利用基因芯片對(duì)疏葉駱駝刺幼根耐鹽差異表達(dá)基因的研究.pdf

1、以新疆耐鹽豆科植物疏葉駱駝刺為研究對(duì)象，對(duì)其種子萌發(fā)耐鹽性進(jìn)行了研究；利用Affymetrix公司的截型苜?；蚪M芯片，包括61278個(gè)探針，檢測疏葉駱駝刺幼根在220mmol/LNaCl脅迫處理0h和24h的差異表達(dá)基因，利用GO功能注釋對(duì)所獲得的差異表達(dá)基因進(jìn)行分析，結(jié)合PCR技術(shù)設(shè)計(jì)引物對(duì)探針?biāo)鶎?duì)應(yīng)的功能基因在疏葉駱駝刺中進(jìn)行克??；建立了疏葉駱駝刺的莖段離體快繁體系，為苗期耐鹽性測定奠定基礎(chǔ)。 主要研究結(jié)果如下：

2、1.疏葉駱駝刺種子在300mmol/LNaCl濃度以下發(fā)芽率為100％，700mmol/LNaCl濃度仍能萌發(fā)，發(fā)芽率為40％；在400-700mmol/L鹽脅迫下，其發(fā)芽率隨著鹽濃度的升高呈下降趨勢，根長與鹽濃度呈負(fù)相關(guān)。 2.在61278個(gè)探針中，0h檢測到5133個(gè)，24h檢測到5378個(gè)。差異表達(dá)基因246個(gè)，其中上調(diào)的有147個(gè)，下調(diào)的有119個(gè)。 3.通過GO分析了部分上、下調(diào)差異表達(dá)基因，差異表達(dá)基因主要參

3、與能量代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、物質(zhì)運(yùn)輸、細(xì)胞壁合成。 4.利用PCR技術(shù)克隆出疏葉駱駝刺FDH基因，其編碼區(qū)總長為840bp(36-875)，編碼280個(gè)氨基酸序列。其編碼序列和蛋白質(zhì)序列與豆科植物百脈根(Lotuscorniculatus)相應(yīng)序列的同源性分別為91％和90％。 5.疏葉駱駝刺莖段快繁體系：MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+1.5g/LLH，增殖倍數(shù)為6.8；LH能促進(jìn)苗的生長，增加芽分化能力