昆蟲抗菌肽對(duì)植物病原真菌的抑菌活性及其初步分離的研究.pdf

1、本論文以大蠟螟幼蟲、黃粉蟲幼蟲和中華真地鱉雌成蟲為實(shí)驗(yàn)材料，經(jīng)誘導(dǎo)后提取得到具活性的抗菌肽粗提物，并對(duì)粗提物進(jìn)行了冷凍、加熱的處理；不同處理的提取物對(duì)17種植物病原真菌的進(jìn)行了抑菌活性測(cè)定，測(cè)得了三種昆蟲的抗菌肽的抗菌譜；通過SephadeXG-50 Medium凝膠過濾，摸索了這些抗菌肽的初步分離條件，并檢測(cè)了各個(gè)分離組分的抑菌活性；通過Tricine-甘油SDS-PAGE電泳檢測(cè)了凝膠過濾分離的結(jié)果，測(cè)定了主要活性成分的分子量范圍。

2、結(jié)果如下：
　　 1.經(jīng)蘸大腸桿菌針刺法誘導(dǎo)后，對(duì)大蠟螟采用直接提取血淋巴、對(duì)黃粉蟲和中華真地鱉采用研磨提取法獲得了這三種昆蟲的抗菌肽粗提物。并分為新鮮、冷凍、加熱三種處理。
　　 對(duì)每種昆蟲的抗菌肽提取物進(jìn)行了對(duì)17種植物病原真菌的抑菌活性檢測(cè)：大蠟螟抗菌肽提取物對(duì)10種植物病原真菌具有明顯的抑制作用，其中對(duì)蘋果樹皮腐爛病菌的抑制效果最為顯著，抑菌率達(dá)到了65％以上；黃粉蟲抗菌肽提取物對(duì)7種植物病原真菌具有明顯的抑制作

3、用，其中對(duì)玉米莖基腐的抑制效果最為顯著，抑菌率達(dá)到了55％；中華真地鱉抗菌肽提取物對(duì)11種植物病原真菌具有顯現(xiàn)的抑制作用，其中對(duì)棉花枯萎病菌的抑制效果最為顯著，抑菌率達(dá)到了60％。
　　 三種昆蟲的抗菌肽粗提物，經(jīng)過冷凍、加熱后保留了對(duì)植物病原真菌的抑制活性。冷凍及加熱的處理對(duì)病原菌的抑制效果與新鮮提取物相比沒有差異，表明三種昆蟲的抗菌肽粗提物具有良好的耐低溫特性，且對(duì)熱穩(wěn)定。
　　 2.篩選出50mM乙酸銨為Sepha

4、deXG-50 Medium凝膠過濾適宜的洗脫緩沖液。所得到的兩個(gè)分離組分Ⅰ和Ⅱ抑菌活性的檢測(cè)結(jié)果表明，各組分均有抑菌活性，且組分Ⅱ的抑菌活性高于組分Ⅰ。
　　 3.Tricine-甘油SDS-PAGE電泳結(jié)果表明，三種昆蟲每種處理的抗菌肽粗提物經(jīng)凝膠過濾分離所得的兩個(gè)組分Ⅰ和Ⅱ，其蛋白條帶沒有明顯的交叉，三種昆蟲抗菌肽提取物的凝膠分離比較完全，表明50mM乙酸銨SephadeXG-50凝膠過濾適于這三種昆蟲抗菌肽的初步分離。<