擬南芥開花時(shí)間基因?qū)EAFY基因表達(dá)調(diào)控的研究.pdf

1、LEAFY(LFY)基因是擬南芥營養(yǎng)生長向生殖生長轉(zhuǎn)變過程中的一個(gè)重要因子，對于成花誘導(dǎo)的啟動(dòng)是必需的，與FLOWER LOCUST(FT)、FLOWERINGLOCUS D(FD)、SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS1(SOC1)基因一起被認(rèn)為是四條開花促進(jìn)途徑的整合因子，在整個(gè)成花調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中處于關(guān)鍵位點(diǎn)，但是具體的調(diào)控機(jī)理目前尚不完全清楚，本研究主要針對FT，F(xiàn)D，SOC1與LFY之間的

2、調(diào)控機(jī)理進(jìn)行研究。通過將35S∷LFY植株雜交到ft10、fd3，soc1-2，fd3soc1-2突變體背景中，發(fā)現(xiàn)35S∷LFY單生花的特異性表型消失而且開花時(shí)間相應(yīng)地推遲。以往的研究顯示FT、FD，SOC1在LFY的上游起作用，因此我們的結(jié)果說明了FT、FD、SOC1很有可能在轉(zhuǎn)錄后水平起作用，影響LFY產(chǎn)物的穩(wěn)定性。通過進(jìn)一步檢測35S∷LFY轉(zhuǎn)基因植株在不同突變體背景下LFY mRNA表達(dá)水平的變化情況，發(fā)現(xiàn)在ft10背景下表達(dá)

3、水平變化不大，而在fd3、soc1-2背景下表達(dá)水平降低很多，說明FD和SOC1對LFYmRNA的穩(wěn)定性確實(shí)存在影響。同時(shí)為了研究FT，F(xiàn)D，SOC1對LFY蛋白的影響，一方面我們成功構(gòu)建了帶HA標(biāo)簽的超表達(dá)LFY轉(zhuǎn)基因植株；另一方面成功在體外表達(dá)LFY蛋白，并提純用于進(jìn)一步的研究。在研究LFY與HA融合的過程中，發(fā)現(xiàn)LFY cDNA不同區(qū)域?qū)FY基因功能的影響不同，3’編碼區(qū)和5’編碼區(qū)對LFY基因的功能是必需的，而中間區(qū)域?qū)FY