惡性腫瘤的生物治療及其進(jìn)展

1、惡性腫瘤的生物治療及其進(jìn)展,青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤中心安永恒二0一0 ，九,概念及概況,惡性腫瘤的生物治療主要是通過調(diào)動宿主天然防御機(jī)制或給予機(jī)體某些物質(zhì)來取得抗腫瘤的效應(yīng)。隨著現(xiàn)代生物科學(xué)研究的深入和進(jìn)步，生物治療已經(jīng)逐漸發(fā)展為治療腫瘤的第四種手段。面向21世紀(jì)的腫瘤治療，抗癌藥物的發(fā)展將從應(yīng)用細(xì)胞毒性藥物攻擊腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)向非細(xì)胞毒性靶向性藥物調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答和應(yīng)激反應(yīng)來殺滅腫瘤細(xì)胞，其中生物治療將起到極其重要的作用。腫瘤的生

2、物治療其有別于腫瘤的手術(shù)、放療及化療，腫瘤的生物治療不僅可單獨(dú)應(yīng)用，也適于與手術(shù)、放療及化療聯(lián)合應(yīng)用，且不產(chǎn)生嚴(yán)重副作用，所以很快在生物高技術(shù)相對較發(fā)達(dá)的國家和地區(qū)廣泛開展起來。我國腫瘤生物治療也正在與國際接軌。,腫瘤免疫治療的回顧及現(xiàn)狀[1],惡性腫瘤的免疫治療已有近百年的歷史。以往治療主要是手術(shù)、放療和化療，由于近幾十年免疫學(xué)的進(jìn)展，免疫治療也被作為惡性腫瘤治療的一種措施。開始人們用非特異性免疫刺激劑，如卡介苗、短小棒狀桿菌和滅活

3、的腫瘤細(xì)胞及其提取物充當(dāng)特異性的疫苗來治療腫瘤，試圖在腫瘤免疫治療方面有所突破。,腫瘤免疫治療的回顧及現(xiàn)狀[2],自上世紀(jì)70年代中期以來，細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)及生物工程技術(shù)的迅速發(fā)展,給惡性腫瘤的免疫治療帶來了新的希望。1975年，Kohler和milstein首先描述了用于產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞雜交技術(shù)，開始了單克隆抗體對腫瘤的診斷和治療。上世紀(jì)80年代，細(xì)胞工程技術(shù)可使巨噬細(xì)胞、細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、淋巴因子活化的殺傷

4、細(xì)胞等大量生產(chǎn)，使之用于臨床成為可能。,腫瘤免疫治療的回顧及現(xiàn)狀[3],近十幾年由于DNA技術(shù)的進(jìn)步，利用基因工程可以大量生產(chǎn)重組糖蛋白，如干擾素、腫瘤壞死因子、白細(xì)胞介素、克隆刺激因子等十?dāng)?shù)種用于腫瘤免疫治療的細(xì)胞因子。人們對腫瘤免疫治療的理論及實(shí)踐又有了新的認(rèn)識，并建立了手術(shù)、放射治療和化學(xué)治療以外的腫瘤第四治療程式——腫瘤的生物治療。,腫瘤免疫治療的回顧及現(xiàn)狀[4],上述技術(shù)的發(fā)展，美國癌癥研究所Rosenberger實(shí)驗(yàn)室的Gr

5、imm等首先描述了外周血淋巴細(xì)胞經(jīng)白細(xì)胞介素2(interleukin—2，IL—2)體外誘導(dǎo)培養(yǎng)活化后，可產(chǎn)生明顯的抗腫瘤效應(yīng)，稱之為淋巴因子活化的殺傷細(xì)胞(lymphokine activated killer cells，LAK cells)。以后又發(fā)現(xiàn)浸潤在腫瘤細(xì)胞間質(zhì)中的淋巴細(xì)胞經(jīng)IL—2活化后具有更強(qiáng)的抗腫瘤效應(yīng)，稱之為腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(tumor infiltrating lymphocytes，TILs)。,腫瘤免疫治療

6、的回顧及現(xiàn)狀[5],在此基礎(chǔ)上，經(jīng)過許多學(xué)者的努力將體外活化的抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞回輸給腫瘤患者，給過繼性免疫療法(adoptive immunol therapy，AlT)增添了新的內(nèi)容，引起了世人矚目。目前，基因重組細(xì)胞因子的大量生產(chǎn)，可提供足夠的IL—2、TNF、IFN等生物活性物質(zhì)，有希望導(dǎo)致腫瘤免疫治療的進(jìn)一步發(fā)展。,生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑的臨床應(yīng)用原則,BRM的主要臨床用途：①治療惡性腫瘤；②治療免疫缺陷??；③試用于自身免疫??；④

7、慢性細(xì)菌或病毒感染的預(yù)防及治療。 近年來，隨著免疫治療學(xué)的迅速發(fā)展，免疫治療已成為惡性腫瘤的第四治療模式。,生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑的臨床應(yīng)用原則,（1）腫瘤免疫治療的最佳情況 一是腫瘤特別小且身體狀況好的病人，二是治療時(shí)沒發(fā)病，但具癌腫高復(fù)發(fā)率的患者。故通過手術(shù)或放、化療使腫瘤縮至最小時(shí)免疫治療最有效，阻止作用也最好。（2）根據(jù)宿主免疫功能狀況選用適當(dāng)?shù)拿庖咧委煟缫顾拗骰謴?fù)免疫防御功能是主動免疫治療，來自供體的免疫細(xì)胞或抗體介入為被

8、動免疫治療，促使供體免疫白細(xì)胞傳遞信息給宿主細(xì)胞者為繼承免疫治療。未經(jīng)長期細(xì)胞減少治療，且腫瘤負(fù)荷很小者，用佐劑治療最有效。（3）手術(shù)、放療、化療期免疫功能受到暫時(shí)抑制,阻止新的免疫藥物發(fā)揮效應(yīng)，須待抑制作用過后再行免疫治療。一般手術(shù)后1～2周，放、化療前和放、化療的療程之間均為免疫治療的恰當(dāng)時(shí)機(jī)。,生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑的臨床應(yīng)用原則,（4）給藥方法如為每天給藥可致免疫調(diào)節(jié)劑的耐受，一般間歇應(yīng)用較成功。（5）細(xì)胞因子治療并非無不良反應(yīng)，不

9、同種類其不良反應(yīng)嚴(yán)重性不同。高劑量的細(xì)胞因子可出現(xiàn)病毒感染癥狀及血管滲漏綜合征，甚至出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀；均可對癥處理。（6）在免疫系統(tǒng)精細(xì)的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中，細(xì)胞因子不會孤立作用，故聯(lián)合應(yīng)用的生物效應(yīng)較明顯。必須注意細(xì)胞因子間的相互關(guān)系、協(xié)同作用和使用的先后順序。（7）免疫治療的前、中、后應(yīng)測定病人的免疫功能，根據(jù)病人的反應(yīng)調(diào)節(jié)給藥方案，避免免疫失調(diào)而促進(jìn)疾病的發(fā)展。（8）生物化療的應(yīng)用中，如加用白介素－2，有可能減少耐藥基因的表達(dá)，甚至

10、有可能逆轉(zhuǎn)耐藥基因，這或許是生物化療療效增加的一個(gè)因素。,生物治療的臨床應(yīng)用及其進(jìn)展,1. 細(xì)胞因子 2. 過繼免疫療法 3. 單克隆抗體 4. 腫瘤疫苗 5. 基因治療,,細(xì)胞因子,1.干擾素(interferon，IFN) 2.白介素(interleukin，IL) 3.腫瘤壞死因子(tumor necrosisfactor TNF) 4.集落刺激因子(colony-stimulating fac

11、tor CSF) 5.其他 如β—轉(zhuǎn)化生長因子(TGFp)、趨化 因 子(CK)等,,干擾素(interferon，IFN),干擾素通過增強(qiáng)吞噬細(xì)胞、NK細(xì)胞和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的活性抑制腫瘤細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化，調(diào)節(jié)其表面抗原機(jī)制，發(fā)揮殺滅腫瘤細(xì)胞的作用。,干擾素(interferon，IFN),主要適應(yīng)證：①毛細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤、惡性黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤、腎癌和膀胱癌等效果較好；②與化放療聯(lián)合，應(yīng)用

12、于各種惡性實(shí)體腫瘤的治療。劑量與用法：劑量每次3~6MU，每日或隔日注射1次，10次為1療程。通常采用皮下或肌肉注射。不良反應(yīng)有發(fā)熱、寒顫、乏力、肌痛和厭食等，一般在注射后48 h內(nèi)自行消失。,干擾素(interferon，IFN),張國英等γ—干擾素聯(lián)合化療治療非霍奇金淋巴瘤患者50例，I期Ⅱ期采用CHOP方案，Ⅲ期Ⅳ期包括復(fù)治患者采用MHACOD方案。聯(lián)合治療組加用γ－干擾素肌肉注射，1MU·d－1，連用10d，為1療程

13、，第2個(gè)周期化療時(shí)再用第2療程。兩組療程均在4周期以上，聯(lián)合治療組γ—干擾素治療均在2個(gè)療程以上。聯(lián)合治療與單純化療相比，完全緩解率和有效率提高，中、晚期及中、高度惡性淋巴瘤療效明顯提高，中位緩解期及無病生存期延長，提高了患者的生存質(zhì)量。,干擾素(interferon，IFN),楊璐等評價(jià)干擾素與白介素—2瘤體局部注射配合化療治療惡性淋巴瘤臨床療效。對照組26例單純化療，化療配合IFN與IL—2的治療組34例，每次IFN 3~6MU+I

14、L—2 0．5~1MU瘤體局部注射，每3d注射1次，每個(gè)化療周期使用3~5次。結(jié)果對照組化療2周期的完全緩解(CR)+部分緩解(PR)12例，有效率為46．2％，化療4周期后CR+PRl6例，有效率為60．2％，治療組化療2周期后CR+PR22例，有效率64．6％，化療4周期后CR+PR27例，有效率79．4％。結(jié)果表明IFN與IL—2配合化療治療惡性淋巴瘤的療效高于單純化療組，可明顯縮短化療周期，減輕毒副作用。,干擾素(interf

15、eron，IFN),田春桃等對33例惡性心包積液患者心包腔留置靜脈導(dǎo)管持續(xù)引流，并以干擾素針15MU腔內(nèi)注入，2~3 d后重復(fù)引流并再給藥1次。結(jié)果33例中完全緩解20例，好轉(zhuǎn)10例，有效率90．9％(30／33) 。,白介素(interleukin，IL),是指由白細(xì)胞產(chǎn)生的可以調(diào)節(jié)其他細(xì)胞反應(yīng)的任何可溶性蛋白或糖蛋白物質(zhì)。目前，以白介素命名的細(xì)胞因子已達(dá)15種。其中以白介素—2(IL—2)研究得最為深入，臨床應(yīng)用最為廣泛。,白介素(

16、interleukin，IL),作用機(jī)理及作用：IL—2主要由活化的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，IL—2具有激活和擴(kuò)增T細(xì)胞和B細(xì)胞，增強(qiáng)NK細(xì)胞的殺傷活性，誘導(dǎo)腫瘤殺傷細(xì)胞(如LAK，TIL)作用發(fā)揮，促進(jìn)許多重要細(xì)胞因子(如IFN，TNF等)產(chǎn)生與分泌生物活性物質(zhì)的作用。IL—2對腎細(xì)胞癌、黑色素瘤等腫瘤有良好的治療作用，能使瘤塊縮小及防止其轉(zhuǎn)移擴(kuò)散，甚至使腫瘤完全緩解。,白介素(interleukin，IL),用法用量：臨床上應(yīng)用的IL均

17、屬基因工程產(chǎn)品，主要以IL—2聯(lián)合其他細(xì)胞因子(如TNF，IFN—γ)局部注射為原則，亦可靜脈輸注IL—2和LAK細(xì)胞。IL—2局部應(yīng)用可采取皮下注射、肌肉注射、瘤體內(nèi)直接注射、胸腹腔內(nèi)注射、淋巴結(jié)周圍注射、膀胱內(nèi)灌注和肝動脈留置導(dǎo)管注射等方法。一般每次劑量為0．1～1 MU，2—3d注射1次，依據(jù)病情及不良反應(yīng)情況，每療程給藥3—20次。IL—2與IFN，TNF，CD單抗及化療藥物聯(lián)合應(yīng)用可產(chǎn)生更好的療效。,,,,白介素(interl

18、eukin，IL),IL—2的不良反應(yīng)有： 發(fā)熱、寒顫、惡心、嘔吐、血壓下降等，停藥后均可自行恢復(fù)，在治療前后給予消炎痛、地塞米松、異丙嗪等藥物，可減輕或控制副作用。毒副作用大、價(jià)格昂貴、半衰期短影響了IL在臨床的推廣。 近年來有改善。,白介素(interleukin，IL)臨床應(yīng)用,1990年Fisher等報(bào)道了經(jīng)靜脈給大劑量IL—2的治療方案，255例轉(zhuǎn)移性，腎癌患者有15％獲得緩解。全組255例患者的中位生存期是16

19、．3個(gè)月，5～10年生存期10％～20％。這一方案的療效優(yōu)于任何傳統(tǒng)療法，包括化療、激素治療和單藥IFN的治療。Fisher的給藥方法為IL—2 0．26～0．72MU·kg-1，靜脈點(diǎn)滴15min，每8h重復(fù)1次，連續(xù)5d，經(jīng)5-9d休息后再重復(fù)該劑量為1療程。對有效和穩(wěn)定者可每6～12周重復(fù)療程。由于本療法可引起嚴(yán)重的毛細(xì)血管滲漏綜合征、水液潴留、低血壓、心腎功能減退等毒副作用，因此美國國家腫瘤研究所外科部研究了小劑量7

20、2 kU·kg-1，d1-5，皮下給藥，具體用法為第1周0．25MU·kg-1，dl，然后第2～6周減半使用。此方法有效率11％，毒性相對較小。,白介素(interleukin，IL)臨床應(yīng)用,高劑量IL—2對黑色素瘤可取得15％～20％的有效率，其中6％可獲完全緩解。對266例患者長期隨訪的結(jié)果表明在獲完全緩解的患者中，69％都能長期無病生存，中位隨訪的時(shí)間>5年。隨訪>20個(gè)月的有效患者基本都無復(fù)發(fā)

21、，這部分患者實(shí)際上已被治愈。中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院最近總結(jié)111例惡性黑色素瘤患者的療效，其中57例術(shù)后以IL—2和IFN—α為主的生物或生物化療的中位生存期為2．7年，3年存活率36．8％。而54例術(shù)后常規(guī)化療放療的中位生存期為1．7年，3年存活率12．5％。二組療效相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。,白介素(interleukin，IL)臨床應(yīng)用,IL—2用于消除癌性胸腹腔積液效果肯定。周瑋采用重組人白介素—2(rlL—2)治療惡性胸腔積液42例

22、，在胸腔積液盡量排凈或明顯減少后將重組人白介素—2 0．4 MU用9g·L－1氯化鈉溶液稀釋后注入胸腔內(nèi)，囑患者多次變換體位，使藥物與胸膜廣泛均勻接觸，胸腔閉式引流患者注入藥物后夾閉引流管，24h后開啟繼續(xù)引流。如1周后復(fù)查胸片或B超顯示胸腔積液未能控制，排液后重復(fù)給藥1次。結(jié)果CR 17例(占40．5％)，PRl8例(42．9％)，CR+PR83．4％。,白介素(interleukin，IL)臨床應(yīng)用,楊秀枝等對60例惡性

23、胸腔積液行白介素—2和順鉑腔內(nèi)注射，對控制胸腔積液有顯著療效。行胸腔穿刺或胸腔閉式引流，盡量將胸液放凈，治療組接受白介素—2 2．2MU+順鉑40mg，分別溶人9g·L-1氯化鈉溶液200mL中緩慢注入胸腔(注畢囑患者變動體位)，每周1次，不超過5次，4周后行療效評定。結(jié)果顯示治療組對控制惡性胸腔積液有較好的療效，有效率達(dá)90％，同時(shí)副反應(yīng)發(fā)生率明顯降低，而且中位生存期亦明顯延長，與文獻(xiàn)報(bào)道的5個(gè)月有顯著性差異。因此可以認(rèn)為

24、白介素—2與順鉑聯(lián)合腔內(nèi)注射是治療惡性胸腔積液的有效方法之一。,腫瘤壞死因子(TNF),腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)主要由激活的巨噬細(xì)胞分泌。巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的TNF命名為TNF—α，T細(xì)胞產(chǎn)生的為TNF—β，應(yīng)用于臨床的主要是TNF—α。在TNF多種生物效應(yīng)中最受關(guān)注的是抗腫瘤作用。,腫瘤壞死因子(TNF) 抗腫瘤機(jī)制,TNF抗腫瘤機(jī)制為：①對腫瘤細(xì)胞有直接的細(xì)胞毒性和細(xì)胞抑制作用；②血管阻塞所致的

25、腫瘤缺血性壞死；③對毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的直接細(xì)胞毒性作用可導(dǎo)致腫瘤血管損傷和出血性腫瘤壞死；④誘導(dǎo)NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞毒作用升高、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞和多形核白細(xì)胞的抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用、誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)生等免疫調(diào)節(jié)作用以攻擊并殺滅腫瘤細(xì)胞；⑤誘導(dǎo)腫瘤局部發(fā)生炎癥反應(yīng)，使腫瘤壞死。,腫瘤壞死因子(TNF)劑量、適應(yīng)證,TNT的臨床應(yīng)用以小劑量局部注射為原則，成人用量為0．5MU／次，，每個(gè)療程連續(xù)4d，2周為1個(gè)療程。適應(yīng)證為：①晚期胸腹

26、腔積液患者胸腹腔內(nèi)注射；②實(shí)體瘤患者瘤內(nèi)注射；③對晚期腫瘤患者通過導(dǎo)管進(jìn)行局部給藥;④作為手術(shù)、放療、化療、中醫(yī)藥和免疫抗瘤療法的輔助治療。治療過程中可能出現(xiàn)發(fā)熱、寒戰(zhàn)、低血壓等反應(yīng)，可對癥處理，治療前后給予吲哚美辛、潑尼松等藥物可預(yù)防和減輕反應(yīng)。,腫瘤壞死因子(TNF)臨床應(yīng)用,51例晚期癌癥患者均伴有中等以上癌性漿膜腔(胸腹腔)積液，其中癌性胸腔積液28例，癌性腹腔積液23例。積液抽盡后，將溶有卡鉑400～600mg的9g

27、3;L—l氯化鈉溶液250mL+TNF lMU+地塞米松注射劑10rng，注入漿膜腔。結(jié)果CR 30例(58．82％)，PR16例(31．37％)，總有效率90．19％，明顯優(yōu)于卡鉑／TNF單用的效果，說明二者聯(lián)合有協(xié)同作用。,腫瘤壞死因子(TNF)臨床應(yīng)用,周濤等治療惡性胸腹腔積液患者X例，常規(guī)行胸穿或腹穿，盡量將胸腹腔積液抽盡，將2．0~2．5MUrhTNF NC溶入9g·L—l氯化鈉溶液50mL中，注入胸腔或腹腔，每周

28、2次，3周為1療程。結(jié)果顯示，rhTNF NC治療惡性胸腹腔積液有效率(CR+PR)為63．6％，其中惡性胸腔積液有效率為71．4％，惡性腹腔積液有效率50％，毒副反應(yīng)輕微。RhTNF NC對提高生存質(zhì)量有益。梁建科等治療152例晚期肺癌患者，腫瘤壞死因子聯(lián)合EPF化療方案，總有效率達(dá)77．2％，，且毒副反應(yīng)不大。,集落刺激因子(CSF),集落刺激因子(colony-stimulating factor，CSF)的問世推動了腫瘤化療的

29、進(jìn)步，粒細(xì)胞集落刺激因子(G—CSF)及粒細(xì)胞—巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM—CSF)用于治療化療藥物所致的骨髓抑制已取得了肯定的療效，同時(shí)也推動了骨髓移植、外周干細(xì)胞移植的基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用進(jìn)展。這兩種CSF在體外可誘導(dǎo)小鼠白血病細(xì)胞分化。雖有報(bào)道GM—CSF在體外對小細(xì)胞性肺癌細(xì)胞具有促進(jìn)增殖作用，但目前臨床尚無此類報(bào)道。紅細(xì)胞生成素(erythropoietin，EPO)可改善晚期癌癥患者貧血癥狀，提高生活質(zhì)量。,集落刺激因子(CS

30、F)分類,人類CSF主要有：①粒細(xì)胞—巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM— CSF)；②粒細(xì)胞集落刺激因子(G—CSF)；③巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M—CSF)；④多向集落刺激因子(multi—CSF)；⑤紅細(xì)胞生成素(erythropoietin，EPO)、 血小板生成素(plateletpointin，TPO)。CSF是一種糖蛋白，有刺激紅細(xì)胞系以外造血細(xì)胞增殖和分化的作用。,集落刺激因子(CS

31、F) G—CSF作用機(jī)理,CSF目前臨床應(yīng)用的是基因工程產(chǎn)品，有G—CSF和GM—CSF兩種。G—CSF的主要作用有：①刺激骨髓CFUG向成熟粒細(xì)胞分化、增殖；②促進(jìn)骨髓成熟粒細(xì)胞向外周血釋放；③激活成熟粒細(xì)胞的功能，延長其壽命；④刺激骨髓造血干細(xì)胞向外周血釋放；⑤增強(qiáng)成熟白細(xì)胞的吞噬作用及增強(qiáng)免疫效應(yīng)細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺滅作用。,集落刺激因子(CSF) G—CSF用法,我國常用的商品有格拉諾賽特、惠爾血、瑞血新、瑞白等，適用于腫瘤化

32、療、放療后引起的白細(xì)胞減少。在化療結(jié)束后d 2開始皮下注射，5μg·ke—l，1次·d—1，連續(xù)應(yīng)用14d左右。G—CSF副作用較輕微，表現(xiàn)為發(fā)熱、骨痛、肌肉疼痛、嗜睡和皮疹等，一般不影響治療，停藥后可消失。,集落刺激因子(CSF) GM—CSF作用機(jī)理,GM—CSF的主要作用：①促進(jìn)骨髓造血細(xì)胞較早階段的CFU— GM增殖、分化；②促進(jìn)粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞的增殖， 使外周血粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞明計(jì)數(shù)顯著增

33、加；③激活成熟粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞功能，提高機(jī)體抗感染和免疫應(yīng)答能力。,集落刺激因子(CSF) GM—CSF用法,我國常用的有生白能、里亞爾、特爾立、吉姆欣。GM—CSF主要用于骨髓移植和化放療后骨髓嚴(yán)重抑制的患者。腫瘤患者大劑量化療后做自體骨髓移植的同時(shí)，靜脈滴注GM—CSF(300μg·d-1)，能加快骨髓重建。一般不良反應(yīng)較大，表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、流涕、骨痛和乏力等感冒樣癥狀，少數(shù)可有胸悶、氣短、皮疹等癥狀。,集落刺激

34、因子(CSF)應(yīng)用時(shí)機(jī)及預(yù)防用藥,G—CSF的應(yīng)用方面不提倡在化療前和化療期間使用，化放療后期使用時(shí)一般不要靜脈給藥。 謝德榮探討癌癥患者化療后預(yù)防性應(yīng)用粒細(xì)胞集落刺激因子(G—CSF)的適應(yīng)證。結(jié)論是既往類似化療后出現(xiàn)Ⅲ-Ⅳ度血液學(xué)毒性、感染、Ⅱ度以上口腔炎或增加化療劑量強(qiáng)度，平均相對劑量強(qiáng)度≥1．2的患者，預(yù)防性應(yīng)用G—CSF有助于減輕化療引起的血液學(xué)毒性、降低治療費(fèi)用。,過繼免疫療法(adoptive immunothera

35、py，AlT),過繼免疫療法是將具有殺傷活性的免疫效應(yīng)細(xì)胞如LAK，TIL，CD3，AK和單核—巨噬細(xì)胞等轉(zhuǎn)輸或回輸給腫瘤患者，從而使效應(yīng)細(xì)胞在患者體內(nèi)發(fā)揮抗腫瘤作用的方法。過繼性免疫治療是目前應(yīng)用最廣最有希望的腫瘤生物療法之一。,淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(lymphokine activated killer cells，LAK),LAK細(xì)胞是不同于T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和天然殺傷細(xì)胞(nature killer cells，NK)，

36、并且不受主要組織相溶性復(fù)合體(major histocompatibility complex，MHC)限制的一種新型殺傷細(xì)胞。LAK細(xì)胞是外周血淋巴細(xì)胞在患者開始IL—2治療數(shù)天后反跳性增殖時(shí)收集的，在體外與IL—2一起培養(yǎng)數(shù)天后發(fā)展為具有高度非特異性細(xì)胞毒性細(xì)胞后再返輸給患者。常用血液淋巴細(xì)胞與1 MU·L-1的IL—2共培養(yǎng)3天（d）后明顯呈現(xiàn)LAK活性，活性可維持21 d，可擴(kuò)增100～1 000倍，應(yīng)用時(shí)取其培養(yǎng)中期

37、細(xì)胞。,淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)抗腫瘤的機(jī)制,目前認(rèn)為LAK細(xì)胞抗腫瘤的機(jī)制主要是直接殺滅腫瘤細(xì)胞，LAK細(xì)胞以核在前，線粒體等細(xì)胞器在后的姿態(tài)，向靶細(xì)胞“游動”，與靶細(xì)胞結(jié)合后，細(xì)胞漿中的高爾基復(fù)合體、微管和細(xì)胞毒素顆粒向靶細(xì)胞定向移動，然后LAK細(xì)胞釋放細(xì)胞毒素顆粒，在鈣激活下，細(xì)胞毒顆粒釋放穿孔素、絲氨酸酯酶等活性物質(zhì)結(jié)合于細(xì)胞膜上并各自發(fā)揮作用，從而使靶細(xì)胞裂解，1個(gè)LAK細(xì)胞僅能殺滅1個(gè)腫瘤細(xì)胞。LAK細(xì)胞可分泌IF

38、N-γ，TNF和IL—1，對腫瘤細(xì)胞有殺滅或抑制作用，還有促進(jìn)誘生NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的作用。,淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)臨床應(yīng)用,LAK細(xì)胞一般與IL—2聯(lián)用(稱IL—2／LAK療法)，臨床應(yīng)用時(shí)一般d 1～5給予重組IL—2 10U·kg—1，8h靜脈注射1次，d 8～12分離外周血淋巴細(xì)胞，并在體外加重組IL—2培養(yǎng)誘生LAK細(xì)胞，培養(yǎng)3～4d，在d12～15給予LAK細(xì)胞靜滴，1～100G細(xì)胞懸于9g·

39、L-1氯化鈉溶液100～250mL中，內(nèi)含20-50g·L-1人白蛋白，30～60min輸完，同時(shí)繼續(xù)按上述方法給予IL—2治療至d 16，也有學(xué)者認(rèn)為沒有令人信服的證據(jù)說明IL—2／LAK療法效果優(yōu)于IL—2。目前只在移植后淋巴細(xì)胞增殖性患者中試用了LAK細(xì)胞并取得一定療效。,腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(tumor infiltrating lymphocytes，TIL),TIL是直接從腫瘤組織中分離出來的T淋巴細(xì)胞，經(jīng)離體培養(yǎng)后由

40、IL—2誘導(dǎo)而成，具有腫瘤特異性殺滅活性，特別是對黑色素瘤活性更強(qiáng)。,腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)作用特點(diǎn),1986發(fā)現(xiàn)從實(shí)體瘤組織中分離出的腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞在體外經(jīng)IL—2激活后可大量擴(kuò)增，并對腫瘤細(xì)胞具有高度殺滅活性。在大約80％的人類腫瘤中分離出的TIL細(xì)胞，可以在IL－2誘導(dǎo)下在體外擴(kuò)增。TIL分泌IL－2，IFN和淋巴毒素(1ymphotoxin，LT)的能力極低，但經(jīng)外源性IL—2體外培養(yǎng)后反應(yīng)性明顯高于LAK細(xì)胞,且持續(xù)

41、時(shí)間長、擴(kuò)增倍數(shù)可達(dá)數(shù)萬至數(shù)十萬倍·，對腫瘤細(xì)胞的殺滅活性比LAK細(xì)胞高50~100倍，并具有特異性。TIL在體外培養(yǎng)30d．可擴(kuò)增1萬倍以上，其后仍以指數(shù)方式增長，比LAK細(xì)胞具有更大的擴(kuò)增潛力。LAK細(xì)胞和TIL在IL－2中培養(yǎng)5～20d都能在臨床應(yīng)用。,腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)作用特點(diǎn),臨床研究顯示約有1／3黑色素瘤細(xì)胞中分離的TIL細(xì)胞對新鮮的自體瘤細(xì)胞有溶解殺滅作用。TIL細(xì)胞的這種特異性溶解作用可以被抗CD3抗

42、體和抗MHC—I類分子的抗體所阻斷。從黑色素瘤來源的TIL細(xì)胞，與IL—2和IL—4共存時(shí)對自體瘤的溶解作用增強(qiáng)。腫瘤細(xì)胞與γ—干擾素作用后，可以增強(qiáng)TIL細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞溶解的敏感性。,腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)作用特點(diǎn),一般利用手術(shù)切除的腫瘤組織采用酶消化法分離制備TIL，TIL與IL—2或TIL與化療藥物聯(lián)合應(yīng)用效果更佳。臨床初步應(yīng)用結(jié)果表明機(jī)體能耐受治療劑量的TIL而無嚴(yán)重毒副作用。但TIL擴(kuò)增制備有相當(dāng)?shù)碾y度，限制了其應(yīng)用。,

43、在體外致敏的淋巴細(xì)胞(in vitro semitized lymphocyte，IVS),IVS細(xì)胞的特異性介于LAK細(xì)胞和TIL細(xì)胞之間，需要腫瘤細(xì)胞作為抗原來刺激。其中腫瘤抗原激活的殺傷細(xì)胞(tumor antigen—activation killer cells，TAK)就是典型代表。外周血淋巴細(xì)胞同腫瘤可溶性膜抗原、抗CD3單克隆抗體和IL—2共同培養(yǎng)擴(kuò)增后返輸給患者，可起到殺滅腫瘤細(xì)胞的作用。TAK比LAK有更強(qiáng)的特異性，

44、因此攻擊性更強(qiáng)。TAK細(xì)胞抗原強(qiáng)度和遞呈表達(dá)的效率、共刺激信號的提供等方面的研究尚不夠深入，某些機(jī)制也未闡明，故應(yīng)用受到限制，因療效也不穩(wěn)定，在免疫原性較強(qiáng)的黑色素瘤應(yīng)用效果也不理想。,過繼免疫化療(adoptive immunochemotherapy AICT),即過繼免疫療法聯(lián)合應(yīng)用化療藥物治療惡性腫瘤。過去很少將化療與免疫治療同時(shí)使用，理由是化療藥物殺滅腫瘤細(xì)胞同時(shí)也殺滅了免疫活性細(xì)胞。近年很多研究證明，LAK／IL—2治療的

45、同時(shí)，給予一定量的化療藥物能明顯產(chǎn)生協(xié)同作用。,過繼免疫化療(AICT）作用機(jī)制,過繼免疫化療的作用機(jī)制可能有以下幾方面：①化療藥物直接作用于腫瘤細(xì)胞減少腫瘤的負(fù) 荷，而阿霉素等對LAK，NK等免疫活性細(xì)胞 無明顯作用；②環(huán)磷酰胺等又是免疫抑制劑，選擇性抑制了 T細(xì)胞(Ts)；③化療藥物(如CTX，DOX等)作用后，實(shí)驗(yàn)表明可使輸注LAK細(xì)胞的腫瘤組織積聚增加1倍以上；④實(shí)驗(yàn)證明，絲裂霉素和IL—2，阿霉素和IL－2，環(huán)磷

46、酰胺和IL—2均有明顯協(xié)同抗癌作用； ⑤另外CTX可明顯降低IL—2毒性反應(yīng)。,單克隆抗體(單抗，MAb),單克隆抗體治療雜交瘤技術(shù)問世以來，單克隆抗體(單抗，MAb)的制備及在腫瘤診斷治療中的應(yīng)用取得極大的進(jìn)展。把腫瘤特異性單克隆抗體(MCAb)與細(xì)胞毒性物質(zhì)(如放射性核素、化療藥物和毒素等)連接起來，利用MCAb與腫瘤細(xì)胞的特異性結(jié)合，把細(xì)胞毒性物質(zhì)集中到腫瘤部位，可更有效地破壞腫瘤細(xì)胞結(jié)構(gòu)，即所謂的“生物導(dǎo)彈”或“導(dǎo)向

47、治療”。其中放射性核素應(yīng)用方便，標(biāo)記簡單，既可顯像診斷又可治療，故臨床使用最多。,單克隆抗體作用機(jī)理,腫瘤特異性單克隆抗體具有高度特異性，能在多種抗原中識別單一的抗原決定簇。單抗通過自身與腫瘤細(xì)胞結(jié)合、激活補(bǔ)體及調(diào)控作用直接殺滅腫瘤細(xì)胞；通過抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒作用；癌細(xì)胞表面存在許多與生長分化密切相關(guān)的受體(如表皮生長因子受體、轉(zhuǎn)鐵蛋白受體等)，這些受體在癌細(xì)胞表面往往明顯增多且功能增強(qiáng)，特異性單抗與這些受體結(jié)合將降低／抑制這些

48、受體的功能，從而抑制癌細(xì)胞的增殖。其次，根據(jù)單抗與特異性抗原結(jié)合的能力，將其與具有治療作用的物質(zhì)嵌合成偶聯(lián)物，能更有效地殺滅腫瘤細(xì)胞。這種單抗交聯(lián)物的應(yīng)用也稱為腫瘤的導(dǎo)向治療。這些物質(zhì)包括化療藥物、放射性同位素、生物毒素等。,單克隆抗體臨床應(yīng)用及努力方向,目前應(yīng)用的單克隆抗體主要為抗癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、甲胎蛋白(alpha—fetoprotein，AFP)、表皮生長因子(epiderm

49、al growth factor，EGF)受體和鐵蛋白受體等抗體。當(dāng)前醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用于臨床治療的核素為131I，125I，90Y，32P，111In，186Re等。放射免疫治療已用于臨床治療肝癌、結(jié)直腸癌、卵巢癌、膠質(zhì)細(xì)胞瘤、惡性黑色素瘤及淋巴瘤等。目前單抗治療腫瘤還存在一些亟待解決的問題。近年單抗技術(shù)的發(fā)展，一方面改進(jìn)雜交瘤基本技術(shù)，另一方面致力于基因工程抗體和新型單抗的研制。在單抗的基礎(chǔ)上制備抗獨(dú)特型抗體用于腫瘤疫苗也已進(jìn)行嘗試。,腫

50、瘤特異性單克隆抗體(MCAb)復(fù)合物即往療效不佳的原因,MCAb復(fù)合物治療腫瘤實(shí)際效果不很理想，因MCAb復(fù)合物到達(dá)腫瘤部位的數(shù)量有限和所用MCAb多為鼠源性MCAb，反復(fù)大量輸入人體會產(chǎn)生人抗鼠抗體(HAMA)，后果是HAMA與再次進(jìn)入人體的MCAb結(jié)合，使其無法到達(dá)靶細(xì)胞，嚴(yán)重者可發(fā)生過敏反應(yīng)。解決的辦法是研究開發(fā)人源性MCAb。,單抗治療近年新進(jìn)展抗171A單克隆抗體(panorex),1995德國政府主管部門批準(zhǔn)了用于治療

51、結(jié)直腸癌的鼠源性IgG2a單克隆抗體，靶點(diǎn)是癌細(xì)胞表面抗原171A，因此也叫抗171A單克隆抗體(panorex)，在術(shù)后給藥可以防止約1／3的患者發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。，,單抗治療近年新進(jìn)展 (美羅華),1997美國FDA批準(zhǔn)Rituxan(美羅華)用于臨床抗腫瘤治療。Rituxan是為一種人源化的抗B細(xì)胞CD20的單克隆抗體，一般來說在90％以上B細(xì)胞淋巴瘤(B—cell lymphoma)中均有CD20的表達(dá)。對復(fù)發(fā)性和化療抗拒性的非

52、霍奇金淋巴瘤Rituxan的有效率為48％。Rituxan的作用機(jī)制是多方面的：①可以誘導(dǎo)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒性作用(antibody—dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)；②誘導(dǎo)補(bǔ)體介導(dǎo)的溶細(xì)胞作用(CDC)；③誘導(dǎo)程序化細(xì)胞死亡即凋亡；④使化療耐受性淋巴瘤細(xì)胞重新敏感化。目前Rituxan聯(lián)合化療在中高度惡性淋巴瘤中的作用和在大劑量化療加自體干細(xì)胞移植后的使用均在積極研究中。,單抗

53、治療近年新進(jìn)展 (美羅華),適應(yīng)證： 主要適應(yīng)于中低度NHL，使用前需要對淋巴瘤病理切片進(jìn)行CD20表達(dá)的檢測，以求治療的準(zhǔn)確性和保證療效。劑量與用法： 推薦劑量為365mg／m2，用生理鹽水稀釋到1mg／ml后搖勻靜脈緩慢滴注，每周一次。每4～8次為一療程。本品和化療聯(lián)合用藥可以明顯提高療效，有效率可達(dá)90％。有報(bào)告33例病人中CR21例，PR11例，PD僅1例。平均緩解期超過1年。,單抗治療近年新進(jìn)展赫賽汀,Hercepti

54、n,1998~99年 FDA通過了用于腫瘤治療的單抗Herceptin，其作用的靶目標(biāo)是具有Her—2基因過度表達(dá)的腫瘤細(xì)胞。已觀察到在1／3的乳腺癌患者中由于Herceptin的使用而增加了化療的敏感性，提高了有效率和延長了生存期。在提交FDA通過的關(guān)鍵性單藥臨床Ⅱ期研究資料中，222例乳腺癌患者總有效率為15％，中位緩解期91個(gè)月，中位治療到進(jìn)展時(shí)間(TTP)為11個(gè)月，中位生存期為13個(gè)月，還有部分患者的病情穩(wěn)定期超過6個(gè)月，總的

55、臨床獲益患者超過30％。,單抗治療近年新進(jìn)展赫賽汀,Herceptin,Seidman等曾在一個(gè)Ⅱ期研究中用Herceptin加紫杉醇療法觀察了95例Her—2基因表達(dá)陽性和陰性的患者；這些患者曾接受多達(dá)3次的化療，其中87％有內(nèi)臟轉(zhuǎn)移，65％用過葸環(huán)類藥物。紫杉醇90mg/m2，1次／周，加標(biāo)準(zhǔn)Herceptm劑量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)用IHC法檢測Her—2陽性者和陰性者有效率分別為83％和45％，其中部分患者治療20個(gè)月后腫瘤仍在縮??；He

56、rceptini在Her—2基因陽性表達(dá)患者中的治療效果是肯定的，使乳腺癌的診斷、治療和預(yù)后上升到新的水平，是繼雌激素受體(estrogen receptor,ER),孕激素受體(progestomimetic receptor,PR)基礎(chǔ)上的內(nèi)分泌治療后又一個(gè)新的里程碑。,單抗治療近年新進(jìn)展其他,表皮生長因子受體(EGFR)在人的鱗癌、乳腺癌和腦膠質(zhì)瘤等均有較高的表達(dá)。有報(bào)道，抗EGFR單抗與長春堿衍生物的偶聯(lián)物在裸鼠做預(yù)實(shí)驗(yàn)，顯示

57、良好的抗癌效果?？笶GFR的人鼠嵌合抗體已進(jìn)入臨床研究。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在血管生成中有重要作用，在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用，因此血管新生抑制劑也是靶向抗癌藥物研究的一大熱點(diǎn)。目前針對該靶點(diǎn)的藥物有SU—5416，SU—6668等，均能特異性抑制VEGF受體的活性。,腫瘤疫苗,腫瘤疫苗即腫瘤的特異性主動免疫治療(active specific immtmotherapy，ASl)，是用減毒的完整細(xì)胞、細(xì)胞壁、特異性抗

58、原或非致病性的活微生物來刺激患者的免疫系統(tǒng)，以引起免疫應(yīng)答來殺滅腫瘤細(xì)胞的方法。用腫瘤疫苗進(jìn)行主動免疫治療可以克服因腫瘤產(chǎn)物造成的免疫抑制狀態(tài)，刺激特異性免疫應(yīng)答來攻擊腫瘤細(xì)胞腫瘤，增強(qiáng)腫瘤相關(guān)抗原(tumor associated antigen，TAA)的免疫原性。,腫瘤疫苗,近年的研究表明腫瘤疫苗具有誘導(dǎo)機(jī)體特異性主動免疫應(yīng)答，增強(qiáng)機(jī)體抗瘤能力的作用，這一機(jī)制在動物實(shí)驗(yàn)中得到肯定，目前多種腫瘤疫苗已進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)研究階段。特別是在免

59、疫原性強(qiáng)的腫瘤中，腫瘤疫苗已顯現(xiàn)其臨床療效。當(dāng)前，腫瘤疫苗治療從許多臨床Ⅰ期和Ⅱ期研究報(bào)道中反映出腫瘤疫苗治療可使部分患者獲得部分緩解或完全緩解，而且基本無毒副反應(yīng)。值得注意的是有些患者療效持續(xù)時(shí)間相當(dāng)長，可達(dá)數(shù)年之久，有些已進(jìn)入臨床Ⅲ期研究。,腫瘤疫苗腫瘤細(xì)胞型疫苗,是研究最多、研究時(shí)間最長的腫瘤疫苗，其中療效較好的首推病毒感染的腫瘤溶解物疫苗(viraloncolysate vacine，VOV)。VOV是用感染病毒的自體或異體腫

60、瘤細(xì)胞，經(jīng)溶解后制成的疫苗，主要用于高免疫原性腫瘤，如惡性黑色素瘤等的治療。VOV能在一定程度上增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答 。,腫瘤疫苗腫瘤細(xì)胞型疫苗機(jī)制,其機(jī)制包括：①病毒抗原可修飾具有免疫原性的腫瘤抗原，使之更易于被機(jī)體免疫系統(tǒng)識別；②針對病毒的特異性，可修飾具有免疫原性的腫瘤抗原，使之更易于被機(jī)體免疫系統(tǒng)識別；③針對病毒的特異性Th細(xì)胞，可非特異刺激腫瘤特異性T細(xì)胞或B細(xì)胞。許多學(xué)者的臨床實(shí)驗(yàn)均表明，VOV能明顯延長惡性黑色素瘤患

61、者的存活期。,腫瘤疫苗腫瘤相關(guān)抗原疫苗,目前已證實(shí)了近百種腫瘤相關(guān)抗原(tumor associated antigen，TAA)其中一部分具有較強(qiáng)的腫瘤特異性，一些抗原的基因已被克隆出來(如黑色素瘤AMGE—1和MAGE—3，MART等)，這些抗原均可用于腫瘤疫苗研制。目前研究較多的TAA抗原包括3類：①純化的天然TAA，如神經(jīng)節(jié)糖苷GM2(ganglioside GM2)疫苗；②人工合成的TAA，如人工合成的寡糖sTn疫苗和人工合

62、成的MUCI多肽疫苗等；③基因工程生產(chǎn)的TAA，如重組MAGE—1疫苗。采用任何一種生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的該類疫苗均被看好在近期內(nèi)成為商品疫苗。,腫瘤疫苗病毒型腫瘤疫苗,有1／5的腫瘤與病毒感染有關(guān)，這類腫瘤常表達(dá)相應(yīng)的病毒抗原，因此制備的病毒疫苗可望誘導(dǎo)出針對腫瘤的免疫應(yīng)答。目前數(shù)種EB病毒(Epstein—Barr vires)及人乳頭瘤病毒有關(guān)的抗癌疫苗已在臨床試用中。,腫瘤疫苗 抗獨(dú)特型抗體疫苗,腫瘤抗原可誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體—

63、1(antibody—1 Abl)，該抗體可變區(qū)的獨(dú)特性決定簇具有免疫源性，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體—2(antibody—2，Ab2)，稱為抗獨(dú)特型抗體。有的Ab1可變區(qū)決定簇能模擬原來的抗原結(jié)構(gòu)誘導(dǎo)抗原的特異性免疫應(yīng)答，稱為內(nèi)影像抗原，可作為疫苗應(yīng)用?？躬?dú)特性疫苗的優(yōu)點(diǎn)在于其不含抗原或抗原片段，制備工藝簡單、經(jīng)濟(jì)，可批量人工合成。抗獨(dú)特性抗體的分子量小，其免疫原性往往不完全，故需與免疫載體結(jié)合。,腫瘤疫苗 抗獨(dú)特型抗體疫苗（應(yīng)用）,抗獨(dú)

64、特性抗體疫苗已用于治療淋巴瘤、黑色素瘤、結(jié)腸癌、皮膚T淋巴細(xì)胞瘤和卵巢癌等腫瘤患者，其臨床咨詢有待觀察。一組臨床實(shí)驗(yàn)用抗獨(dú)特性抗體疫苗治療40例惡性淋巴瘤，結(jié)果15％完全緩解、50％部分緩解，緩解期為6個(gè)月左右?？躬?dú)特性抗體疫苗治療的主要障礙是腫瘤內(nèi)存在獨(dú)特性抗原陰性的細(xì)胞，因而可有免疫逃逸可能。,基因治療(genetherapy),一類應(yīng)用基因工程的方法校正或修復(fù)與腫瘤發(fā)生有關(guān)的變異基因，或通過某些細(xì)胞的生物學(xué)特性增強(qiáng)宿主的抗瘤能力，

65、以達(dá)到治療腫瘤目的的方法。腫瘤基因治療的原理是將目的基因用基因轉(zhuǎn)移技術(shù)導(dǎo)入靶細(xì)胞，使其表達(dá)此基 因而獲得特定的功能，繼而執(zhí)行或介導(dǎo)對腫瘤的殺傷和抑制作用，以達(dá)到治療目的。,基因治療的優(yōu)越性：,①腫瘤的選擇性比放療、化療更強(qiáng)，可通過特異性基因轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)或特異基因的作用；②損傷程度小，而且輕微；③對晚期腫瘤和轉(zhuǎn)移病灶仍然有效。,實(shí)現(xiàn)腫瘤基因治療有三個(gè)技術(shù)關(guān)鍵：,1. 腫瘤基因治療中的受體細(xì)胞 2. 介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移的方法 3. 腫瘤

66、基因治療中的目的基因,1. 腫瘤基因治療中的受體細(xì)胞,受體細(xì)胞 ：進(jìn)行腫瘤基因治療時(shí)，要有一個(gè)接受目的基因，并使其表達(dá)，發(fā)揮其基因調(diào)控作用的細(xì)胞。是實(shí)現(xiàn)基因治療能否成功的一個(gè)關(guān)鍵。適宜的受體細(xì)胞應(yīng)具備以下幾個(gè)基本條件：①易于獲得，能在體外培養(yǎng)及擴(kuò)增；②易于接受基因轉(zhuǎn)移；③回輸體內(nèi)能定位于病灶，并穩(wěn)定地表達(dá)外源基因。,基因治療的受體細(xì)胞主要有三類：,①抗癌效應(yīng)細(xì)胞:如淋巴細(xì)胞體外受自身瘤細(xì)胞再攻擊后的殺傷性T細(xì)胞(CTL)，從腫

67、瘤組織中分離的激活淋巴細(xì)胞(TIL)。這類細(xì)胞在傳遞遺傳信息同時(shí)還能趨向于腫瘤細(xì)胞，并產(chǎn)生直接作用，是最理想的運(yùn)載細(xì)胞。 ②各類自體或異體瘤細(xì)胞：經(jīng)體外基因修飾腫瘤細(xì)胞后，可以做為疫苗，在體內(nèi)誘導(dǎo)明顯的、系統(tǒng)的免疫應(yīng)答，起到即可消滅腫瘤細(xì)胞，又為病人接種而防止腫瘤復(fù)發(fā)。③造血干細(xì)胞：將一些抗耐藥基因(MDR)轉(zhuǎn)移到骨髓干細(xì)胞中，保護(hù)其免受化療藥物的毒性作用，增加化療的效果，或轉(zhuǎn)入CSF基因，增強(qiáng)造血系統(tǒng)的再生能力。,2.介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移

68、的方法,基因治療必須依靠基因轉(zhuǎn)移技術(shù)，將外源性功能基因(目的基因)導(dǎo)入受體細(xì)胞才能實(shí)現(xiàn)?；蜣D(zhuǎn)移技術(shù)分為體外和體內(nèi)轉(zhuǎn)移。 ①體外基因轉(zhuǎn)移多采用生物學(xué)方法，以病毒為載體 ②體內(nèi)基因轉(zhuǎn)移多采用化學(xué)法的脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移,3. 腫瘤基因治療中的目的基因,腫瘤基因療法的提出是以腫瘤發(fā)病機(jī)制與基因表達(dá)失調(diào)有關(guān)的理論為依據(jù)。腫瘤的發(fā)生是一系列遺傳異常在一個(gè)細(xì)胞的累積導(dǎo)致的一種異?？寺〉脑鲋常夷[瘤患者絕大部分處于免疫耐受狀態(tài)。腫瘤基因治療正