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1、為探討鈣結(jié)合蛋白D28k重組表達(dá)載體對(duì)老齡蛋雞鈣代謝和蛋殼質(zhì)量的調(diào)控效應(yīng)。試驗(yàn)首先制備和鑒定鈣結(jié)合蛋白D28k真核表達(dá)載體(pCEP4-CaBP-D28k),而后選用70周齡新?lián)P州雞產(chǎn)蛋雞36只,隨機(jī)分為4組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)3只,研究不同日糧鈣(3.5%和2.5%)水平條件下,經(jīng)腿肌注射200μg雞鈣結(jié)合蛋白D28k基因質(zhì)粒后對(duì)老齡蛋雞血液中鈣代謝相關(guān)因子、骨骼質(zhì)量、養(yǎng)分表觀代謝率、產(chǎn)蛋性能、蛋殼質(zhì)量和微觀構(gòu)造的影響。試驗(yàn)結(jié)果表
2、明,雙酶切電泳和測(cè)序結(jié)果顯示pCEP4-CaBP-D28k質(zhì)粒制備成功;pCEP4-CaBP-D28k重組表達(dá)載體在蛋雞體內(nèi)獲得了良好表達(dá),0~14 d時(shí)表達(dá)量最高,隨試驗(yàn)期延長(zhǎng)表達(dá)效果逐漸減弱;0~14 d時(shí):同等日糧鈣水平條件下,pCEP4-CaBP-D28k質(zhì)粒可顯著減緩甲狀旁腺素、促進(jìn)降鈣素分泌,并顯著提高老齡蛋雞血清中鈣和堿性磷酸酶含量(P<0.05),但對(duì)雌二醇和血磷含量無(wú)顯著影響;pCEP4-CaBP-D28k質(zhì)??纱龠M(jìn)老
3、齡蛋雞骨鈣代謝,顯著提高脛骨指數(shù)和骨密度(P<0.05),不影響骨鈣素分泌和骨磷沉積;pCEP4-CaBP-D28k質(zhì)粒未對(duì)老齡蛋雞產(chǎn)蛋性能和體重產(chǎn)生顯著影響,但可顯著提高其對(duì)鈣的吸收利用率(P<0.05),促進(jìn)蛋殼鈣沉積,對(duì)蛋殼質(zhì)量和超微構(gòu)造也有明顯改善作用。15~28 d時(shí):注射pCEP4-CaBP-D28k質(zhì)粒對(duì)老齡蛋雞各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯影響。 綜上所述,pCEP4-CaBP-D28k真核表達(dá)載體可促進(jìn)老齡蛋雞對(duì)鈣的吸收代謝
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