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文檔簡介
1、結核菌素試驗,,(一)定義:由人工培養(yǎng)的結核桿菌的培養(yǎng)濾液制成的一種生物制品,其有效成份為結核蛋白。 (二)使用:≥3月的嬰幼兒接種卡介苗前篩選。測試卡介苗接種后是否有效,于接種后12周進行,陽性者表示接種成功。(其他略) (三)品種:OT、PPD(TB-PPD、BCG-PPD等)。 (四)規(guī)格:1ml/支、10人份,每毫升含PPD 1μg,相當于50個國際結素單位。,一、結核菌素(Tuberculin),1.舊結素
2、(Old Tuberculin OT):以Koch最初方法制成的結素。由于其制作簡易,性質(zhì)穩(wěn)定,所以在較長時間內(nèi)一直使用。缺點是含雜質(zhì)多,不易標準化,不同生產(chǎn)單位或同一單位生產(chǎn)的各批效價不一。 2.純蛋白衍化物(Pure Protein Derivatine PPD):用化學方法從結核菌培養(yǎng)液中提取出較純結核蛋白而制成的一種固體狀結素。其純度高,特異性強,可以標準化,因此逐步取代了舊結素。,(一)方法;皮內(nèi)注射法(Mantoux法)
3、,最大優(yōu)點是劑量和結果都較準確。 (二)部位:左前臂掌側(cè)中間。如有疤痕、血管瘤等無法注射時,可換臂,但需注明。 (三)劑量:0.1ml/人次。 (四)觀察:72小時。,二、皮試,結素反應屬于細胞介導的遲發(fā)型(Ⅳ)變態(tài)反應,是由結核蛋白與攜帶免疫信息的小淋巴細胞(致敏T淋巴細胞)接觸后產(chǎn)生的變態(tài)反應。結核蛋白在生產(chǎn)提取過程中發(fā)生部分變性,抗原成份已不完整,是半抗原,其本身不能使動物致敏,只有加上臘質(zhì)?。╓ax D)才能使動物致
4、敏,而臘質(zhì)丁正是結核菌外殼的組成成份。故只有當機體受到結核菌或卡介苗感染后方能形成致敏T淋巴細胞而對結素產(chǎn)生反應,而非感染者不對結素產(chǎn)生反應。,三、反應機制,結素反應共有二個階段,第一個階段是特異性階段。當結素進入致敏機體后,與循環(huán)中的致敏T淋巴細胞接觸,刺激T淋巴細胞釋放大量免疫活性物質(zhì)——淋巴因子,如巨噬細胞游走抑制因子、轉(zhuǎn)移因子、皮膚反應因子、趨化因子、巨噬細胞凝集因子、淋巴毒素等。第二個階段是非特異性階段。釋放出的這些活性物質(zhì)可
5、以促使巨噬細胞向有反應原的地方游走、聚集、發(fā)育、繁殖,可以使局部血管擴張,通透性增加,導致局部充血、滲出,,更多的細胞從血管向外浸潤,在24小時后局部出現(xiàn)紅暈和硬結,48—72小時達到高峰,形成肉眼可見的局部皮膚反應,反應強烈者可出現(xiàn)水泡、潰瘍,嚴重者可見前臂腫脹,疼痛、發(fā)熱、周身不適等。 紅暈是局部血管擴張所致,對判斷機體致敏無意義,而硬結是水腫加巨噬細胞浸潤所致,是判斷機體致敏的依據(jù)。,1.發(fā)熱(T>37.5℃)2.各種傳染病
6、及恢復期。3.各種器質(zhì)性疾病如心臟、血管系統(tǒng)、腎臟、肝臟和胃腸等疾病急性期。4.身體極度虛弱者。5.患有局部或全身性皮膚病。6.防御機制不健全者,如免疫缺陷,丙種球蛋白缺乏者。7.其他預防接種不到二周者。8.本人或家屬有過敏史或變態(tài)反應史。9.神經(jīng)及精神不正常,易出現(xiàn)暈厥、休克、癲癇等情況者。,四、禁忌癥,1.試驗前先核對藥名、劑量、有效期及嬰幼兒,如有沉淀、安瓿破損及過期者不得使用。 2.用75%酒精消毒皮膚。
7、 3.應用一次性注射器,刻度和針孔斜面一致向上與皮膚平行刺入皮內(nèi),緩慢準確地注射0.1ml(含5U PPD)呈直徑約為6-10mm大小白色隆起,不要揉搓,會自行消退,不要用酒精棉球(簽)按壓針眼。,五、操作,4.干擾因素: a、光線:直接日光照射10分鐘,結素效價減少80%。1955年WHO曾做過這樣的研究,用光照射過的結素為接種卡介苗的學生做測定,同時設對照組。結果發(fā)現(xiàn)光照組90%以上反應減弱,較對照組相差最大達8mm。
8、 b、溫度:保存溫度偏高可使結核蛋白變性而降低效價,時間長了則結素會完全失效。 c、技術:注射劑量不足,未搖均勻,注射較深、驗看不仔細不熟練等。,1.時間:72小時。 2.方法:一看、二摸、三量??淳植坑袩o紅暈、雙圈、水泡等。對衣袖較緊者,擼起袖子時要稍等片刻再觀察,否則會誤為陰性。用手指上下、左右輕輕來回觸摸,不能擠捏,容易造成疼痛和假陽性。觸摸后用尺測量硬結邊緣,根據(jù)手臂的縱橫徑垂直交叉各測量一次,以毫米為單位記錄,如10
9、×12mm。 3.計算記錄硬結平均直徑:橫徑+縱徑/2。,六、觀察,4.結果標準: 我國現(xiàn)將結素試驗反應結果分為三類: 陰性:無硬結或硬結平均直徑<5mm; 陽性:硬結平均直徑5-19mm; 強陽性:硬結平均直徑≥15mm(成年人為20mm),或有雙圈、水泡、潰瘍、皮疹等。如無20 mm,但有雙圈、水泡、潰瘍、皮疹等也為強陽性。,結素試驗結果定性與定量之間的關系: “-” —— 硬結平均
10、直徑<5mm或無硬結; “+” —— 硬結平均直徑5-9mm; “++” —— 硬結平均直徑10-14mm; “+++” —— 硬結平均直徑15-19mm; “++++” —— 硬結平均直徑≥20mm,或有水泡等。,,,,,1.2-8℃冷藏,避光保存,不能直接放在冰上,不與其他藥物混放。 2.安瓿打開后1小時內(nèi)用完。 3.試驗應在室內(nèi)進行,避免陽光直射。 4.注射時
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