中華青鳉胚胎發(fā)育及胚胎低溫保存的初步研究.pdf

1、本研究對(duì)中華青鳉(Oryzias latiipes sinensis)在28℃受精卵發(fā)育做了連續(xù)跟蹤觀察,并確定了發(fā)育時(shí)期和每一發(fā)育時(shí)期經(jīng)歷時(shí)間,描述了每個(gè)時(shí)期的發(fā)育狀況。然后對(duì)中華青鳉胚胎的三個(gè)時(shí)期發(fā)眼期,十六肌節(jié)期,脊索空泡化完成期做了兩種溶液,四種保存方式的低溫(0-4℃)15天保存,記錄了胚胎存活率。后續(xù)又將青鳉胚胎在28℃下恒溫孵化,記錄孵化率。最后將孵出的正常仔魚數(shù)與樣本中胚胎總數(shù)做對(duì)比,得出了經(jīng)過低溫保存15天后28℃孵化

2、的正常仔魚率研究?jī)?nèi)容主要包括:
　　1中華青鳉胚胎發(fā)育(28℃)過程
　　本試驗(yàn)對(duì)中華青鳉受精卵的發(fā)育做了連續(xù)觀察,并對(duì)發(fā)育時(shí)期做了細(xì)分和描述。結(jié)果表明:中華青鳉受精卵經(jīng)過了六大時(shí)期(卵裂時(shí)期、囊胚形成時(shí)期、原腸胚形成時(shí)期、神經(jīng)胚形成時(shí)期、器官形成時(shí)期、孵化期),32個(gè)具體發(fā)育時(shí)期才會(huì)孵出仔魚。
　　2四種方式低溫(4℃)保存青鳉胚胎試驗(yàn)
　　本實(shí)驗(yàn)對(duì)三個(gè)不同發(fā)育時(shí)期(發(fā)眼期,十六肌節(jié)期,脊索空泡化完成期)的中華

3、青鳉胚胎做了低溫15天保存,結(jié)果表明:在只使用聚維酮碘保護(hù)液時(shí),三個(gè)時(shí)期的平均胚胎存活率為75.0％,71.1%,62.5%,保存結(jié)果較好的是發(fā)眼期在0.5mg/l達(dá)到84.4%,十六期在0.5mg/l和1.0mg/l達(dá)到82.2%。使用添加泥炭土的聚維酮碘保護(hù)液時(shí),三個(gè)時(shí)期的平均胚胎存活率為86.0%,84.3%,74.5%,保存結(jié)果較好的是發(fā)眼期和十六期在0.5mg/l水平上達(dá)到88.9%,86.7%。只使用孔雀石綠保護(hù)液時(shí),三個(gè)時(shí)

4、期的平均胚胎存活率為74.5%,68.3%,72.7%,發(fā)眼期保存結(jié)果較好,十六期在1.0mg/l水平上達(dá)到86.7%。使用添加泥炭土的孔雀石綠保護(hù)液時(shí),三個(gè)時(shí)期的平均胚胎存活率為84.3%,79.0%,80.5%。
　　3低溫保存恒溫(28℃)孵化胚胎試驗(yàn)
　　本試驗(yàn)為低溫保存后的后續(xù)試驗(yàn),將存活的青鳉胚胎從低溫保存中的樣品袋中取出,放入裝有純凈水的培養(yǎng)皿中28℃水浴鍋中恒溫培養(yǎng),直至孵化出膜,記錄孵化結(jié)果。結(jié)果表明:低溫

5、保存時(shí)只使用聚維酮碘保護(hù)液的三個(gè)時(shí)期胚胎平均孵化率為73.7%,73.0%,79.1%,孵化結(jié)果較好的是發(fā)眼期在0.5mg/l水平達(dá)到84.4%,十六肌節(jié)期在0.5mg/l和1.0mg/l水平達(dá)到75.7%,78.4%。低溫保存時(shí)添加泥炭土的聚維酮碘保護(hù)液的三個(gè)時(shí)期胚胎平均孵化率為79.5%,74.0%,79.1%,發(fā)眼期在0.5mg/l水平上能達(dá)到92.5%孵化率。低溫保存時(shí)只使用孔雀石綠保護(hù)液的三個(gè)時(shí)期胚胎平均孵化率為73.3%,7

6、3.8%,66.2%,十六肌節(jié)期在2.0mg/l水平上達(dá)到87.9%的孵化率。低溫保存時(shí)添加泥炭土的孔雀石綠保護(hù)液的三個(gè)時(shí)期胚胎平均孵化率為74.5%,78.1%,69.3%,發(fā)眼期在1.0mg/l,2.0mg/l水平的孵化率為87.5%,82.5%。十六期的三個(gè)處理組孵化率能82.1%,94.3%,84.4%。脊索期在1.0mg/l,2.0mg/l水平的孵化率分別為71.8%,78.4%。
　　4孵化青鳉胚胎正常仔魚試驗(yàn)

7、　　本試驗(yàn)為青鳉胚胎在28℃恒溫孵化后體式顯微鏡下觀察胚胎的體型及內(nèi)臟發(fā)育狀況,記錄發(fā)育正常的仔魚結(jié)果。結(jié)果表明:低溫保存時(shí)只使用聚維酮碘保護(hù)液的三個(gè)時(shí)期胚胎正常仔魚率為54.0%,48.2%,48.3%,發(fā)眼期在0.5mg/l水平上的仔魚正常率為71.11%,十六期在0.5mg/l,1.0mg/l水平上的仔魚正常率分別為62.2%,60.0%。脊索期中0.5mg/l,1.0mg/l水平上的仔魚正常率分別為62.2%,57.8%。低溫保

8、存時(shí)添加泥炭土的聚維酮碘保護(hù)液的三個(gè)時(shí)期胚胎正常仔魚率為67.1%,59.8%,56.8%。發(fā)眼期在0.5mg/l,1.0mg/l水平上仔魚正常率分別為82.2%,77.8%。十六期在0.5mg/l,1.0mg/l水平上仔魚正常率為77.8%,68.9%。脊索期在0.5mg/l,1.0mg/l水平上仔魚正常率都為64.4%。低溫保存時(shí)只使用孔雀石綠保護(hù)液的三個(gè)時(shí)期胚胎正常仔魚率為51.6%,45.5%,45.0%。發(fā)眼期在1.0mg/l

9、上仔魚正常率為71.1%。十六期在1.0mg/l水平上仔魚正常率為60.0%。低溫保存時(shí)添加泥炭土的孔雀石綠保護(hù)液的三個(gè)時(shí)期胚胎正常仔魚率為61.2%,57.7%,52.7%,三個(gè)時(shí)期的仔魚正常率無顯著差異。發(fā)眼期在1.0mg/l,2.0mg/l水平上仔魚正常率分別為77.8%,71.1%。十六期在1.0mg/l,2.0mg/l水平上仔魚正常率分別為71.1%,68.9%。脊索期的三個(gè)處理組仔魚正常率分別為53.3%,62.2%。60.