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1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文基于牛源HMGN2重組蛋白的體外抑菌試驗研究姓名：項文申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：郭定宗20090601華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2009屆碩士學(xué)位論文ABSTRACTHighmobilitygroupchromosomalproteinisthemostabundantnonhistonefamilyinnucleusofvertebrateandinvertebrateThemembersofthisfam
2、ilyarecommonlyexistedinhighereukaryotesItwasnamedbythehighelectrophoreticmobilityintheSDS—PAGEHMGmainlybindedtothefieldofnuclecomeintheeukaryoteactivivetranscriptionalgeneandbuiltuptheimportantfunctioninmaintainingtheact
3、ivivestructureofchromosome，genetranscriptionandreplicationHMGhavethreesubfamiliesnamedHMGA，HMGBandHMGNHMGN2，amemberofHMGN，whichlocatedonthechromosomelq35，composedof90aminoacidswithmolecularweight92kdHMGN2Wasisolatedandpu
4、rifiedfromanimalssuchascowmiceandrabbitin1980sItsbiologicalfunctionWasfullyidentifiedRecentstudiesshowedthatHGMN2hadantimicrobialactivityinadditiontomaintainthestructureofchromosome，genetranscriptionandreplicationTheanti
5、bacterialmechanismofantimicrobialpeptideswascloselypaidattentiontoandcompletelydifferentfromtraditionalantibioticsInthisstudy，wedesignedprimerstoamplifycattleoriginHMGN2genefromrecombinantplasmidPUC57HMGN2andthenconstruc
6、tedrecombinantexpressionplasmidPET32a()一HMGN2andpGEX—KG—HMGN2TheprokaryoticexpressionofthesetwecombinantplasmidsWasinducedbyIPTGTheresultshowedthattheexpressionofpGEX—KGHMGN2ishigherthanPET32a()HMGN2atthesameconditionThe
7、productofthehighpGEX—KGHMGN2recombinantexpressionplasmidexistedinbothsupematantandinclusionbodyInthestudythewaytoextractand叫匆insolubleinclusionbodyofpGEX—KG—HMGN2fusionproteinWaschoosedSDS—PAGEelectrophoreticandwesternbl
8、otanalysiswereusedtomeasuremeirmolecularweightandimmunologicalactivityofthefusionproteinrespectivelyStaphylOCOCCusaureusATCC25923pigEscherichiacoliE052(O9102)，E126(O一138)，Whl(O74)E107(O161)，Wh3(O一139)，X002(O11)，ETEC；chic
9、kenEscherichiacoli02，078；Salmonellatyphimurium，Streptococcussuistype2werechoosedforbacteriostaticexperimentbybrothapplicationandlamellateagarosediffusionassayTheresultsshowedthatthepurifiedproductofrecombinantexpressionp
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