小麥TaTAC1基因同源克隆及表達(dá)分析.pdf

1、分蘗角度影響植物群體結(jié)構(gòu)、光合效率以及植株的形態(tài)建成，最終影響其產(chǎn)量及品質(zhì)，小麥中有關(guān)分蘗角度的研究罕見報(bào)道。為解析小麥TAC1的表達(dá)模式，初步了解該基因的分子遺傳機(jī)制及其與分蘗角度的遺傳關(guān)系。本研究以CN16、SM969、Lan2399以及SHW-1為材料，根據(jù)前人克隆出的TAC1基因的cDNA序列，設(shè)計(jì)出適宜普通小麥中的特異引物，并在上述四個(gè)材料中同源克隆出TaTAC1基因的cDNA序列。通過生物信息學(xué)分析以及熒光定量表達(dá)模式分析，

2、揭示普通小麥中TaTAC1的生物學(xué)功能和表達(dá)特性，研究結(jié)果如下:
　　1.在供試小麥中擴(kuò)得兩類TaTAC1的cDNA序列。第一類cDNA長度為1118bp，其中包括780bpORF和338bp的3'-UTR。ORF編碼260個(gè)氨基酸。第二類cDNA長度為1143bp，其中包括780bp ORF和363bp的3'-UTR，ORF也編碼260個(gè)氨基酸。其中CN16-2、SM969-2的第10號(hào)堿基發(fā)生突變，引起終止子提前，導(dǎo)致TaTA

3、C1表達(dá)受阻;Lan2399-2和SHW-1-2在109-115堿基位置有“CGCGCG”片段插入導(dǎo)致蛋白質(zhì)β-折疊片減少。
　　2.小麥TaTAC1基因氨基酸序列與水稻OsTAC1、玉米ZmTAC1、高粱SbTAC1的氨基酸序列相似度分別為:75.95％、62.02％、65.04％，且氨基酸序列有5個(gè)區(qū)域高度保守，區(qū)域Ⅰ內(nèi)存在“IGT”結(jié)構(gòu)，其中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ區(qū)域的保守性與IGT基因家族相同。
　　3.TaTAC1基因分子

4、量為29033.2，等電點(diǎn)為5.42，其二級(jí)結(jié)構(gòu)中存在多核苷酸和蛋白質(zhì)的特異結(jié)合位點(diǎn)、α-螺旋、延伸鏈、無規(guī)則卷曲以及一個(gè)明顯的跨膜結(jié)構(gòu)域。
　　4.實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析表明，TaTAC1在分蘗期的葉鞘、莖高效表達(dá)，分蘗節(jié)其次，葉與根表達(dá)量最低;SPSS20.0分析該基因在分蘗節(jié)各時(shí)期表達(dá)量與分蘗角度顯著正相關(guān)，Pearson相關(guān)性系數(shù)為0.677;其他組織表達(dá)量與分蘗角度無顯著相關(guān)性。
　　5、TaTAC1亞細(xì)胞定位于細(xì)