蘋(píng)果花芽形態(tài)分化及花孕育相關(guān)基因的克隆和表達(dá)研究.pdf

1、蘋(píng)果（Malus domestica Borkh.）是世界上重要的果樹(shù)資源之一，僅次于葡萄排第二位。蘋(píng)果的花芽是混合芽，既有營(yíng)養(yǎng)器官又有花的結(jié)構(gòu)，通常著生在一年生短枝的頂端或枝條側(cè)端，是在開(kāi)花結(jié)果的前一年形成的?；ㄑ糠只怯谢ㄖ参锇l(fā)育中最為關(guān)鍵的階段，本試驗(yàn)以當(dāng)前生產(chǎn)上的三個(gè)主栽品種新紅星、嘎啦、富士為材料，研究了蘋(píng)果花芽形態(tài)發(fā)育的動(dòng)態(tài)過(guò)程以及與之相對(duì)應(yīng)的花孕育相關(guān)基因AFL1、AFL2、MdTFL1在蘋(píng)果上的表達(dá)模式，通過(guò)對(duì)RNA提取

2、過(guò)程及RT-PCR體系的優(yōu)化，建立了適于AFL1、AFL2、MdTFL1基因表達(dá)分析的技術(shù)體系，主要研究結(jié)果如下:
　　 1.保定地區(qū)新紅星、嘎啦、富士進(jìn)入花芽形態(tài)分化的時(shí)間分別是7月22日、7月22日和7月2日。分化過(guò)程一直持續(xù)到休眠?；ㄑ糠只叻迤诜謩e出現(xiàn)在8月22日-9月22日、8月22日-9月22日和7月2日-9月12日。
　　 2蘋(píng)果花芽形態(tài)分化的過(guò)程為（1）分生組織由扁平變?yōu)橥蛊穑?）凸起的分生組織依次分化側(cè)

3、花苞片原基，側(cè)花苞片原基內(nèi)部分化側(cè)花原基（3）分生組織中心分化中心花苞片原基和中心花原基（4）中心花分化出萼片原基（5）側(cè)花原基依次分化萼片原基。
　　 3研制出了適合蘋(píng)果單芽RNA提取的方法——改良SDS法。該方法流程短，適合大批量提取，所提RNA經(jīng)RT-PCR檢測(cè)能獲得理想的目的條帶，結(jié)果穩(wěn)定可靠。
　　 4確定了適合蘋(píng)果花芽孕育基因AFL1、AFL2、TFL1的 RT-PCR體系，AFL1、AFL2的最佳退火溫度為