中國(guó)被毛孢的培養(yǎng)及其有效成分測(cè)定和廢液綜合利用研究.pdf

1、冬蟲夏草(Cordyceps sinensis(Berk)Sacc)又稱蟲草，為我國(guó)傳統(tǒng)名貴滋補(bǔ)中藥材，與人參、鹿茸齊名，并列為三大補(bǔ)品[1]。天然冬蟲夏草對(duì)環(huán)境的特殊要求，加上近年國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)蟲草需求的急劇增加，造成過(guò)度采挖，使蟲草資源遭到嚴(yán)重破壞，市場(chǎng)供不應(yīng)求?，F(xiàn)有大量研究表明冬蟲夏草的無(wú)性型為中國(guó)被毛孢[2-5]（Hirsutellasinensis）。本文以冬蟲夏草無(wú)性型中國(guó)被毛孢為材料，研究不同氮源對(duì)其生長(zhǎng)的影響、發(fā)酵菌絲和天

2、然蟲草中蟲草素含量的差異、真菌在仿蟲培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)狀況及菌絲體接種蝙蝠蛾幼蟲的感染情況，并對(duì)發(fā)酵廢液的綜合利用形式進(jìn)行了探討。
　　 氮源試驗(yàn)結(jié)果表明：在試驗(yàn)的幾種氮源中，中國(guó)被毛孢對(duì)黃粉蟲蛹的吸收利用效果最好，培養(yǎng)80d，菌落直徑最大、生物量最高；對(duì)大豆蛋白胨的吸收利用率最低，但仍高于不添加氮源的對(duì)照組?？梢姡侵袊?guó)被毛孢生長(zhǎng)的必需元素；中國(guó)被毛孢對(duì)動(dòng)物類氮源的吸收利用率高于植物類氮源。推測(cè)，中國(guó)被毛孢在對(duì)原生寄主蝙蝠蛾幼蟲

3、的長(zhǎng)期寄生過(guò)程中產(chǎn)生了某種適應(yīng)性，中國(guó)被毛孢可能對(duì)地下昆蟲如蠐螬、地老虎的蛋白也有較好的吸收利用率。
　　 蟲草素等核苷類成分是冬蟲夏草中最主要的生理活性物質(zhì)之一，具有多方面的藥理作用。目前己把蟲草素作為冬蟲夏草質(zhì)量指標(biāo)之一。通過(guò)對(duì)幾種人工液體發(fā)酵菌絲體和天然冬蟲夏草中蟲草素含量的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵菌絲中的蟲草素含量略低于天然蟲草中的含量，但沒有顯著差異。在天然冬蟲夏草資源不能滿足人們自己增長(zhǎng)的蟲草需求的情況下，可以考慮用人工發(fā)酵中

4、國(guó)被毛孢菌絲代替天然蟲草藥用。
　　 用中國(guó)被毛孢液體發(fā)酵廢液拌麥麩飼喂黃粉蟲，通過(guò)對(duì)黃粉蟲羽化率、羽化整齊度、產(chǎn)卵量及孵化率的調(diào)查統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，添加中國(guó)被毛孢發(fā)酵廢液的處理中，黃粉蟲的各項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于只飼喂基礎(chǔ)飼料麥麩的處理。添加廢液的處理黃粉蟲羽化率更高，羽化更整齊，產(chǎn)卵量增加，良卵率提高。推知，發(fā)酵廢液中確有可利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，廢液的其他有效利用途徑有待深入研究探討。
　　 以蝙蝠蛾幼蟲、蠐螬和地老虎為氮源，蟲草原產(chǎn)地土壤

5、浸提液、普通土浸提液和無(wú)菌水為固體仿蟲培養(yǎng)基水源，通過(guò)對(duì)氮源、水源、鮮蟲添加量和空氣相對(duì)濕度進(jìn)行四因素三水平正交試驗(yàn)，優(yōu)化中國(guó)被毛孢的人工培養(yǎng)條件，進(jìn)行人工產(chǎn)子實(shí)體的可能性探索。結(jié)果顯示，以蝙蝠蛾幼蟲為氮源，鮮蟲添加量為40g/L，以蟲草原產(chǎn)地土浸提液為培養(yǎng)基水源，培養(yǎng)空氣相對(duì)濕度為65％時(shí)，中國(guó)被毛孢菌落直徑增加最快，生物量最高，但培養(yǎng)80d未產(chǎn)生子座。
　　 根據(jù)自然條件下蝙蝠蛾幼蟲感菌的可能途徑，通過(guò)對(duì)土壤顆粒大?。êY孔徑

6、大小）、幼蟲處理方式（自然、噴霧、浸泡）、飼料處理方式（天然飼料、表面滅菌、拌菌飼料）和土壤處理方式（原土、無(wú)菌土、拌菌土）進(jìn)行四因素三水平正交試驗(yàn)，優(yōu)化人工菌絲感染蝙蝠蛾幼蟲的最佳方法，試圖對(duì)半人工培養(yǎng)蟲草有性型進(jìn)行探討。結(jié)果顯示，當(dāng)土壤顆粒為0.55mm，幼蟲表面用菌絲懸液噴霧，并在土壤中加拌菌絲時(shí)，培養(yǎng)30d蝙蝠蛾幼蟲的僵蟲率最高。飼料中是否添加菌絲對(duì)僵蟲率沒有顯著影響。土壤的顆粒大小成為影響僵蟲率的最顯著因素，大顆粒的土壤處理形