蘇云金芽孢桿菌發(fā)酵液的濃縮及殺蟲蛋白微膠囊化的研究.pdf

1、本研究對生物農(nóng)藥蘇云金芽孢桿菌Bt lsz9408進(jìn)行了氣升式發(fā)酵，研究了發(fā)酵液的離心過濾工藝條件、殼聚糖絮凝濃縮工藝條件、復(fù)相乳液法制備Bt殺蟲蛋白腸溶微膠囊的最佳工藝條件、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(HPMCP)蛋白質(zhì)微膠囊包裹量的測定方法、殺蟲蛋白的非腸溶性微膠囊、腸溶性微膠囊和非腸溶性微膠囊的釋放特性等。 氣升式發(fā)酵得到了晶體規(guī)則，數(shù)量多的發(fā)酵原液。離心過濾可以除去發(fā)酵原液中的大顆粒物質(zhì)，有利于后續(xù)分離純化工藝的進(jìn)行，

2、其最佳工藝條件為在每次處理量1L，溫度10-15℃、pH4.5時過濾效果最好。采用殼聚糖進(jìn)行絮凝濃縮，避免了化學(xué)絮凝劑、微生物絮凝劑對原藥效果的影響，絮凝濃縮可除去約75％左右的水分及有色物質(zhì)，其最佳工藝條件為：pH5.0-6.0、溫度30-35℃、殼聚糖濃度0.025％、攪拌時間5min、550r/min；通過對發(fā)酵液分離純化，得到等電點(diǎn)沉淀法提取的殺蟲蛋白質(zhì)比有機(jī)溶劑法的純度高。 對測定HPMCP蛋白質(zhì)微膠囊包裹量的方法研究

3、中得到福林-酚法最適合測定。復(fù)相乳液法制備的腸溶式微膠囊形態(tài)多為圓形，并且沒有粘結(jié)在一起的現(xiàn)象，最佳工藝條件為：分散質(zhì)濃度為0.5％，攪拌轉(zhuǎn)速6000r/min、囊壁材料濃度2％-3％、乳化劑用量為5％、芯材量4％、分散比為1：2.5-1：3.5。以乙基纖維素制備的非腸溶性微膠囊形態(tài)規(guī)則，不粘結(jié)在一起，通過對微膠囊釋放特性研究得到：體外測定2-3h微膠囊釋放量達(dá)到平衡，腸溶性微膠囊在偏堿性環(huán)境中釋放速度快，而非腸溶性微膠囊則不受溶液的酸