洋蔥LEAFY和FT同源基因的克隆與表達初析.pdf

1、洋蔥(Allium.capeLinn)又名球蔥、圓蔥,為百合科蔥屬兩年生草本植物,種子繁殖。洋蔥為綠體春化型植物,低溫和光周期是其抽薹開花的必要條件。FT(FLOWERINGLOCUST)基因是花發(fā)育途徑中的匯集點,是光周期途徑植物開花時間決定關鍵基因;LEAFY,基因不僅控制著花序分生組織向花分生組織的轉變而且是影響植物的開花時間以及花序形態(tài)的重要基因。目前尚未見到洋蔥刀及LEAFY同源基因的相關報道。
　　 本研究以洋蔥10

2、07品系為材料,篩選出適合提取洋蔥葉片RNA的方法;依據(jù)FT及LEAFY同源基因保守區(qū)設計兼并引物,分別以1007品系營養(yǎng)生長時期的葉片及抽薹初期莖頂端分生組織的RNA為模板,采用RT-PCR的方法克隆了Fir、LEAFY同源基因的CDS序列,并對它們的時空表達模式進行了初步分析,為研究蔥蒜類作物抽薹開花的分子調控機制打下基礎。
　　 試驗結果如下:
　　 1.采用TIANDZ柱式植物RNAout能夠快速高效的提取洋蔥葉

3、片的RNA,可有效去除其中的多糖,并且RNA純度較高,小RNA回收效率更高,完全適合于洋蔥進一步的分子生物學研究。
　　 2.采用RT-PCR技術,首次克隆得到了洋蔥刀同源基因的CDS序列,長度185bp,編碼62個氨基酸序列。
　　 3.采用RT-PCR技術,首次克隆得到了洋蔥LEAFY同源基因的CDS序列,長度324bp,編碼108個氨基酸序列。
　　 4.FT同源基因在其營養(yǎng)生長時期的葉片中無表達,隨著營養(yǎng)