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文檔簡介
1、本研究選用了皮埃蒙特牛、南陽牛、皮埃蒙特和南陽牛雜種(皮南牛)和荷斯坦牛作為實驗動物。摸索了毛囊基因組DNA提取方法、篩選了MSTN基因的SNP并應(yīng)用選擇性PCR擴增方法檢測分析了1008頭皮南牛群體中MSTN基因的分子遺傳多態(tài)性及其與體重(初生重、6月齡重、12月齡重、18月齡重、24月齡重、36月齡重),12月齡體尺(體高、體斜長、坐骨寬、胸圍、管圍)性狀之間的相關(guān)性,旨在探索將該基因作為遺傳標記應(yīng)用于肉牛育種的可行性并為遺傳標記輔
2、助選擇提供理論依據(jù)。取得的結(jié)果如下:
1.確立了Proteinase-K裂解法是一種提取毛囊基因組DNA的最佳方法,它具有高效、普遍、省時、安全等優(yōu)點。
2.建立了快速、準確和有效的分析牛MSTN基因多態(tài)性的選擇性PCR方法。
3.皮埃蒙特牛、皮南牛、南陽牛、荷斯坦牛MSTN基因的三個外顯子上SNP的存在情況不一致,其中,南陽牛在第一外顯子的295位上存在A→G的突變、南陽牛和荷斯坦牛第二外顯子
3、的414位上存在C→T的突變、皮埃蒙特牛和皮南牛第三外顯子的938位上存在G→A突變,該突變是錯義突變,其導致第三外顯子上313位氨基酸殘基由半胱氨酸(Cys)→酪氨酸(Tyr)。
4.在皮埃蒙特牛MSTN基因第三外顯子上發(fā)現(xiàn)了AA、AB和BB三種基因型,其基因型頻率分別為0.3、0.6和0.1,等位基因A和B的頻率為0.6和0.4??ǚ綑z驗結(jié)果表明這個位點處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05)。
4、 5.在皮南牛MSTN基因第三外顯子上也發(fā)現(xiàn)了AA、AB和BB三種基因型,其基因型頻率為0.069、0.726和0.205,等位基因A和B的頻率為0.432和0.568??ǚ綑z驗結(jié)果表明這個位點處于Hardy-Weinberg不平衡狀態(tài)(P<0.01)。
6.皮南牛MSTN基因第三外顯子多態(tài)性與體尺性狀關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明:除管圍外,該基因與體尺性狀關(guān)聯(lián)達到了極顯著水平(P<0.01),AA基因型個體的體高、體斜長、胸圍
5、、坐骨寬顯著高于AB和BB基因型個體(P<0.05),而AB和BB基因型個體在這四個體尺性狀上則未達到顯著水平(P>0.05),三個基因型在管圍性狀上差異不顯著。公母牛體尺性狀分別分析發(fā)現(xiàn),不論公牛還是母牛分析結(jié)果與未分之前一致,AB和BB基因型在體尺性狀上差異不顯著(P>0.05)。
7.皮南牛MSTN基因第三外顯子多態(tài)性與各月齡體重關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明:該基因與體重性狀關(guān)聯(lián)達到了極顯著水平(P<0.01),AA基因型個體體
6、重顯著高于AB和BB基因型個體(P<0.05),AB基因型個體在6、12、18、24和36月齡重性狀上顯著高于BB基因型個體(P<0.05),在初生重上未達到顯著水平(P=0.6815)。將公母牛體重性狀分別分析發(fā)現(xiàn),該基因與體重性狀關(guān)聯(lián)除公牛初生重為顯著外,其余達到了極顯著水平(P<0.01),AA基因型個體在體重性狀上顯著高于AB和BB基因型個體(P<0.05),并且公牛的體重高于母牛。母牛AB和BB基因型個體在6、12、18、24
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