2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩72頁(yè)未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、在熱帶亞熱帶地區(qū),龍眼(Dimocarpus longanL.)是一個(gè)重要的木本果樹。本研究在RNA-Seq的基礎(chǔ)上,首先通過(guò)序列分析和比對(duì),找到龍眼中107個(gè)與調(diào)控開花時(shí)間相關(guān)的基因,發(fā)現(xiàn)DlELF4-1和DlELF4-2可能與‘四季蜜’龍眼特殊成花性狀相關(guān);進(jìn)一步克隆獲得DlELF4-1和DlELF4-2全長(zhǎng)cDNA,通過(guò)生物信息學(xué)和熒光定量PCR分析對(duì)其功能進(jìn)行初步分析;同時(shí)克隆了‘四季蜜’和‘紅核子’龍眼DlELF4-1基因的啟

2、動(dòng)子序列,并對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析;還構(gòu)建了DlELF4-1和DlELF4-2植物表達(dá)載體,為進(jìn)一步研究DlELF4-1和DlELF4-2功能做準(zhǔn)備。研究結(jié)果有助于了解龍眼開花調(diào)控的分子機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
  1.在以‘四季蜜’龍眼和‘立冬本’龍眼的嫁接新梢為材料的RNA-seq數(shù)據(jù)庫(kù)中,找到了107個(gè)開花時(shí)間同源基因。這些基因進(jìn)一步的被歸類為生物鐘和光周期途徑,春化途徑,自主途徑,GA途徑,年齡相關(guān)基因和成花途徑整合基因等

3、6類。采用log2(S_RPKM/L_RPKM)方法比較了這107個(gè)基因在‘四季蜜’和‘立冬本’兩個(gè)樣品中的表達(dá)差異,發(fā)現(xiàn) ELF4(Unigene4309和Unigene5963)在兩樣本中表達(dá)差異較大,其中ELF4(Unigene4309)在‘四季蜜’中表達(dá)量顯著的上調(diào)。熒光定量 PCR進(jìn)一步驗(yàn)證了ELF4(Unigene4309)在‘四季蜜’中表達(dá)量的變化,表明在調(diào)控‘四季蜜’龍眼特殊成花性狀上,ELF4(Unigene4309)

4、可能起著重要的作用。
  2.在 RNA-seq數(shù)據(jù)庫(kù)中,找到了兩個(gè) ELF4基因的拼接序( Unigene4309和Unigene5963),其中Unigene4309包含完整的編碼區(qū),命名為DlELF4-1;Unigene5963包含ELF4基因的部分編碼區(qū),命名為DlELF4-2。本試驗(yàn)中以‘紅核子’龍眼葉芽為材料,克隆了兩個(gè)龍眼ELF4同源基因cDNA序列。DlELF4-1cDNA全長(zhǎng)為544 bp,編碼140個(gè)氨基酸,等

5、電點(diǎn)為5.05,為酸性不穩(wěn)定蛋白;DlELF4-2 cDNA全長(zhǎng)為733 bp,編碼144個(gè)氨基酸,等電點(diǎn)為5.17,為酸性不穩(wěn)定蛋白。序列分析結(jié)果表明DlELF4-1和DlELF4-2蛋白具有ELF4蛋白的保守作用域DUF1313。聚類分析結(jié)果表明DlELF4-1和AtELF4聚在一起,DlELF4-2和AtELF4-LIKE1聚在一起。
  3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究?jī)蓚€(gè)DlELF4基因在‘紅核子’龍眼花芽分化過(guò)程的表達(dá)。結(jié)果

6、表明,DlELF4-1基因在11月份表達(dá)量急劇下降,表明DlELF4-1功能與抑制花芽分化有關(guān);DlELF4-2基因在1月份開始下調(diào)表達(dá),表明它可能抑制花芽形態(tài)的分化。DlELF4-1和DlELF4-2基因在調(diào)控龍眼開花時(shí)間上功能可能有所不同。
  4.為了探究引起DlELF4-1表達(dá)差異的原因及進(jìn)一步了解DlELF4-1的功能,本試驗(yàn)中以‘四季蜜’龍眼和‘紅核子’龍眼的葉片為材料,克隆DlELF4-1的啟動(dòng)子序列,最終獲得‘四季

7、蜜’龍眼DlELF4-1起始密碼ATG上游序列1330bp,獲得‘紅核子’龍眼DlELF4-1起始密碼ATG上游序列419bp。序列比對(duì)后發(fā)現(xiàn)在‘四季蜜’和‘紅核子’龍眼中DlELF4-1基因起始密碼ATG上游-1bp—-249bp之間序列一樣,而‘四季蜜’中的-250bp—-1330bp和‘紅核子’中的-250bp—-419bp序列存在差異。啟動(dòng)子序列分析結(jié)果表明DlELF4-1 的表達(dá)受光、激素及逆境脅迫調(diào)控。與‘紅核子’

8、相比,在‘四季蜜’中有多個(gè)光響應(yīng)元件、激素響應(yīng)元件、逆境脅迫響應(yīng)元件及其他調(diào)控元件,這些差異是否是引起DlELF4-1在‘四季蜜’和‘立冬本’嫁接新梢中差異表達(dá)的原因,需要進(jìn)一步克隆‘紅核子’DlELF4-1基因的啟動(dòng)子序列并進(jìn)行分析。
  5.為了進(jìn)一步研究DlELF4-1基因和DlELF4-2基因的功能,在本試驗(yàn)中,將DlELF4-1連接到 pBI121質(zhì)粒上,獲得重組質(zhì)粒 pBI121-DlELF4-1;將 DlELF4-2

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論