高同型半胱氨

1、1,同型半胱氨酸的檢測(cè)及臨床應(yīng)用,2024/3/5,2,前 言,同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）是一種人體內(nèi)的含硫氨基酸，為蛋氨酸和半胱氨酸代謝過(guò)程中的重要中間產(chǎn)物。新熱點(diǎn):許多學(xué)者認(rèn)為血液Hcy升高已成為動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因子，也成為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究的新熱點(diǎn)。新理念:伴有血漿Hcy升高(>10umol/L)的原發(fā)性高血壓定義為H型高血壓。,2,2024/3/5,3,,,同型半胱氨酸（H

2、cy）能夠讓四分之三的高血壓患者腦卒中死亡風(fēng)險(xiǎn)增加12倍。,3,2024/3/5,4,一、Hcy的存在形式,有研究發(fā)現(xiàn)在正常人和高Hcy血癥患者血漿中，Hcy大部分（70％）是與蛋白質(zhì)結(jié)合，血漿中與Hcy結(jié)合的是白蛋白。Hcy在血液中的存在方式: 部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以還原型同型半胱氨酸存在，大部分通過(guò)二硫鍵與白蛋白結(jié)合而存在。,4,2024/3/5,5,二、影響血液Hcy水平的因素,1、遺傳因素： 

3、; ①C667T點(diǎn)突變可引起Hcy升高。 ②CBS基因多態(tài)性。 ③蛋氨酸合成酶基因多態(tài)性。,5,2024/3/5,6,2、性別與年齡： 國(guó)內(nèi)外不少研究發(fā)現(xiàn)，Hcy隨年齡增長(zhǎng)而升高，而且男性>女性。女性在絕經(jīng)前的水平較低，絕經(jīng)后顯著升高，認(rèn)為其機(jī)制可能與雌激素水平的變化有關(guān)。,6,2024/3/5,7,3、營(yíng)養(yǎng)因素：   ①VitB6、VitB12、葉酸是Hcy代謝輔酶，它們的水平與

4、Hcy水平呈負(fù)相關(guān)，攝入不足時(shí)，上述三個(gè)酶活性下降，則Hcy升高。 ②飲酒：長(zhǎng)期飲酒可引起肝細(xì)胞蛋氨酸合成酶活性下降，從而造成Hcy血癥。 ③飲食中蛋氨酸含量過(guò)高：有報(bào)道認(rèn)為高動(dòng)物蛋白、低植物蛋白飲食可能是Hcy血癥的危險(xiǎn)因素之一。,7,2024/3/5,8,三、同型半胱氨酸致病機(jī)理,1、內(nèi)皮毒性作用： Hcy可引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷，尤其合并高血壓時(shí)更易受損，并且破壞血管壁彈力層和膠原纖維。2、刺激血管平滑肌細(xì)胞增

5、生： Hcy可直接誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞增殖。,8,2024/3/5,9,3、致血栓作用： Hcy可促進(jìn)血栓調(diào)節(jié)因子的表達(dá)，激活蛋白C和凝血因子Ⅻ、Ⅴ，血小板內(nèi)前列腺素合成增加，從而促進(jìn)血小板粘附和聚集。,9,2024/3/5,10,Hcy通過(guò)多種途徑損傷血管，它損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞同時(shí)刺激血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)，二者導(dǎo)致的損傷阻塞血流通路；Hcy還破壞正常凝血機(jī)制；增加血栓形成引起心臟病發(fā)作及中風(fēng) 。,10,2024/3/5,11,4、

6、脂肪、糖、蛋白代謝紊亂：　 Hcy可促進(jìn)脂質(zhì)沉積于動(dòng)脈壁，泡沫細(xì)胞增加，還可改變動(dòng)脈壁糖蛋白分子纖維化結(jié)構(gòu)，促進(jìn)斑塊鈣化。,11,2024/3/5,12,5、干擾谷胱甘肽的合成 ： 谷胱甘肽是一種重要的高氧化劑，它能防止很多細(xì)胞成分的氧化互相作用，對(duì)血管產(chǎn)生保護(hù)作用。Hcy干擾谷胱甘肽的合成，從而對(duì)機(jī)體造成危害 。,12,2024/3/5,13,6、影響體內(nèi)的轉(zhuǎn)甲基化反應(yīng) ： Hcy濃度的升高會(huì)影響體內(nèi)許多物質(zhì)的甲基化過(guò)程

7、，如核酸（DNA和RNA）、蛋白質(zhì)、髓磷脂、多糖、膽堿和兒茶酚胺類的甲基化；甲基化能力的降低影響細(xì)胞的發(fā)育及分化，這可能是Hcy致病的關(guān)鍵因素。,13,2024/3/5,14,四、Hcy的測(cè)定方法,同位素法：該方法靈敏度高，特異性強(qiáng)，但操作繁瑣且有放射污染，未能推廣使用。色譜法：靈敏度、特異性好，但儀器價(jià)格昂貴而不能推廣。 熒光偏振免疫測(cè)定：此法需要專門的熒光偏光免疫檢測(cè)儀。,14,2024/3/5,15,ELISA：對(duì)儀器要求不高

8、，易普及，但結(jié)果準(zhǔn)確性相對(duì)較差。放射免疫法：結(jié)果準(zhǔn)確，但有放射性污染，很少使用。循環(huán)酶法：快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高。可上全自動(dòng)生化分析儀，適用大批標(biāo)本，臨床應(yīng)用廣泛。,15,2024/3/5,16,Hcy循環(huán)酶法實(shí)驗(yàn)參數(shù)的設(shè)計(jì),實(shí)驗(yàn)參數(shù)根據(jù)分析儀的不同有所差異，可要求試劑供應(yīng)商提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)參數(shù)。下面列舉OLYMPUS系列的實(shí)驗(yàn)參數(shù)： Sample Volume（樣品體積）： 9ul R1 Volume

9、（試劑1體積）：167ul R2 Volume （試劑2體積）： 45ul Measure Wave1（主波長(zhǎng)） ：340nm Measure Wave2（副波長(zhǎng)） ：700nm,16,2024/3/5,17,METHOD （反應(yīng)類型） ： END Method Point（反應(yīng)點(diǎn)）： 20~27Reagent OD Limit（吸光度范圍）：-2.0~2.5Dyn

10、amic Range (反應(yīng)范圍)： 3~50Calibration Type （定標(biāo)數(shù)）： 1點(diǎn)Unit （單位）： umol/L,17,2024/3/5,18,五、同型半胱氨酸的臨床應(yīng)用,18,2024/3/5,19,1、心血管病防治,（1）HCY升高與動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的關(guān)系： 1969年就曾有人從尸檢中發(fā)現(xiàn)2例血漿Hcy濃度超過(guò)正常人幾十倍的病兒存在廣泛

11、的動(dòng)脈粥樣硬化和動(dòng)脈血栓。臨床上發(fā)現(xiàn)高胱氨酸尿癥病人早年多因全身動(dòng)脈粥樣硬化和血栓形成死于腦梗塞和心肌梗塞，這與血中Hcy升高有關(guān)。,19,2024/3/5,20,有學(xué)者在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中觀察到注射Hcy后引起高Hcy血癥，2—3個(gè)月后發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化 。認(rèn)為高Hcy血癥是發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。,20,2024/3/5,21,（3）Hcy水平與心血管疾病的危險(xiǎn)性  通過(guò)血管內(nèi)超聲觀察AS斑塊情況 ，觀察到血漿HCY

12、 濃度 8umol/L時(shí)，斑塊明顯增大（0.27-1.04，p<0.001）,表明與冠狀動(dòng)脈病變程度呈正相關(guān)。,* Mayer E L, Robinson K, Jacobsen D W. et al .Low plasm homocyseine levels predic reduced atheroma burden in patient undergoing coronary intervention:

13、Evideence from intravascular ultrsund.J Am Coll Cardiol,1995,25(special issum):81 A.,24,2024/3/5,22,,,惠汝太教授等的研究結(jié)果顯示： 冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)隨著血漿Hcy濃度增高而增加。,25,2024/3/5,23,有研究表明： 輕度、中度Hcy水平升高可使心血管疾病死亡危險(xiǎn)性增加4 ~6倍，血漿總Hcy水平每升

14、高5 μmol/L則CHD危險(xiǎn)性男性增加60%，女性增加80%。,* Arnesen E,Refsum H,Bonaa K H,et al.Serum total homocysteine and coronary heart disease［J］. Int J Epidemiol,1995,24(4):704-709.,26,2024/3/5,24,美國(guó)專家在Framingham心臟病研究項(xiàng)目中發(fā)現(xiàn)，Hcy與心力衰竭的相關(guān)性更為密切

15、，對(duì)尚未出現(xiàn)心臟病癥狀者來(lái)說(shuō)，Hcy升高者患心力衰竭的危險(xiǎn)可加倍，婦女的危險(xiǎn)可增加3倍。,27,2024/3/5,25,2、HCY與神經(jīng)系統(tǒng)疾病,腦血管病是目前嚴(yán)重危害人類健康的主要疾病，近年來(lái)隨著分子生物學(xué)的深入發(fā)展，Hcy在腦卒中的作用日益受到重視，普遍認(rèn)為血漿Hcy>15umol／L為高Hcy血癥，普通人群血漿Hey水平升高者只有不到5％ ，而在腦卒中患者中可達(dá)30~40％ 。,28,2024/3/5,26,美國(guó)研究表明：

16、 Hcy的升高是與中風(fēng)有重要關(guān)聯(lián)的危險(xiǎn)因子。美國(guó)最新的數(shù)據(jù)顯示中年后期男性中風(fēng)發(fā)病率，處于55-64這個(gè)年齡段的男性相對(duì)于45-54年齡段的男性而言，前者患中風(fēng)的幾率是后者的三倍?！吨酗L(fēng)和腦血管疾病》雜志2008；17；165-168“美國(guó)中年后期的男性發(fā)生中風(fēng)的相關(guān)因子急劇增加”,29,2024/3/5,27,惠汝太教授等的研究結(jié)果顯示:隨著Hcy濃度增高，腦中風(fēng)危險(xiǎn)度增加1.87倍。,30,2024/3/5,28,高HCY是

17、造成老年癡呆癥與帕金森的重要因素：弗明漢醫(yī)學(xué)研究中心對(duì)1092例（>76歲）追蹤調(diào)查8年Hcy值，結(jié)果：Hcy超出14μmol/L，患老年性癡呆的危險(xiǎn)性增加1.8倍，患多異古怪癡呆發(fā)生率增加1.6倍。英國(guó)OPTIMA項(xiàng)目研究發(fā)現(xiàn)： Hcy水平大于11.2μmol/L的病人，三年后隨訪，發(fā)現(xiàn)他們大腦顳葉（包括海馬）快速萎縮。,31,2024/3/5,29,3、糖尿病及并發(fā)癥防治,國(guó)內(nèi)外大量研究結(jié)果顯示，血漿Hcy水平可作為2-型

18、糖尿病患者患大血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。監(jiān)測(cè)糖尿病患者Hcy水平有利于對(duì)其預(yù)后的評(píng)估。Hcy升高在糖尿病伴腎臟、視網(wǎng)膜及血管并發(fā)癥的患者更為嚴(yán)重高Hcy血癥也能促進(jìn)糖尿病微血管并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展。,32,2024/3/5,30,4、CRF并發(fā)癥防治,慢性腎功能衰竭（CRF）患者普遍有高Hcy血癥，其發(fā)生率是正常人33倍。尿毒癥時(shí)一方面肝臟蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶活性升高，導(dǎo)致S-腺苷蛋氨酸水平升高；另一方面腎功能下降使Hcy代謝的必需產(chǎn)物—

19、—絲氨酸合成減少，導(dǎo)致Hcy代謝受抑制引起Hcy的堆積。,33,2024/3/5,31,5、肺血栓栓塞癥防治,研究表明，高Hcy血癥（>20μmol/L）使得深靜脈血栓的危險(xiǎn)性明顯增大，高Hcy血癥可使深靜脈血栓發(fā)生率增加4倍。高Hcy是我國(guó)漢族人群肺血栓栓塞癥（PTE）發(fā)病的一個(gè)獨(dú)立的危險(xiǎn)因子，降低Hcy可降低國(guó)人靜脈血栓栓塞癥（VTE）的危險(xiǎn)。,34,2024/3/5,32,6、預(yù)測(cè)骨折風(fēng)險(xiǎn),美國(guó)和荷蘭的流行病學(xué)研究結(jié)果顯示

20、：高Hcy的人容易骨折，高Hcy組與低Hcy組相比，男性的骨折風(fēng)險(xiǎn)為后者的4倍，女性為1.9倍。研究還顯示：老年人骨折中19%是由高Hcy引起的。Hcy阻礙骨膠原纖維狀蛋白質(zhì)形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的作用可能就是高Hcy者容易骨折的原因。,35,2024/3/5,33,7、診斷與監(jiān)測(cè)肝損傷,研究結(jié)果顯示：血漿Hcy濃度在急性肝病和慢性肝病患者間差異有顯著性；血漿Hcy濃度對(duì)于慢性肝損傷的敏感性為91%，特異性為89%。以病理組織切片對(duì)照敏感性

21、為94%，特異性為89%。血漿Hcy濃度檢測(cè)還可應(yīng)用于對(duì)普通人群慢性肝病的篩選。,36,2024/3/5,34,8、優(yōu)生優(yōu)育與母嬰健康,流行病學(xué)研究報(bào)導(dǎo)：血中Hcy值高的婦女容易產(chǎn)生妊娠并發(fā)癥 (32%)；早產(chǎn) (38%)；新生兒體重減低 (> 99%)。孕婦檢測(cè)Hcy對(duì)防治妊娠并發(fā)癥與優(yōu)生優(yōu)育（預(yù)防早產(chǎn)、流產(chǎn)、新生兒體重減低、胎兒神經(jīng)管畸型等）具有重要意義。,37,2024/3/5,35,9、腫瘤防治,有研究發(fā)現(xiàn)：未服抗葉酸

22、藥物的乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌中有許多患者的血清Hcy升高。Ueland和Refsum在白血病患者的研究認(rèn)為Hcy升高是因腫瘤細(xì)胞的快速增殖所致。許多惡性腫瘤細(xì)胞有對(duì)蛋氨酸的依賴性，蛋氨酸的依賴或高Hcy血癥可能是惡性腫瘤一種表型的表達(dá)。,38,2024/3/5,36,Lily L等在一組未用藥的腫瘤患者中將Hcy濃度與主要的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)Hcy血清濃度的變化與血清腫瘤標(biāo)志物CA125、CA15-3、CA19-9及CEA的

23、變化是平行的。這提示血清Hcy與腫瘤標(biāo)記物一樣反應(yīng)腫瘤細(xì)胞的活性或腫瘤細(xì)胞的快速增生狀況。,39,2024/3/5,37,什么樣的人需要做HCY檢查？,①已有CHD、腦血管病或周圍AS病者；②有高血壓、糖尿病、肥胖、吸煙者；③有CHD或AS家族史者，尤其是直系親屬中有早發(fā)病或早病死者；④有黃瘤或黃疣者； ⑤有家族性高脂血癥者；⑥40歲以上男性及絕經(jīng)期后女性。,40,2024/3/5,38,六、血標(biāo)本采集注意事項(xiàng),樣品為

24、血清或血漿，空腹 8h以上，采血后1h之內(nèi)離心分離, 置干凈試管中保存。樣本穩(wěn)定性： 室溫 ：2-7天；2-8℃ ：14天； -20℃ ：幾年。樣品不宜反復(fù)凍融 。血紅蛋白,膽紅素,甘油三脂等對(duì) Hcy 結(jié)果干擾小。,41,2024/3/5,39,七、Hcy參考值,空腹血漿總Hcy水平正常值為5~15umol/L理想值<10umol/L 高于15umol/L被認(rèn)為是高Hcy血癥 將高Hcy分為輕、中、重度，其空腹

25、血漿濃度分別為15~30、31~100及大于100umol/L,42,2024/3/5,40,八、高Hcy血癥的預(yù)防及治療,可預(yù)防及治療高Hcy血癥的藥物：葉酸維生素B6維生素B12甜菜堿依那普利葉酸片（依葉片）依那普利葉酸片——是治療H型高血壓和我國(guó)預(yù)防腦卒中的新思路。,43,2024/3/5,41,結(jié) 語(yǔ),Hcy作為獨(dú)立的心血管風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)已被廣泛接受，中國(guó)高血壓人群75%為H型高血壓。高Hcy是腦卒中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。