馬鈴薯晚疫病菌抗阿米西達突變體的誘導及其DNA指紋分析.pdf

1、由于馬鈴薯晚疫病菌對常用殺菌劑抗藥性的產(chǎn)生，明顯降低了化學防治晚疫病的效果。本研究從馬鈴薯晚疫病菌對殺菌新藥--阿米西達的敏感性測定、抗阿米西達菌株的誘導以及抗阿米西達分子標記篩選等方面進行研究，旨在初步評價馬鈴薯晚疫病菌對阿米西達的抗性風險，并得到能夠用于鑒定阿米西達抗、感菌株的分子標記。為阿米西達的科學使用和馬鈴薯晚疫病菌對阿米西達產(chǎn)生抗藥性后治理策略的制定提供理論依據(jù)。 1．測定了采自不同地區(qū)、不同年份的30株馬鈴薯晚疫病

2、菌菌株對阿米西達的敏感性。結果表明：不同地區(qū)、不同年份的馬鈴薯晚疫病菌菌株對阿米西達均表現(xiàn)敏感，其抑制馬鈴薯晚疫病菌菌絲生長的EC<,50>值介于0.0351～0.1492μg/mL。此外，馬鈴薯晚疫病菌對阿米西達和甲霜靈之間沒有正負交互抗藥性。 2．建立了馬鈴薯晚疫病菌對阿米西達的敏感基線，其EC<,50>值為0.0604±0.0226μg/mL。 3．選取5株對阿米西達敏感的馬鈴薯晚疫病菌菌株進行阿米西達馴化抗性誘導

3、和人工誘變(阿米西達+紫外線)，獲得了1株對阿米西達具有穩(wěn)定的低水平抗性菌株X-DC98-3，抗性水平是野生菌株的20倍。獲得的其它對阿米西達具有低水平抗性的菌株，經(jīng)過抗性穩(wěn)定性驗證發(fā)現(xiàn)，抗性程度均有不同程度的下降，抗性不穩(wěn)定。 4．利用AFLP分子標記對阿米西達誘導后的抗性菌株和誘導前的野生敏感菌株進行研究，從144對AFLP引物組合中篩選出8對引物組合能在誘導后的抗性菌株和誘導前的野生菌株之間擴增出差異性條帶。其中：引物組合

4、E4/M5、E4/M8、E7/M5、E15/M6、E16/M9均能在菌株X-DC98-3與DC98-3之間擴增出1～2條穩(wěn)定的特異條帶；引物組合E19/M4除能在菌株X-DC98-3中擴增出一條穩(wěn)定250bp左右的特異條帶外，在菌株X-DC98-3、X-DK98-1和DK98-1中均能擴增出170bp左右的特異條帶；引物組合E15/M19在菌株X-DC98-3和UV-HD01-4中均能擴增出穩(wěn)定280bp左右的特異條帶；引物組合E20/