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文檔簡介
1、<p> 老瓜頭總生物堿對角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠胸膜炎的抑制作用</p><p> 作者:陳虎,肖旭,王基云,李曉兵,楊衛(wèi)東</p><p> 【摘要】 目的 研究老瓜頭(Cynanchum komarovii Al. Iljinski)總生物堿(ACKs)對角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠胸膜炎的抑制作用及其作用機(jī)制。方法 采用吲哚美辛(10 mg·kg-1)或不同劑量的A
2、CKs(12,6,3 mg·kg-1)于角叉菜膠(0.2mL,10 mg·mL-1)制備大鼠胸膜炎模型前30min腹腔注射給藥,在造模后4h處死大鼠,測定胸腔滲出液體積,滲出液中白細(xì)胞計(jì)數(shù),測定肺組織勻漿中丙二醛(MDA)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性,并做肺組織形態(tài)學(xué)觀察。結(jié)果 吲哚美辛和ACKs各劑量均能降低胸腔液體滲出和白細(xì)胞浸潤,降低肺組織中MDA的含量,升高肺組織中SOD的活性。結(jié)論 ACKs對角
3、叉菜膠制備的大鼠胸膜炎有抑制作用并減少白細(xì)胞浸潤和炎性滲出,其作用機(jī)制可能與抑制活性氧對機(jī)體的損傷作用有關(guān)。 </p><p> 【關(guān)鍵詞】 老瓜頭總生物堿;胸膜炎;白細(xì)胞浸潤</p><p> Abstract: Objective To explore the anti-inflammatory effects of alkaloids from Cynanchum komar
4、ovii Al.Iljinski (ACKs) on rat carrageenin-induced pleurisy and to demonstrate the anti-inflammatory mechanism.Methods Rats were pretreated with an intraperitoneal injection of physical saline,indomethacin (10 mg·
5、kg-1) or ACKs (12,6,3 mg·kg-1).30min later,rats were anaesthetized and irritated with carrageenin (0.2mL,10 mg·kg-1) by pleural injection.And 4h later,rats were sacrificed by exsanguination</p><p>
6、; Key words:ACKs;pleurisy;leukocyte infiltration</p><p> 老瓜頭(Cynanchum komarovii Al. Iljinski),別名牛心樸子草,系蘿摩科鵝絨藤屬植物。老瓜頭在西北地區(qū)是一種重要的蜜源植物,并可以作為生物殺蟲劑加以開發(fā)利用。在醫(yī)學(xué)方面,民間用于鎮(zhèn)痛、退燒、止瀉和治療膽囊炎等。近20余年的實(shí)驗(yàn)研究表明老瓜頭還有止咳、祛痰、平喘和抗炎等
7、藥理作用[1-6]。本研究用角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠胸膜炎模型來研究老瓜頭總生物堿(ACKs)對急性炎癥的抑制作用。</p><p><b> 1 材料和方法</b></p><p><b> 1.1 動(dòng)物 </b></p><p> SD大鼠,雄性,體重200~250g,購于寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,動(dòng)物合格證號:S
8、CXK(寧)2005-0001。</p><p> 1.2 藥物與試劑 </p><p> 老瓜頭總生物堿,寧夏回族自治區(qū)物理研究所分析測試中心制備,用Tris-HCl液配成濃度為6、3、1.5 mg·mL-1的溶液,調(diào)pH值4.5;吲哚美辛,上海第十七制藥廠制,批號840303,用NaCO3-NaHCO3緩沖液配成濃度為5 mg·mL-1的水溶液,調(diào)pH值7.4
9、;水合氯醛,上海白鶴化工廠制,批號841218,配成7%的水溶液;角叉菜膠,由遼寧藥物研究所提供,使用前一天用生理鹽水配成1%的溶液,溶解過夜;蛋白定量、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)測定試劑盒,均購于南京建成生物工程研究所。</p><p><b> 1.3 儀器 </b></p><p> 光學(xué)顯微鏡,日本Olympus公司產(chǎn);CF16RX高速低
10、溫離心機(jī),日立公司;電熱恒溫水浴鍋,上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;VIS-7220N可見分光光度計(jì),北京瑞利分析儀器公司。</p><p><b> 1.4 方法 </b></p><p> 大鼠胸膜炎模型的制備、取材和生化指標(biāo)檢測 SD大鼠按體重隨機(jī)分成6組,每組8只,分別為正常對照組,模型組,吲哚美辛組(10 mg·kg-1),ACKs高、中、低劑量組
11、(12、 6、3 mg·kg-1)。參照Salvatore Cuzzocrea等人制備大鼠胸膜炎模型的方法[8-10],分別腹腔注射生理鹽水和相應(yīng)的藥物;30min后用水合氯醛(280 mg·kg-1)腹腔注射麻醉大鼠,向胸膜腔注射1%的角叉菜膠溶液0.2mL和生理鹽水0.2mL(正常對照組);致炎4h后再次用水合氯醛麻醉大鼠,沿膈肌邊緣打開胸腔,吸出胸腔滲出液,用2mL含肝素(5 U·mL-1)的生理鹽水
12、沖洗胸腔,吸出,與胸腔滲出液合并,測定總體積,另外取部分合并液做白細(xì)胞計(jì)數(shù);取出右肺,用生理鹽水洗去表面血液,濾紙蘸干,稱取0.5g相同部位的肺組織加入4.5mL的生理鹽水,制備成10%肺勻漿溶液,800g離心10min,吸取上清液待測,按丙二醛、超氧化物歧化酶測定試劑盒說明書,測定肺組織中MDA的含量和SOD的活性。另取相同位置的肺組織,10%的甲醛溶液固定1周,脫水,石蠟包埋,切片,蘇木精-伊紅染料(HE)染色,光學(xué)</p&g
13、t;<p> 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法</p><p> 結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件單因素方差分析中的LSD檢驗(yàn)方法處理,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。</p><p><b> 2 結(jié)果</b></p><p> 2.1 ACKs對大鼠胸膜炎胸腔滲出液量、白細(xì)胞計(jì)
14、數(shù)的影響 </p><p> 角叉菜膠致炎后4h,模型組大鼠胸腔滲出液量和白細(xì)胞數(shù)顯著高于正常對照組;ACKs三個(gè)劑量組均能降低大鼠胸腔滲出液量和白細(xì)胞數(shù)(P>0.01),見表1。表1 ACKs對大鼠胸膜炎胸腔滲出液量、白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響(略)</p><p> 2.2 ACKs對大鼠胸膜炎肺組織中MDA和SOD的影響 </p><p> 角叉菜膠致炎后4h
15、,模型組大鼠肺組織中MDA升高,而SOD下降(P<0.01);ACKs高、中劑量組能降低大鼠肺組織中MDA(P<0.01),同時(shí)能升高SOD(P<0.01),見表2。表2 ACKs對大鼠胸膜炎肺組織中MDA和SOD的影響(略)</p><p> 2.3 肺組織形態(tài)學(xué)觀察 </p><p> 與正常對照組相比,各致炎組大鼠的肺組織出現(xiàn)明顯的急性炎癥特征,表現(xiàn)為大量炎癥細(xì)胞浸潤、肺被膜
16、增厚等。與模型組相比,吲哚美辛組和ACKs各劑量組大鼠肺組織的炎癥有所改善,圖1(見封3)。</p><p><b> 3 討論</b></p><p> 急性炎癥是機(jī)體對致炎因子的刺激所發(fā)生的立即和早期反應(yīng)。急性炎癥的主要特點(diǎn)是以血管反應(yīng)為中心的滲出性變化,導(dǎo)致血管內(nèi)的白細(xì)胞和抗體等透過血管壁進(jìn)入炎癥反應(yīng)部位,消滅病原體,稀釋并中和毒素,為炎癥修復(fù)創(chuàng)造良好的條
17、件。急性炎癥起病急驟,持續(xù)時(shí)間短,以炎癥細(xì)胞浸潤為主。急性炎癥反應(yīng)中的血管擴(kuò)張、通透性升高和白細(xì)胞滲出的發(fā)生機(jī)制,是炎癥發(fā)生機(jī)制的重要課題。有些致炎因子可直接損傷內(nèi)皮,引起血管通透性升高,但許多致炎因子并不直接作用于局部組織,而主要是通過內(nèi)源性化學(xué)因子的作用而導(dǎo)致炎癥[8-10]。活性氧及其代謝物是內(nèi)源性化學(xué)因子的重要組成成分,對炎癥的發(fā)生、發(fā)展和結(jié)局起著重要作用[7]。MDA就是活性氧代謝物之一,它是機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)在脂質(zhì)過氧化物酶作用下生
18、成的終產(chǎn)物。而SOD是體內(nèi)清除超氧陰離子的重要酶類,它的活性直接影響體內(nèi)活性氧的含量,反映機(jī)體的抗氧化能力。一般同時(shí)測定MDA和SOD更能說明活性氧對機(jī)體損傷程度的大小。本研究結(jié)果表明,老瓜頭總生物堿能減少大鼠胸膜炎的液體滲出、白細(xì)胞浸潤以及肺組織中MDA的含量,而升高SOD的活性。提示老瓜頭總生物堿抑制大鼠胸膜炎的作用機(jī)制可能是降低炎癥細(xì)胞的游走和</p><p><b> 【參考文獻(xiàn)】</b
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