白、腫瘤壞死因子在犬乳腺腫瘤組織中的表達.pdf

1、在獸醫(yī)臨床中，母犬乳腺腫瘤是一種常見的腫瘤疾病。犬乳腺腫瘤在病因、組織學特性、治療方法及預后等方面與人乳腺腫瘤很相似。因此，犬的自發(fā)性腫瘤可作為人醫(yī)乳腺腫瘤的模型。本試驗采用病理組織學、免疫組化、分子生物學等方法，就與腫瘤生長發(fā)育密切相關(guān)的緊密連接蛋白（Claudin-1）、上皮細胞鈣粘蛋白（E-cadherin）、腫瘤壞死因子（TNF-α）等在自然發(fā)生的乳腺腫瘤組織中的表達及其意義進行研究，以期對臨床犬乳腺腫瘤疾病的診斷與治療提供理論

2、依據(jù)。
　　 1.Claudin-1、E-cadherin在犬乳腺腫瘤組織中的表達
　　 本試驗對外科手術(shù)摘除的10個疑似犬乳腺腫瘤樣本采用病理組織學觀察進行分類后，利用T抗Claudin-1和E-cadherin抗體對病料組織進行免疫組織化學檢測，并對抗體表達和病理類型進行比較。結(jié)果表明，在所檢的乳腺腫瘤中，惡性乳腺腫瘤占60％，其中乳腺浸潤性導管癌占40％；良性腫瘤占20％，而乳腺非腫瘤性疾病占20％。Claudin

3、-1多克隆抗體在非腫瘤組織和良性乳腺腫瘤組織中的表達明顯高于惡性乳腺腫瘤組織，差異極顯著；Claudin-1蛋白在乳腺癌組織中表達的陽性率為（2/6，33.3％），顯著低于正常乳腺組織100.0％（2/2）；惡性乳腺組織中E-cadherin表達的陽性率為33.3％（2/6），明顯低于正常乳腺組織100％（2/2）。Claudin-1和E-cadherin在惡性腫瘤中均表達下調(diào)。
　　 2.酶聯(lián)免疫吸附法測定乳腺腫瘤患犬血清中T

4、NF-α的變化
　　 TNF-α與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系，目前還沒有相關(guān)的研究。本試驗使用ELISA方法系統(tǒng)檢測了拉布拉多、史賓格、德國牧羊犬這三個品種母犬（均選取3-5歲）在健康狀態(tài)下的TNF-α濃度，以及乳腺腫瘤患犬血清中TNF-α濃度。試驗結(jié)果顯示，三個品種健康母犬血清TNF-α濃度范圍（21.35±4.96 pg/ml），品種之間沒有顯著性差異。犬種對血清中TNF-α含量變化影響不大，（P>0.05）無統(tǒng)計學差異；

5、但乳腺腫瘤患犬血清中TNF-α含量明顯高于健康犬血清中TNF-α含量。
　　 3.PCR法檢測Claudin-1、E-cadherin、TNF-α的基因表達
　　 本試驗建立了PCR法檢測Claudin-1、E-cadherin、TNF-α的基因表達。從分子生物學方面檢測犬正常乳腺與乳腺腫瘤組織中Claudin-1，E-cadherin、的基因表達差異，以及血清中TNF-α的基因表達。結(jié)果與試驗一、二中結(jié)論基本一致，Cl