紫薯花色苷的提取及抗氧化性研究【畢業(yè)論文】

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文</b></p><p><b>　?。?0 屆）</b></p><p>　　紫薯花色苷的提取及抗氧化性研究 </p><p><b>　　專業(yè)：應(yīng)用化學(xué)</b></p><p>　　摘要:本文主要研究了紫薯花色苷的提取及抗氧化性，

2、著重對(duì)紫甘薯花色苷的抗氧化性的研究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)超聲輔助有機(jī)溶劑浸提紫薯中的生物活性成分，通過(guò)柱層析分離，對(duì)提取物進(jìn)行分離，獲得紫薯花色苷，并對(duì)初制得到的紫薯花色苷進(jìn)行紅外譜圖分析，初步鑒定其成分。在此基礎(chǔ)上，通過(guò)DPPH自由基清除體系、鄰苯三酚自氧化體系以及亞硝胺阻斷體系考查紫薯花色苷對(duì) DPPH自由基、超氧自由基以及亞硝酸鹽的清除能力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明超聲輔助熱浸提適用于紫薯花色苷的提取，而且提取所得的紫薯花色管具有良好的抗氧化活性。&l

3、t;/p><p>　　關(guān)鍵詞：紫薯花色苷；抗氧化性；DPPH自由基、超氧自由基；亞硝胺阻斷</p><p>　　Extraction of anthocyanins from purple sweet potato and research of its antioxdant activitity</p><p>　　Abstract: This paper main

4、ly studies the extraction of anthocyanins from purple sweet potato and its antioxdant activity, focusing on the purple sweet potato anthocyanins Oxidation resistance research. This experimental ultrasound assisted organi

5、c solvent leaching mention the purple potato chips, bioactive components by column chromatography separation, to extract separation, get purple potato chips, and the early anthocyanins of purple potato chips made get inf

6、rared spectra anthocyanins, and ide</p><p>　　Key words:Purple sweet potato anthocyanins; antioxidant activity; DPPH free radicals, O2-;Disconnecting Nitrosodimethylamin</p><p><b>　　目 錄<

7、;/b></p><p>　　1引言………………………………………………………………………………1</p><p>　　2實(shí)驗(yàn)方法…………………………………………………………………………………2</p><p>　　2.1實(shí)驗(yàn)材料及主要器材……………………………………………………………………2</p><p>　　2.2實(shí)驗(yàn)方法…………

8、…………………………………………………………………3</p><p>　　2.1.1 PH示差法測(cè)定樣品中花色苷含量………………………………………………3</p><p>　　2.1.2紫薯花色苷提取物的初步純化方法……………………………………3</p><p>　　2.2.3紫甘薯花色苷紅外譜圖分析 ……………………………………………………4</p>

9、<p>　　2.2.4 DPPH體系清除自由基實(shí)驗(yàn)………………………………………………………4</p><p>　　2.2.5鄰苯三酚清除超氧自由基實(shí)驗(yàn) …………………………………………………4</p><p>　　2.2.6亞硝銨的阻斷能力的實(shí)驗(yàn) ………………………………………………………5</p><p>　　3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果……………………………………

10、………………………………………………5</p><p>　　3.1 PH示差法測(cè)定樣品中花色苷含量的方法結(jié)果 ………………………………………5</p><p>　　3.2紫薯花色苷提取物的紅外譜圖 …………………………………………………………5</p><p>　　3.3 DPPH體系自由基的清除率 ……………………………………………………………6</p&

11、gt;<p>　　3.4鄰苯三酚超氧自由基清除率 ……………………………………………………………7</p><p>　　3.5亞硝銨的阻斷率 …………………………………………………………………………7</p><p>　　4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 ……………………………………………………………………………8</p><p>　　4.1 DPPH體系清除自由基

12、實(shí)驗(yàn) ……………………………………………………8</p><p>　　4.2鄰苯三酚清除超氧自由基實(shí)驗(yàn)方法 ……………………………………………………8</p><p>　　4.3亞硝銨的阻斷能力的實(shí)驗(yàn) ………………………………………………………………8</p><p>　　5展望………………………………………………………………………………9</p>&

13、lt;p>　　參考文獻(xiàn)……………………………………………………………………………………9</p><p>　　致謝…………………………………………………………………………………11</p><p><b>　　1 引言</b></p><p>　　紫薯（英文名：Purple sweet potato，日本名：紫のサツマイモ ），指紫色薯肉

14、的甘薯。紫薯屬旋花科一年生草本植物，是近年來(lái)經(jīng)過(guò)改良得到優(yōu)良的紅薯品種。繼承了甘薯適應(yīng)性廣的特性，具有營(yíng)養(yǎng)豐富、色澤鮮艷特征，并且顯示出它獨(dú)特的一些生理活性以及一定的保健功能，深受廣大消費(fèi)者歡迎 [1]。富含花青素等一類對(duì)人體具有很高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的保健物質(zhì)在近年被認(rèn)定為特用品種。紫薯紫皮、紫肉皆可拿來(lái)食用，味道略甜。紫薯具有很高的食用和藥用價(jià)值，是一種純天然的保健食品。</p><p>　　花色苷是花色素與糖以糖苷鍵

15、結(jié)合而成的一類化合物，廣泛存在于植物的花、果實(shí)、莖、葉和根器官的細(xì)胞液當(dāng)中，使其呈現(xiàn)由紅、紫紅到蘭等各種顏色?；ㄉ帐穷慄S酮——以黃酮核為基礎(chǔ)的一類物質(zhì)中能呈現(xiàn)紅色的一族化合物[2]。它由于食品加工業(yè)中常用的人工合成的紅色染料的都含有毒性和致癌的可能性而受到越來(lái)越多的關(guān)注（例如蘇丹紅）?；ㄉ沼泻芏嗌锘钚裕绺呖寡趸?、低毒性，很多種保健功能，而且安全是一種極具開(kāi)發(fā)潛力的天然色素。</p><p>　　隨著科

16、學(xué)的進(jìn)步與人們生活水平的提高，人工合成色素的安全性也日益受到質(zhì)疑，天然食用色素以其安全無(wú)毒作用的特性受到人們的普遍關(guān)注。紫薯花色苷富含酰基化的花色苷，它作為一種食品添加劑，具有一定的營(yíng)養(yǎng)與保健功能，具有抗氧化、清除自由基、抗突變活性、減輕肝功能障礙和預(yù)防心血管疾病等作用，可以廣泛應(yīng)用于飲料、果汁、糖果、果醬、保健品飲料或片劑等食品及醫(yī)藥和化妝品領(lǐng)域。近年來(lái)，花色苷的抗氧化功能受到廣泛研究。目前認(rèn)為花色苷可以通過(guò)H供體、螯合二價(jià)金屬離子和

17、與DNA等結(jié)合而起作用，但主要的機(jī)理還是花色苷作為H供體起作用?？寡趸芰Φ膹?qiáng)弱還與花色苷的結(jié)構(gòu)和濃度有關(guān)。目前，檢驗(yàn)花色苷體外抗氧化和清除自由基的體系較多。最常用的有用于檢測(cè)花色苷等酚類物質(zhì)還原力、對(duì)過(guò)渡金屬離子螯合力等間接判斷花色苷的抗氧化能力，是否具有抑制脂質(zhì)過(guò)氧化作用的亞油酸體系和各種脂質(zhì)體等。本文通過(guò)添加一些常用食品添加劑來(lái)研究紫薯花色苷的加工穩(wěn)定性，并通過(guò)研究紫薯花色苷清除DPPH自由基、超氧陰離子及羥自由基的能力，證實(shí)紫薯

18、花色苷的體外抗氧化性質(zhì)，為紫薯花色苷的天然抗氧化劑和保健食品的研發(fā)提供理論依據(jù)[3]。</p><p>　　食用色素是以食品著色為目的，用來(lái)完善食品的色澤，又被叫做“食用染色料”或“著色劑”。人們經(jīng)常在食品中添加了各種色素，目的就是為了增加食品的外觀，色澤，勾起人們的食欲，進(jìn)而刺激人體消化液分泌，方便人們更好的吸收消化。因?yàn)槭秤蒙囟际强梢匀芙庠谑澄锂?dāng)中。按其溶解性質(zhì)的不同，可分為水溶性色素和脂溶性色素；按照來(lái)源

19、的不用，又可分為天然食用色素和人工合成色素。</p><p>　　天然食用色素就是來(lái)源于廣泛的天然植物的根部、莖部、葉、花、果實(shí)和動(dòng)物、微生物等的可以供人們食用的色素。食物色素在食品中的比例很小，一般都是幾千分之一甚至十萬(wàn)分之一[4]。</p><p>　　天然食用色素一般來(lái)源于天然植物，比如甜菜紅、葡萄和辣椒，這些食品已經(jīng)得到了廣大消費(fèi)者的認(rèn)可與接受，所以從這些植物當(dāng)中提取天然食用色素更

20、能得到消費(fèi)者的青睞，方便讓消費(fèi)者接受，敢放心大膽的食用。</p><p>　　天然食用色素按其功效成分可幾大類：類胡蘿卜素類色素、黃酮類色素、花青苷類色素、葉綠素類色素、其他類色素如甜菜紅、姜黃、紅曲等。</p><p>　　天然食用色素作為食品添加劑已經(jīng)有了一段悠久的歷史，但是，長(zhǎng)久以來(lái)由于人工合成色素的提取成本低，且性質(zhì)穩(wěn)定、著色能力強(qiáng)，所以人工合成色素在過(guò)去的時(shí)間得到了廣泛的食用，這

21、也使得天然食用色素的發(fā)展相對(duì)比較緩慢。近年來(lái)，隨著醫(yī)學(xué)毒理學(xué)和生物學(xué)不斷的深入研究和人們對(duì)綠色食物和綠色保健的觀念的不斷加強(qiáng)，使得人工合成色素因?yàn)槠鋵?duì)人體有害性，逐漸被天然食用色素所取代。</p><p>　　天然食用色素按它們色調(diào)的不同，可分為紅紫色系列、黃橙色系列和藍(lán)綠色系列。紅紫色系列因其應(yīng)用廣泛，而且種類繁多而倍受關(guān)注。主要包括：紅曲色素、辣椒紅素、醌類、焦糖色素、花青素類等。</p>&l

22、t;p>　　花青素是人們最為熟知的水性色素之一，因它安全性高，很多國(guó)家都允許它添加到食品當(dāng)中作為著色劑。目前國(guó)內(nèi)外都開(kāi)發(fā)出了很多以天然植物作為原料從中提取花青素類色素，如葡萄皮紅色素、蘿卜紅色素等。但是因?yàn)樵系臄?shù)量和穩(wěn)定性還有雜質(zhì)的影星，天然食用色素的進(jìn)一度推廣受到了很大的限制。所以人們應(yīng)該大力開(kāi)發(fā)新的保健植物來(lái)作為提取色素的來(lái)源，并降低成本，提高色素的穩(wěn)定性和色素的純度。</p><p>　　紫薯色彩鮮

23、艷，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，富含天然花青素，是現(xiàn)代飲食的新寵。本實(shí)驗(yàn)希望通過(guò)有機(jī)溶劑浸提紫薯中的生物活性成分，通過(guò)柱層析分離，對(duì)提取物進(jìn)行分離，獲得紫薯花色苷，并對(duì)初制得到的紫薯花色苷進(jìn)行紅外譜圖分析，確定其成分。在此基礎(chǔ)上，通過(guò)DPPH自由基清除體系、鄰苯三酚自氧化體系以及亞硝胺阻斷體系考查紫薯花色苷對(duì)DPPH自由基、超氧自由基以及亞硝酸鹽的清除能力，綜合評(píng)價(jià)紫薯花色苷抗氧化性。</p><p><b>　　2實(shí)

24、驗(yàn)方法</b></p><p>　　2.1實(shí)驗(yàn)材料及主要儀器</p><p><b>　　2.1.1實(shí)驗(yàn)原料</b></p><p>　　新鮮紫薯，購(gòu)于杭州翠苑農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)，將鮮紫薯洗凈，晾干，然后切成薄片，在60℃下烘干，然后將烘干的切片放入粉碎機(jī)中粉碎成粉末，過(guò)80目篩篩選，將過(guò)篩后的粉末放于棕色瓶子中避免陽(yáng)光保存于陰涼處，備用。&

25、lt;/p><p><b>　　2.1.2實(shí)驗(yàn)試劑</b></p><p>　　無(wú)水乙醇，甲酸，鹽酸，檸檬酸，磷酸氫二鈉，磷酸二氫鈉，DPPH(1,1-二苯基-2-苦肼基)，95%乙醇，Tris-HCl緩沖液，鄰苯三酚，氫氧化鈉溶液，碳酸鈉，氨基苯磺酸，α－萘胺。以上藥品除95%乙醇為化學(xué)純外，其它都為分析純。</p><p>　　2.1.3實(shí)驗(yàn)主

26、要儀器</p><p>　　DHG一9030A型鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科技有限公司</p><p>　　725型紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì) 上海光譜儀器有限公司</p><p>　　HHS型電熱恒溫水浴鍋 上海博訊實(shí)業(yè)有限公司</p><p>　　METTLERA

27、T-200型電子天平 Edward Keller（Philippines）Inc</p><p>　　RE-52 AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海嘉鵬科技有限公司</p><p>　　KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司</p><p>　　DUZ-D（Ⅲ）型循環(huán)式真空泵

28、 鞏義市英峪予華儀器廠</p><p><b>　　2.2實(shí)驗(yàn)方法</b></p><p>　　2.2.1 PH示差法測(cè)定樣品中花色苷含量</p><p>　?。?）紫薯花色苷提取方法--超聲輔助熱浸提法</p><p>　　分別稱取備用的紫薯粉末20.02g將50%乙醇和5%甲酸均勻混合作為提取

29、劑，分別按固定物料液比1（g）：15（mL），放入平底燒瓶中，浸泡12個(gè)小時(shí)，次日在37℃的水浴鍋中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)1小時(shí)候取出，然后在超聲功率為100%的條件下，超聲10min后取出，抽濾，用提取劑適當(dāng)洗滌，得到澄清的色素提取液。將提取液旋蒸濃縮，待其冷卻到室溫后，用30%乙醇定容至100mL[5]。</p><p>　?。?）紫薯花色苷含量的測(cè)定—ph示差法</p><p>　　取兩份2.5m

30、L提取物將其調(diào)制pH為1和4.5，再用pH=1和pH=4.5的磷酸氫二鈉–檸檬酸緩沖溶劑定容至25mL。等過(guò)了pH平衡時(shí)間(平衡時(shí)間為40和150min)，以30%乙醇提取劑作為空白對(duì)照，用分光光度計(jì)分別在525nm和533nm下，平行測(cè)樣，用1cm比色皿測(cè)其吸光度值。按下列式子計(jì)算：</p><p>　　2.2.2紫薯花色苷提取物的初步純化方法</p><p>　　（1）大孔吸附樹(shù)脂過(guò)柱

31、的原理：</p><p>　　大孔吸附樹(shù)脂是一類不含交換基團(tuán)且有大孔結(jié)構(gòu)的高分子吸附樹(shù)脂，具有良好的大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和較大的比表面積，可以通過(guò)物理吸附從水溶液中有選擇地吸附有機(jī)物即非極性或極性較弱的物質(zhì)，具有物理化學(xué)穩(wěn)定性高、比表面積大、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、使用周期長(zhǎng)、宜于構(gòu)成閉路循環(huán)、節(jié)省費(fèi)用等諸多優(yōu)點(diǎn)。樹(shù)脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附質(zhì))之間的范德華引力，通過(guò)它巨

32、大的比表面進(jìn)行物理吸附而工作，使有機(jī)化合物根據(jù)有吸附力及其分子量大小可以經(jīng)一定溶劑洗脫分開(kāi)而達(dá)到分離、純化、除雜、濃縮等不同目的。</p><p>　?。?）紫薯花色苷提取物的初步純化方法</p><p>　　大孔吸附樹(shù)脂HPD-600柱吸附紫薯提取液過(guò)，洗脫后，在50℃下減壓濃縮至黏稠狀，然后冷凍干燥，得到純化過(guò)的紫紅色粉末狀固體。</p><p>　　2.2.3

33、紫薯花色苷紅外譜圖分析</p><p>　　稱取經(jīng)過(guò)初步純化的紫薯花色苷樣品2mg，與400mg干燥的KBr混合，在瑪瑙研磨中研磨5～10min，壓片，放入紅外光譜儀中探測(cè)500～4000cm－1 范圍內(nèi)吸收譜帶。</p><p>　　2.2.4 DPPH體系清除自由基實(shí)驗(yàn)</p><p>　?。?）DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)原理</p><p>

34、;　　DPPH是一種比較穩(wěn)定的脂性自由基，其N上有一個(gè)游離電子，其乙醇溶液呈紫色，在517nm處有最大的吸收峰。加入抗氧化劑以后，DPPH捕捉一個(gè)電子與游離電子配對(duì)，紫色褪去，變?yōu)闊o(wú)色物質(zhì)，在517nm處的吸收消失，其褪色程度與其接受的電子數(shù)成定量關(guān)系。依此原理用分光光度計(jì)檢測(cè)DPPH自由基與試樣液反應(yīng)后吸光值的變化，可檢定試樣提供氫原子、清除自由基抗氧化的能力。實(shí)驗(yàn)表明，該法簡(jiǎn)便易行，靈敏可靠，不失為篩選天然產(chǎn)物抗氧化劑的好方法之一[

35、6]。</p><p>　?。?）DPPH溶液配制</p><p>　　精確稱取DPPH10mg，然后用無(wú)水乙醇溶解，用250mL容量瓶定容，DPPH的濃度為4×10-2mg/mL，置于避光保存。</p><p>　　（3）DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)方法</p><p>　　將初步提純后的紫薯提取液配制成不同的濃度梯度，各取2mL于對(duì)應(yīng)

36、的具塞試管中，加入2mL濃度為4×10-4mol/l的DPPH乙醇溶液，搖勻，放置30min后，以無(wú)水乙醇作參比，在517nm處比色，測(cè)定其吸光度Ai，同時(shí)測(cè)定2mL30%乙醇與2mLDPPH溶液混合液的吸光度值A(chǔ)c，2mL提取液與2mL無(wú)水乙醇的吸光度值A(chǔ)j。則各待測(cè)物對(duì)DPPH的清除率K=[1-（Ai-Aj）/Ac]×100%[7]。</p><p>　　2.2.5鄰苯三酚清除超氧自由基實(shí)

37、驗(yàn)</p><p>　?。?）鄰苯三酚清除超氧自由基實(shí)驗(yàn)原理</p><p>　　鄰苯三酚自氧化—分光光度法被廣泛應(yīng)用于食品和藥品行業(yè)的抗氧化劑初步篩選及各種活性物質(zhì)清除超氧陰離子自由基(O2-·)的抗氧化功能評(píng)價(jià)。鄰苯三酚自氧化過(guò)程為鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，可產(chǎn)生O2-·，其自身氧化產(chǎn)物的含量可用分光光度儀檢測(cè)。在pH值<9.0時(shí)，鄰苯三酚自氧化速率與生成的O2 -·

38、;的濃度呈正相關(guān)，故可通過(guò)紫外可見(jiàn)光分光光度儀來(lái)定量測(cè)定抗氧化劑在此體系中對(duì)O2-·的清除作用,間接評(píng)價(jià)抗氧化劑的抗氧化能力[8]。</p><p>　?。?）鄰苯三酚清除超氧自由基實(shí)驗(yàn)方法</p><p>　　向2.8mL、pH8、2.50mmol/L的Tris-HCl緩沖液中加入0.1mL蒸餾水，于25℃保溫10min，然后加入0.1mL25℃預(yù)溫的60mmol/L的鄰苯三酚

39、，總體積3.0mL，迅速搖勻，倒入1cm比色杯中，在420nm處，每隔0.5min測(cè)一次吸光值，此吸光值記為A1。</p><p>　　向2.8mL、pH8、2.50mmol/L的Tris-HCl緩沖液中加入0.1mL紫薯花色苷浸提液，于25℃保溫10min,然后加入0.1mL25℃預(yù)溫的HCl，總體積3.0mL，迅速搖勻，倒入1cm比色杯中，在420nm處，每隔0.5min測(cè)一次吸光值，此吸光值記為A2。<

40、;/p><p>　　向2.8mL、pH8、2.50mmol/L的Tris-HCl緩沖液中加入0.1mL紫薯花色苷浸提液，于25℃保溫10min，然后加入0.1mL25℃預(yù)溫的60mmol/L的鄰苯三酚，總體積3.0mL，迅速搖勻，倒入1cm比色杯中，在420nm處,每隔0.5min測(cè)一次吸光值，此吸光值記為A3，則紫薯花色苷對(duì)超氧自由基清除率可表示為:SA%=（A1-（A3-A2）/A1×100。</

41、p><p>　　2.2.6亞硝銨的阻斷能力的實(shí)驗(yàn)</p><p>　　（1）亞硝胺阻斷的原理</p><p>　　在紫外光照射下,二甲基亞硝胺可分解成二甲基仲胺和亞硝酸根,反應(yīng)式如下:H2O+(CH3)2N-N=O→(CH3)2NH+2+NO-2亞硝酸根與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后,然后會(huì)跟α-萘胺偶合生成紅色化合物。我們?cè)儆梅止夤舛扔?jì)測(cè)出該化合物的吸光度值即可計(jì)算上述反應(yīng)液

42、中亞硝胺含量的多少。</p><p>　　(2)亞硝胺的阻斷能力的方法</p><p>　　取PH＝3.0的檸檬酸鈉－鹽酸緩沖液5.0mL（用分析天平稱取1.96g檸檬酸鈉，再量取1.5mL濃鹽酸加水稀釋，定容到100mL容量瓶，用鹽酸或50%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至PH至3.0，用PH紙測(cè)試），加入1mmol/L的亞硝酸鈉0.5mL(用分析天平稱取6.9g亞硝酸鈉，用蒸餾水定容到100mL容量

43、瓶，再?gòu)闹腥〕?.1mL溶液加蒸餾水稀釋到100mL容量瓶即為所得濃度），再加入適量提取液，加入1mmol/L的二甲胺0.5mL（該濃度同上配法），然后將反應(yīng)體系定容到10mL容量瓶。37℃恒溫1h。再取1.0mL經(jīng)反應(yīng)的溶液至約7cm2的玻皿中，加入0.5mL的0.5%碳酸鈉溶液，紫外燈照15min。接著加入1%對(duì)氨基苯磺酸1.5mL，搖勻，靜止2～3min后加0.1%α－萘胺1.5mL，加水至溶液體積精確為5.0mL，放置15min

44、，顯色充分后在波長(zhǎng)525nm下比色測(cè)定。同時(shí)用浸提劑做空白實(shí)驗(yàn)，并計(jì)算阻斷率。相關(guān)公式：</p><p>　　阻斷率=(A0-Ax)/A0×100％</p><p>　　A0—加入對(duì)應(yīng)濃度浸提劑的空白樣的吸光度值；</p><p>　　Ax—加入各組提取液時(shí)的吸光度值。</p><p><b>　　3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析<

45、;/b></p><p>　　3.1 PH示差法測(cè)定樣品中花色苷含量的方法結(jié)果</p><p>　　通過(guò)2.2.1PH示差法測(cè)定樣品中花色苷含量的方法，在測(cè)取吸光度以后，代入公式中計(jì)算得到Cx=0.421mg/100mL=4.21μg/mL，也即紫薯中花色苷含量為21.03μg/g。</p><p>　　3.2紫薯花色苷提取物的紅外譜圖</p>

46、<p>　　根據(jù)2.2.2實(shí)驗(yàn)，從紅外光譜儀中得到數(shù)據(jù)如下圖3-1：</p><p>　　紫薯花色苷為類黃酮系化合物，以C6-C3-C6為基本骨架，具有類黃酮典型結(jié)構(gòu)，從紅外譜圖中可以看出，波數(shù)3396.387cm-1為O-H鍵伸縮振動(dòng)吸收峰，波數(shù)為2931.269cm-1甲氧基中C-H鍵伸縮振動(dòng)吸收峰，波數(shù)為1600.627cm-1和1716.335可能是苯環(huán)骨架C=C鍵伸縮振動(dòng)吸收峰，波數(shù)為1056

47、.8cm-1可能是酮R1-CO-R2的伸縮振動(dòng)吸收峰。以上這些都是花色苷的特征吸收峰，可見(jiàn)提出得到的初制品種含有紫薯花色苷特征基團(tuán)。</p><p>　　圖3-1 紫薯花色苷紅外圖譜</p><p>　　3.3 DPPH體系自由基的清除率</p><p>　　根據(jù)2.2.4實(shí)驗(yàn)步驟，等待30min后，測(cè)取了吸光度AI,AC,AJ，代入K=[1-（Ai-Aj）/Ac

48、]×100%</p><p>　　得到表格3-1如下：</p><p>　　表3-1 不同濃度紫薯花色苷清除DPPH自由基實(shí)驗(yàn)結(jié)果</p><p>　　圖3-2 DPPH體系自由基的清除率</p><p>　　從上表3-1和圖3-2中清楚可以知道，DPPH體系下自由基的清除率隨著紫薯花色苷的濃度增大而一直增大，但是清除率增加幅度

49、表現(xiàn)為在低濃度時(shí)較快，但是隨著濃度增加，增加幅度也變小，甚至趨于平緩，其中當(dāng)濃度為0.842mg/mL時(shí)，DPPH自由基清除率最大，可達(dá)87.09%。</p><p>　　3.4鄰苯三酚超氧自由基清除率</p><p>　　根據(jù)2.2.5實(shí)驗(yàn)的步驟得到，不同濃度的浸提液的在不同時(shí)間段的A1，A2，A3，代入公式：SA%=（A1-（A3-A2）/A1×100，然后得到表格3-2如下

50、：</p><p>　　表3-2 鄰苯三酚超氧自由基清除率</p><p>　　圖3-3 鄰苯三酚超氧自由基清除率</p><p>　　從表3-2和圖3-3中可以清楚看到，紫薯花色苷對(duì)超氧自由基清除率隨著時(shí)間的變化而變化，隨著時(shí)間推移，各個(gè)濃度條件下清除率均緩慢增加，同時(shí)，紫薯花色苷對(duì)超氧自由基的清除率也依賴于紫薯花色苷濃度增大而增大，在相同時(shí)間點(diǎn)，濃度越大，清

51、除率越大，在反應(yīng)1.5分鐘后，較高濃度下的清除率隨濃度增大變化更為明顯；紫薯花色苷對(duì)鄰苯三酚體系中產(chǎn)生的超氧自由基最大的清除率可達(dá)72.1%。</p><p>　　3.5亞硝銨的阻斷率</p><p>　　根據(jù)2.2.4的實(shí)驗(yàn)步驟得到，加入對(duì)應(yīng)濃度浸提劑的空白樣的吸光度值和加入各組提取液時(shí)的吸光度值，然后代入公式阻斷率=(A0-Ax)/A0×100％中，得到以下表格3-3：<

52、;/p><p>　　表3-3 亞硝胺的阻斷率</p><p>　　圖3-4 亞硝胺阻斷率</p><p>　　從表3-3和圖3-4中可以清楚看到，紫薯花色苷對(duì)亞硝胺的阻斷能力隨著濃度的變大，阻斷能力也隨之變大，但是變化幅度較小，而且當(dāng)紫薯花色苷濃度達(dá)到1.754μg/mL以上時(shí)，阻斷能力沒(méi)有繼續(xù)加大反而有所下降，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，紫薯花色苷對(duì)亞硝胺的最大阻斷率可以

53、達(dá)到80.5%。</p><p><b>　　4、實(shí)驗(yàn)小節(jié)</b></p><p>　　4.1 紫薯花色苷對(duì)DPPH體系自由基具有較好的清除效果</p><p>　　在人體外模擬一個(gè)體系—DPPH體系，來(lái)篩選天然產(chǎn)物抗氧化劑的好方法之一[9]。通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)得DPPH自由基和紫薯花色苷樣品反應(yīng)后的吸光值的變化，我們測(cè)得紫薯花色苷在DPPH體系

54、下的自由基清除率就是測(cè)得了紫薯花色苷的抗氧化性?？寡趸砸矠樽鲜砘ㄉ兆鳛樘烊簧靥峁┝擞辛Φ臈l件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，紫薯花色苷對(duì)DPPH體系中的自由基具有良好的清除效果，清除效果隨濃度增加而增強(qiáng)，呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。</p><p>　　4.2紫薯花色苷對(duì)苯鄰苯三酚超氧自由基具有較好的清除效果</p><p>　　鄰苯三酚會(huì)發(fā)生自動(dòng)氧化反應(yīng)，其自氧化反應(yīng)的速率被抑制的大小顯示超氧自由基被清除

55、作用的強(qiáng)弱[10]。由之前我們可以看到3種濃度的紫薯花色苷對(duì)超氧自由基的清除率都隨著時(shí)間的變化清除率增大，然后趨于穩(wěn)定就是說(shuō)說(shuō)明對(duì)鄰苯三酚的自氧化抑制逐漸變大然后趨于穩(wěn)定。高濃度的紫薯花色苷對(duì)超氧自由基的清除率高，隨著時(shí)間的變化高濃度清除率的優(yōu)勢(shì)變大然后趨于穩(wěn)定亦說(shuō)明高濃度的紫薯花色苷對(duì)鄰苯三酚的自氧化抑制效果好，其中抑制效果隨著時(shí)間的變化，高濃度的抑制效果的優(yōu)勢(shì)明顯。</p><p>　　4.3紫薯花色苷對(duì)亞硝

56、胺具有良好的阻斷效果 </p><p>　　亞硝酸鹽被吃到胃里后，在胃酸作用下與蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物二級(jí)胺反應(yīng)生成亞硝胺。胃內(nèi)還有一類細(xì)菌叫硝酸還原菌，也能使亞硝酸鹽與胺類結(jié)合成亞硝胺。胃酸缺乏時(shí)，此類細(xì)菌生長(zhǎng)旺盛。故不論胃酸多少均有利于亞硝胺的產(chǎn)生。亞硝胺具有強(qiáng)烈的致癌作用，主要引起食管癌、胃癌、肝癌和大腸癌等[11]。在人體外模擬人體胃液的條件，二甲胺與亞硝酸鈉在37℃條件下，會(huì)生成二甲基亞硝胺，反應(yīng)式如下：(C

57、H3)2NH+NaNO2+HCl→(CH3)2N-N=O+NaCl+H2O。</p><p>　　我們向紫薯花色苷提取物中依次加入二甲胺與亞硝酸鈉，紫薯花色苷提取物優(yōu)先與亞硝酸鈉發(fā)生作用，使得二甲胺不能與亞硝酸鈉反應(yīng)，從而達(dá)到阻止亞硝胺生成的目的。我們據(jù)此可以比較相同條件下生成亞硝胺量的多少來(lái)反映提取物阻斷能力的強(qiáng)弱，生成亞硝胺量少，提取物的阻斷能力就強(qiáng)，反之則弱。</p><p>　　本

58、實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，紫薯花色苷對(duì)亞硝胺的阻斷能力不是隨著濃度增加而無(wú)限增加，在濃度超過(guò)1.754μg/mL后，阻斷能力反而有所下降，這個(gè)臨界濃度還有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。但是紫薯花色苷在亞硝胺途徑中上顯現(xiàn)了較強(qiáng)的阻斷能力，表明紫薯花色苷具備較好的抗癌活性。</p><p><b>　　5、展望</b></p><p>　　天然色素在食品、化妝品及醫(yī)藥的加工生產(chǎn)中有著廣闊的應(yīng)用前

59、景，我們應(yīng)當(dāng)大力發(fā)展。而作為一種珍稀的新型色素資源，在花色苷的應(yīng)用和研究仍然還處于初級(jí)階段。由于植物次生代謝產(chǎn)物的含量很低，所以實(shí)現(xiàn)花色苷在大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)可采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。</p><p>　　對(duì)于花色苷，我們可以用過(guò)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、積累次生代謝產(chǎn)物量的方法增加它在紫薯細(xì)胞中的含量。這也就是必須要了解細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的條件與細(xì)胞生物量和花青素產(chǎn)率的關(guān)系以及植物次生代謝途徑，兩者密切相關(guān)。</p>

60、<p>　　總之，通過(guò)近年來(lái)對(duì)花色苷的研究分析，人們已逐漸了解了它的一些功能，但是花色苷的全部功能和生化特性尚未完全清楚，尤其是在花色苷的分子生物學(xué)研究及作用機(jī)制等方面的直接證據(jù)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)更是不足，因此對(duì)花色苷的深入研究是非常必要和重要的，花色苷在飲品和藥品的開(kāi)發(fā)研制也具有良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益[12]。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)：</b></p>&l

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