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1、植物FLOWERING LOCUS T(FT)同源基因在成花過(guò)程中起著關(guān)鍵作用,最近FT蛋白已經(jīng)被證明是開(kāi)花素。本實(shí)驗(yàn)分離克隆了兩個(gè)荔枝FT同源基因全長(zhǎng)序列,分析其生物信息學(xué)特性,初步探討其表達(dá)模式,并對(duì)其功能進(jìn)行初步鑒定,為進(jìn)一步闡明荔枝成花的分子機(jī)理提供依據(jù)。主要結(jié)果如下:
1、荔枝FT同源基因克隆及生物信息學(xué)分析。利用RT-PCR方法首次獲得了荔枝兩個(gè)FT同源基因cDNA全長(zhǎng),分別命名為L(zhǎng)cFT1和LcFT2(基因登
2、錄號(hào):JN214350、JN214351)。兩個(gè)基因開(kāi)放閱讀框(ORF)都為522bp,各編碼174個(gè)氨基酸,其中LcFT1蛋白分子質(zhì)量為19.65KD,等電點(diǎn)為8.68,LeFT2蛋白分子質(zhì)量為19.56KD,等電點(diǎn)為7.34。蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)分析顯示,LcFT1與LcFT2蛋白都具有4個(gè)α螺旋和10個(gè)β折疊區(qū),和其它植物FT蛋白具有相似的結(jié)構(gòu)。同源分析表明,LcFT1和LcFT2核苷酸同源性在不同植物間的一致性為72%-82%。
3、> 2、荔枝FT同源基因的表達(dá)模式分析。利用RT-PCR方法首次得到了荔枝兩個(gè)Actin同源基因cDNA全長(zhǎng),分別命名為L(zhǎng)cActin4和LcActin7(基因登錄號(hào):HQ588865、HQ588866)。采用半定量RT-PCR分析表明,在‘三月紅’荔枝花芽分化期LcFT1和LcFT2基因只在葉中表達(dá),并且在成熟葉中表達(dá)量最多。
3、荔枝FT同源基因的功能鑒定。構(gòu)建植物表達(dá)載體35S::LcFT1和35S::LcFT
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