蛋雞小肽載體PepT1mRNA表達及其調控機制的研究.pdf

1、分類號：S墨三!：三密級：公玨單位代碼：!QQ墨魚學號：—2009—456蛋雞小肽載體PepTlmRNA表達及其調控機制的研究StduyonexpressionofsmallpeptidescarrierPepTlmRNAandthemechanismofit’Sregulationoflayer學位申請人：梁陳沖指導教師：陳寶江教授學科專業(yè)：動物營養(yǎng)與飼料科學學位類別：農學碩士授予單位：河北農業(yè)大學答辯日期：二。一二年五月二十三日摘要

2、本論文研究了小肽載體在蛋雞腸道不同部位的表達特點，并探討了不同蛋白源供應形式對蛋雞消化道肽載體的影響，以及外源激素和生長因子對蛋雞PepTl基因表達的調控作用。試驗一研究探討了蛋雞肽轉運載體PepTlmRNA表達的RTPCR評定方法及蛋雞腸道不同部位肽載體PepTlmRNA的表達形式、分布特點。根據肽載體ePepTlmRNA和看家基因[3aetinmRNA序列，分別設計cPepTl和flactin引物各一對，通過溫度、循環(huán)數等PCR條件

3、的優(yōu)化，建立包括RNA提取、反轉錄、PCR的蛋雞小腸cPepTl基因檢測方法，應用該方法研究蛋雞cPepTl基因在小腸各段的表達差異。結果顯示，蛋雞空腸部位PepTlmRNA的表達水平顯著高于十二指腸(胙O05)，與回腸比差異不顯著(pO05)，十二指腸PepTlmRNA的表達水平與回腸之間無顯著差異(p005)。試驗二分別應用游離氨基酸、小肽(酪蛋白水解物)、酪蛋白為氮源，配制純合日糧，飼喂蛋雞，應用RTPCR技術檢測腸道轉運載體Pe

4、pTlmRNA表達量的變化，從而確定蛋白源形式對肽載體PepTlmRNA表達的影響大小和規(guī)律。結果表明：以小肽為氮源的試驗組蛋雞小腸不同腸段轉運載體PepTlmRNA表達量較飼喂游離氨基酸和酪蛋白組明顯提高(pO05)，而游離氨基酸組和酪蛋白組間差異不顯著(礦O05)。試驗三研究了外源激素和生長因子對蛋雞PepTlmRNA表達的調控作用。成年蛋雞42只，隨機分為7組，分別接受表皮生長因子(EGF)、甲狀腺素、胰島素、胰高血糖素、腎上腺素

5、受體激動劑、甲硫咪唑刺激，劑量分別為003mg／kg、330ug／kg、O1mg／kg、O1mg／kg、003mg／kg、25mg／kg，對照組注射蒸餾水，每日一次，連續(xù)5d，取小腸檢測腸道肽轉運載體表達量變化。結果表明：EGF對蛋雞小腸PepTlmRNA表達量有降低的趨勢；皮下注射胰島素、胰高血糖素、腎上腺素受體激動劑和口服甲狀腺素后對蛋雞十二指腸PepTlmRNA表達量有上調的作用，其中胰島素的上調作用最為明顯；皮下注射胰島素和口服