血液學(xué)檢驗緒論

1、血液學(xué)檢驗,檢驗教研室馬雪蓮,2016-1-10,中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院,血液病離我們遠嗎,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,緒 論,概論血液學(xué)（hematology）臨床血液學(xué)（clinical hematology）臨床血液學(xué)檢驗（hematologic laboratory science）,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,緒 論,概論一 血液學(xué)（hematology）： 研究對象：血液、造血組織 研究內(nèi)容

2、：,緒 論,概論二 臨床血液學(xué)： 研究對象： 血液病（原發(fā)、繼發(fā)）,病因、病機、臨床表現(xiàn)、診療,緒 論,緒 論,臨床科室---血液科,緒 論,概論 臨床血液學(xué)檢驗：,手段,基礎(chǔ),對象,緒 論,概論 臨床血液學(xué)檢驗：臨床血液學(xué)實驗室,緒 論,發(fā)展史 # 血液探索史： 中國 西方 # 血液學(xué)研究史

3、—-顯微鏡發(fā)明： 一. 血細胞 二. 血栓與止血 三. 造血干細胞 四. 血液學(xué)檢驗發(fā)展史,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,,緒 論,血液探索史,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,石器時代---砭石放血病,,公元前400年《

4、內(nèi)經(jīng)》---藏神主血脈， 刺絡(luò)放血,“滴血認親”,吸血強身,,公元前400年希波克拉底,公元500--1500)理發(fā)師用柳葉刀放血,16世紀末期--荷蘭人制作簡易顯微鏡,1628年哈維提出了血液循環(huán),1674年列文虎克觀察血液,1799年開國總統(tǒng)華盛頓---死于放血療法,1840年---維多利亞女王家族血友病,中國,西方,喬治·華盛頓--美國首任總統(tǒng)（1732～1799）,維多利亞女王（1819－1901）,哈維-英國科學(xué)家（

5、1578-1657）,緒 論,血液探索史我國古代：石器時代---砭石放血治病 公元前400年《內(nèi)經(jīng)》---“藏神”和“主血脈” ,刺絡(luò)放血 “滴血認親”西方： 早期曾崇拜，神秘血液---吸血強身 古希臘醫(yī)圣希波克拉底（公元前460年--前370年）--血在四種體液中占主導(dǎo)地位 中世紀（公元500---15

6、00)理發(fā)師用柳葉刀放血 16世紀末期--荷蘭人制作簡易顯微鏡， 1628年哈維提出了血液循環(huán) 1674年荷蘭亞麻商人安東尼·凡·列文虎克----血液由含有非常小的圓球狀物的水晶體般霧狀 的水組成，測量了它們的大小 1799年開國總統(tǒng)華盛頓---死于放血療法，20世紀逐漸淘汰 1840年---維多利亞女王的9子中，3/4男為血友病，5女為攜帶者----皇室遺傳病,,

7、概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,緒 論,血液研究發(fā)展史---顯微鏡發(fā)展,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,,16世紀末--簡易顯微鏡--放大幾十倍,19世紀--普通光學(xué)顯微鏡--分辨率1微米（放大率極限2000倍） 顯微結(jié)構(gòu),2個世紀,緒 論,血液研究發(fā)展史---顯微鏡發(fā)展,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,電子顯微鏡----分辨率10nm （放大率上萬倍）

8、 超微結(jié)構(gòu)（亞顯微結(jié)構(gòu)）,緒 論,血液研究發(fā)展史---顯微鏡發(fā)展,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,納米顯微鏡（掃描探針顯微鏡） 分辨率0.1nm （放大率百萬倍） 實現(xiàn)原子水平的觀察及操控----納米生物學(xué),掃描探針示意圖,納米顯微鏡照片,緒 論,血液研究發(fā)展史血細胞

9、發(fā)展史16世紀到17世紀--顯微鏡-----紅細胞、白細胞及血小板。19世紀--計數(shù)法的改善，紅細胞來源于骨髓及建立血細胞染色法---形態(tài)學(xué)階段。1900年--ABO血型確立---開創(chuàng)輸血領(lǐng)域。1945年--Coomb‘s建立抗人球蛋白試驗----對免疫血液學(xué)做出貢獻。1949年--鐮狀貧血是Hb異常而提出“分子病”----分子水平。,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,緒 論,1. 紅細胞認識,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,血細胞發(fā)展

10、史,1871-1876年----發(fā)現(xiàn)了紅細胞有攜氧能力，且參與組織的呼吸作用。 20世紀20年代----紅細胞體外保存需葡萄糖，30年代體外保存血液，40年代建立血庫 1946年----紅細胞壽命120天左右，1959年以后對紅細胞糖代謝全面了解。 20世紀80年代----A、B型轉(zhuǎn)化為O型血成功，Rh陽性轉(zhuǎn)換為Rh陰性。,緒 論,一.血細胞發(fā)展史2 白細胞認識1892-1930年---白細胞有趨化、吞噬和殺菌作用。1910

11、年---單核細胞為“打掃戰(zhàn)場的清道夫”，1976年之后稱之為“單核吞噬細胞系統(tǒng)”。1959年---淋巴細胞轉(zhuǎn)化為免疫母細胞并能分裂增殖，漿細胞是B淋巴細胞轉(zhuǎn)化。B淋巴細胞產(chǎn)生抗體，T淋巴細胞產(chǎn)生細胞因子。,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,白細胞,單核細胞,淋巴細胞分裂,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史---血細胞發(fā)展史 3 血小板認識1842年發(fā)現(xiàn)血小板，40年后了解到止血和修復(fù)血管作用，1923年發(fā)現(xiàn)其粘附和聚集功能。

12、血小板超微結(jié)構(gòu)研究近年發(fā)現(xiàn)血小板顆粒,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,二 血栓與止血的發(fā)展史 2000年以前，猶太人記載了血友病20世紀50年代后對凝血機制有了深入了解60年代凝血機制的“瀑布學(xué)說”得到公認70年代發(fā)現(xiàn)新的凝血與纖溶相關(guān)因子80年代開展對纖維連接蛋白等粘附因子的研究90年代至今，完善并拓寬“瀑布學(xué)說”，拓寬血栓與止血的研究領(lǐng)域。分子水平研究：對內(nèi)皮細胞、血小板、凝血和纖溶等在血栓中的作用從分子水平有

13、了更深入的了解。,發(fā)展史,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,1896年，Wilson在著作中用到“干細胞”1981年Evans和Martin從小鼠胚囊內(nèi)細胞團分離出胚胎干細胞,發(fā)展史 三 造血干細胞發(fā)展史,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史三 造血干細胞發(fā)展史 20世紀提出造血干細胞概念， 60年代初，Tills等用致死量射線照射

14、 小鼠進行骨髓移植，發(fā)現(xiàn)造血干細胞,,1984年，Civin提出表達CD34抗原細胞即造血干細胞。1979年，體外成功培養(yǎng)人造血祖細胞。1990年，造血干細胞移植治療遺傳病、白血病和再障。,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史三 造血干細胞發(fā)展史,干細胞(stem cell)是一類具有自我復(fù)制能力的多潛能細胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細胞。 胚胎干細胞 （ES細胞）

15、1 根據(jù)發(fā)育階段 成體干細胞 存在于成熟個體各組織中的干細胞 2 根據(jù)發(fā)育潛能 全能干細胞（TSC細胞）：胚胎干細胞 多能干細胞：造血干細胞，神經(jīng)干細胞 專能干細胞 ：肝臟干細胞，腸上皮干細胞,,,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史三 造血干細胞發(fā)展史,胚胎干細胞是早期胚胎中分離

16、出來的一類細胞，它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境，ES細胞都能被誘導(dǎo)分化為機體幾乎所有的細胞類型。,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,1 胚胎干細胞研究在美國頗具爭議,發(fā)展史三 造血干細胞發(fā)展史,2 美國科學(xué)家從成體動物提取成體干細胞，并不能轉(zhuǎn)化成各種器官組織，不能取代胚胎干細胞。3 iPS細胞是將多能遺傳基因?qū)肫つw等細胞中而成。讓普通體細胞“初始 化”具備干細胞功能即iPS細胞iPS細

17、胞和ES細胞除了不能生成胚胎以外，可以產(chǎn)生所有細胞，如用于醫(yī)療，那么理論上可以治愈所有疾病——凡是不好的組織去除，替換為重新生長的正常組織。,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,血細胞是造血干細胞增殖和分化的結(jié)果。不斷生成新細胞替代衰老退變細胞，維持體內(nèi)各類細胞恒定。,造血干細胞是由胚胎干細胞發(fā)展而來，具有高度自我更新和多向分化兩個基本特征,發(fā)展史三 造血干細胞發(fā)展史,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,四 血液學(xué)檢驗的發(fā)展史,發(fā)展史

18、,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史,四 血液學(xué)檢驗的發(fā)展史,1 無染色的血細胞形態(tài)學(xué)檢驗時期 （17世紀后期～19世紀中期）,1852-1867年，血細胞顯微鏡計數(shù)（包括血細胞吸管、血細胞計數(shù)板）,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史,四 血液學(xué)檢驗的發(fā)展史,2 染色的血細胞形態(tài)學(xué)檢驗時期（19世紀中期起),1856年，Erb用某些合成染料染血液1879年，Ehrlich(德國細菌學(xué)家歐立希）用紡織染料染色固定血涂片

19、1898年，Ehrlich等報告三酸染色法（橘黃G、甲基綠及酸性品紅組成的混合染色液）1891年，Romanowsky（羅曼若夫斯基）用改良的甲基藍混合染色液鑒定瘧原蟲，并可區(qū)分不同的白細胞1902年, Wright,Giemsa改進染色劑Romanowsky型混合物染色劑具有良好的染色效果，直到現(xiàn)在其基本配方仍被廣泛使用，這一混合染色劑由甲基藍、伊紅和天青組成，依據(jù)染色后細胞的大小、形狀及色彩深淺進行鑒別,緒 論,,概論,發(fā)展史

20、,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史,四 血液學(xué)檢驗的發(fā)展史,2 染色的血細胞形態(tài)學(xué)檢驗時期（19世紀中期起),緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史,四 血液學(xué)檢驗的發(fā)展史,3 骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢驗時期（20世紀20年代起）,1903年，Wolff首創(chuàng)骨髓穿刺術(shù)，用于動物實驗。同年，Pianess應(yīng)用于人體1929年，Arinkin用改進的簡便胸骨穿刺吸引法，在住院病人身上獲取胸骨骨髓涂片，為骨髓檢查奠定了基礎(chǔ),緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系

21、,發(fā)展史,四 血液學(xué)檢驗的發(fā)展史,4 骨髓組織學(xué)檢驗時期（20世紀20年代--70年代進入快速發(fā)展時期）,① 骨髓病理組織學(xué)研究與骨髓抽吸物涂片檢查幾乎同時起步② 20世紀70年代起，骨髓活組織工具改良以及新技術(shù)應(yīng)用，特別是不脫鈣組織塊塑料包埋半薄切片技術(shù)的應(yīng)用，使骨髓病理組織學(xué)檢查快速發(fā)展,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史,四 血液學(xué)檢驗的發(fā)展史,5 細胞化學(xué)染色檢驗時期（20世紀初起,50～70年代為鼎盛時期）,1867

22、年，鐵的普魯士藍染色法，后被應(yīng)用于骨髓鐵染色1909年，過氧化物酶染色,瑞士吉姆薩染色 鐵染色 POX染色,緒 論,概論,發(fā)展史,與臨床關(guān)系,發(fā)展史,5 細胞化學(xué)染色檢驗時期（20世紀初起,50～70年代為鼎盛時期）,1939年，蘇丹黑B染色1939年，1955年，中性粒細胞堿性磷酸酶染色1960年，過碘酸

23、雪夫反應(yīng)1953年～1977年，各種酯酶染色,急性粒細胞白血?。∕2a）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色,中性粒細胞堿性磷酸酶染色,正常血細胞PAS染色,1.原始粒細胞，呈弱陽性；2.幼稚粒細胞，呈強陽性；3.中性桿狀核粒細胞，呈強陽性,緒 論,,概論,發(fā)展史,與臨床關(guān)系,發(fā)展史,四 血液學(xué)檢驗的發(fā)展史,6 細胞免疫學(xué)檢驗時期（20世紀50年代起，80年代進入快速發(fā)展時期）,20世紀40-70年代，免疫熒光標記技術(shù),免疫酶標技術(shù),ELIS

24、A技術(shù)…,20世紀80年代，統(tǒng)一命名白細胞分化抗原（CD）、白血病免疫表型分析,7 細胞遺傳學(xué)檢驗時期（20世紀50年代起,80年代進入快速發(fā)展時期）,20世紀40年代，腫瘤細胞的染色體理論20世紀50年代，確認人類染色體46條，標志著人類細胞遺傳學(xué)開始20世紀60年代，慢?；颊叩陌籽〖毎邪l(fā)現(xiàn)Ph染色體，第一次將染色體異常與特定腫瘤類型聯(lián)系在一起，是腫瘤細胞遺傳學(xué)史上里程碑20世紀70～80年代，白血病細胞遺傳學(xué)表型與形態(tài)學(xué)類

25、型與臨床治療和預(yù)后，腫瘤的生物學(xué)有關(guān),緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史,四 血液學(xué)檢驗的發(fā)展史,8 分子生物學(xué)及基因檢驗時期（20世紀80年代起，90年代進入快速發(fā)展期）,1983年，BCR-ABL融合基因20世紀90年代，分子血液學(xué)時代，應(yīng)用分子生物學(xué)的思維，評估患者預(yù)后，個體化治療等,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,發(fā)展史,1930年，卡爾·蘭德斯坦納(Karl·Landsteiner) （美籍奧

26、地利人），發(fā)現(xiàn)ABO血型 為輸血、器官移植、胎母不相容和親子鑒定的理論基礎(chǔ)。 蘭德斯坦納生日——6月14日定 為 “世界獻血者日”,The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1930,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,2. J.E.Murray默里（美國人）和E.D. Thomas托馬斯（美國人） ------"for their discoveries conc

27、erning organ and cell transplantation in the treatment of human disease",Joseph E. Murray,E. Donnall Thomas,The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1990,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,鄧家棟 (1906～2004) 我國血液學(xué)創(chuàng)始人之一、著名血液學(xué)家、醫(yī)學(xué)教育

28、家；主持建立中國第一個輸血及血液學(xué)研究所--天津輸血及血液研究所；重視醫(yī)學(xué)教育，參與恢復(fù)八年制的醫(yī)學(xué)教育。主編《鄧家棟臨床血液學(xué)》、《內(nèi)科學(xué)基礎(chǔ)》、《診斷學(xué)基礎(chǔ)》、《臨床血液學(xué)》等。,中國血液學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的著名專家,王振義（1924.11.30- ）內(nèi)科血液學(xué)專家，中國工程院院士，法國科學(xué)院外籍院士，瑞金醫(yī)院終身教授。國內(nèi)血栓與止血專業(yè)的開創(chuàng)者之一，其主編的《血栓與止血－－基礎(chǔ)與臨床》在醫(yī)學(xué)上的最主要貢獻還有首次利用全反式維甲酸誘導(dǎo)急性

29、早幼粒細胞白血病細胞分化。,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,陳竺（1953.8- ）1995年至2007年任上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院上海血液學(xué)研究所所長1998年5月起任國家人類基因組南方研究中心主任2000年至2007年任中國科學(xué)院副院長2007年6月起任衛(wèi)生部部長（至2013年3月）2013年3月14日，當(dāng)選全國人大常委會副委員長,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,陳竺在血液學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)

30、域有較高造詣，取得了突破性成果，曾獲得法國抗癌聯(lián)盟盧瓦茲獎、國家科技進步二等獎等多個獎項，是第三世界科學(xué)院院士、歐洲科學(xué)院外籍院士、美國科學(xué)院外籍院士、法國科學(xué)院院士 1.上世紀80年代，從分子水平上揭示了全反式維甲酸治療早幼粒白血病的原理，在國際上填補了白血病研究的空白點 2.在世界上首次闡明三氧化二砷（砒霜）

31、治療白血病的分子機理,緒 論,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,陳賽娟（1951.5.21- ） 遺傳學(xué)專家。工程院院士，現(xiàn)任上海交大醫(yī)國家重點實驗室主任、瑞金醫(yī)院血研所執(zhí)行所長等。主要從事白血病遺傳學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)一組新染色體易位的白血病，建成和發(fā)展了一整套白血病分子遺傳學(xué)和分子生物學(xué)診斷體系；建立了移植性和轉(zhuǎn)基因白血病動物模型，為從細胞和整體動物水平研究白血病發(fā)生的分子機制及白血病誘導(dǎo)分化的機制提供了良好的模型,,概論,發(fā)展史,與檢驗

32、關(guān)系,緒 論,臨床血液學(xué)與檢驗的關(guān)系,(一) 血液學(xué)與臨床,一 血液系統(tǒng)疾病的分類及特點,,分類,原發(fā)血液病,繼發(fā)血液病,原發(fā)于血液和造血組織的，并以血液學(xué)異常為主要表現(xiàn)的疾病，多有其獨特的血液學(xué)發(fā)病機制和臨床表現(xiàn),他器官或組織的病變，通過某些機制累及血液和造血組織而出現(xiàn)血液異常，其轉(zhuǎn)歸常取決于原發(fā)疾患。,特點 血液病的代表性癥狀和體征往往缺乏特異性 實驗室檢查在血液病的診斷中占有突出地位 非血液病可同時合并血液病

33、 繼發(fā)血液學(xué)異常相當(dāng)多見 血液病常具有非血液病表現(xiàn)的臨床特征,研究血液病起點是細胞學(xué)水平，因此血液病診斷更依賴實驗室檢查，從某種意義上說，實驗室檢查是血液病確診的關(guān)鍵，所以形成了醫(yī)學(xué)檢驗與臨床血液學(xué)的交叉學(xué)科－臨床血液學(xué)檢驗,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,緒 論,二 非血病合并血液異常 紅細胞增高---氧交換困難的呼吸系統(tǒng)疾病，某些腫瘤，如小腦腫瘤、腎腫瘤 貧血---消化系統(tǒng)疾病、腎功衰竭、肝炎、自身免疫病、腫瘤 白細

34、胞增高--感染，甚至出現(xiàn)類白血病反應(yīng) 白細胞減少---傷寒桿菌，病毒感染，用化療藥或解熱鎮(zhèn)痛藥 出血---肝疾病、腎功能衰竭,臨床血液學(xué)與檢驗的關(guān)系,(一)血液學(xué)與臨床的關(guān)系,三 血液病具有非血液病的臨床特征,巨幼細胞貧血--神經(jīng)科、消化科血友病--口腔科、骨科骨髓瘤--腎內(nèi)科、骨科巨球蛋白血癥—眼底檢查,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,緒 論,(二) 血液學(xué)檢驗,臨床血液學(xué)與檢驗的關(guān)系,一 血檢任務(wù) 利用血細胞檢驗技術(shù)，

35、對血液疾病進行基礎(chǔ)研究和臨床診治， 推動和促進血液學(xué)和臨床血液學(xué)的發(fā)展。,二 檢驗醫(yī)師責(zé)任 1 掌握血液病的診斷及病情監(jiān)測的實驗， 2 具有一定程度血液病的臨床知識，對疾病作出診斷的能力 3 適應(yīng)血液學(xué)的發(fā)展，建立有關(guān)新試驗，能從事科研的能力。,,,,,概論,發(fā)展史,與檢驗關(guān)系,緒 論,本次課小結(jié),,血液學(xué)臨床血液學(xué)臨床血液學(xué)檢驗,一 血細胞發(fā)展史,,二 血栓與止血的發(fā)展史,三 造血干細胞發(fā)展史,四 血液學(xué)檢驗發(fā)展史,

36、,血液學(xué)與臨床,血液學(xué)檢驗,掌握,了解,了解,,緒 論,,小測驗：一 選擇題1 血液學(xué)的主要研究對象（） A 血液病 B 造血干細胞及造血細胞 C 血液及造血組織 D 造血器官 2 下列不屬于臨床血液學(xué)研究內(nèi)容的是（） A 淋巴細胞的發(fā)育分化 B 白血病治療 C 血管栓塞的病因 D外傷，手術(shù)造成的血液異常二