影響血液凝固的因素

1、影響血液凝固的因素,【實驗目的】 觀察某些因素對血液凝固的影響 【實驗原理】 血液凝固過程中必須較多因子的參與，因此血液凝固受許多因素的影響，除凝血因子可直接影響血凝過程外，血凝還受接觸面、溫度等影響。,血液凝固(blood coagulation),概念：血液從流動的溶膠狀態(tài)轉變成不能流動的凝膠狀態(tài)的過程 本質：可溶的纖維蛋白原變?yōu)椴蝗艿睦w維蛋白并交織成網(wǎng)，網(wǎng)羅血細胞等成分形成凝血塊。,,,

2、血液的凝固是由一系列凝血因子參與的復雜的蛋白質酶解過程,凝血因子(coagulation factor),凝血因子是無活性酶原，有限水解才具活性。除Ⅳ因子(Ga2＋)外其余多為蛋白質，在肝合成，其中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的合成必須有VitK參與。Ⅲ存在于組織中，其它因子均在血漿中。Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ都是絲氨酸蛋白酶，能對特定肽鏈有限水解。Ⅲ、Ⅴ、Ⅷ在反應中起輔因子的作用，可使相應絲氨酸蛋白酶凝血因子的催化速率增快上萬倍。不能從腎小

3、球濾過，降解和失活在肝臟完成。,凝血因子,內(nèi)源性激活途徑（Ⅻ）,外源性激活途徑（Ⅲ）,,凝血酶原激活物,凝血酶原,凝血酶,,,,,纖維蛋白原,纖維蛋白,血液凝固的過程,表面激活,,,,,,,外源性凝血途徑在凝血的啟動中起關鍵作用，組織因子是凝血反應過程的啟動物。,“截短的”內(nèi)源性凝血途徑在放大階段對凝血反應開始后的維持和鞏固起重要作用。,血漿和血清：,血清中缺乏凝血因子和纖維蛋白原，但增加了少量凝血過程中血管內(nèi)皮和血小板釋放的物質。

4、,血液凝固的控制,2.血液的稀釋、纖維蛋白吸附及單核巨嗜細胞的吞噬作用,1.血管內(nèi)皮抗凝作用,3.生理性抗凝物質,絲氨酸蛋白酶抑制物蛋白質C系統(tǒng)組織因子途徑抑制物（TFPI） 肝素,纖維蛋白的溶解,纖溶系統(tǒng)：纖維蛋白(原)在纖維蛋白溶解酶的作用下降解為纖維蛋白降解物(FDP)而分解液化的過程。,纖溶生理意義：,①保持血流通暢，血液處于流動狀態(tài)②維持血管正常通透性③維持血液凝固與纖溶的動態(tài)平衡,纖溶的兩個基本階段：纖溶酶原的激活

5、；纖維蛋白(纖維蛋白原)的降解,纖溶酶原,纖溶酶,纖維蛋白(原),纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物,,,纖溶酶原激活物,,,,,纖溶酶原激活物抑制劑,纖溶酶抑制劑,纖溶酶原激活物,,組織型纖溶酶原激活物(t-PA)：血管內(nèi)皮合成，發(fā)揮局部溶栓作用，保持血流通暢。,尿激酶型纖溶酶原激活物：腎小管、集合管產(chǎn)生，在組織修復、傷口愈合過程中，血管外促進纖溶。,纖溶酶原的激活：,注意：（1）凝血是一個正反饋機制，一旦啟動，必迅速完成全過程。（2）

6、Ca2+在多個環(huán)節(jié)起作用，因此控制Ca2+就能控制血凝。（3）血凝過程是流水線，阻斷其中一步，則凝血過程必終止。,【實驗對象】 家兔【實驗器材與藥品】 哺乳動物實驗手術器械一套、20ml注射器1副、小燒杯2個、竹簽、清潔小試管6支、水浴裝置一套、冰塊、棉花、石蠟油、滴管、肝素、草酸鉀、0.025mol/LCaCl2溶液、肺組織浸液、富血小板血漿、少血小板血漿、生理鹽水,【實驗步驟和觀察項目】

7、 1.麻醉：1.5%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉，劑量2ml/kg體重 2.固定、備皮 氣管插管 3. 手術 頸總動脈插管。,,4.做好準備工作：按下2表做好各試管的準備、人員分工、計時等。 表一 影響血凝的理化因素 實驗條件          

8、0;   凝血所需時間加棉花少許 用石蠟油潤滑試管表面保溫于37℃水浴糟中   放置于冰浴糟中加肝素8單位(加血后搖勻) 加草酸鉀1～2mg(加血后搖勻),,,,5.取血：打開動脈夾，經(jīng)頸動脈插管放血入各試管，每支試管各采血約1.5ml(一定要一次性采血完畢，多次放血可能會出現(xiàn)血液凝固于插管內(nèi)而不能再放血)，注意及時計時并將各試管盡快置于其實驗條件下，如搖勻、放入溫浴槽、冰浴槽內(nèi)等。

9、,6.實驗觀察 每隔30s將各試管輕輕傾斜一次，觀察其中的血液是否已凝固，發(fā)現(xiàn)其中的血液已呈凝膠狀而不再流動時記錄其時間，最后計算出各試管血液凝固所需的時間(在本實驗條件下，如超過30分鐘血液仍未凝則視為“不凝”)。,觀察內(nèi)源性凝血、外源性凝血過程以及血小板對血液凝固的影響，取干潔小試管3支，按表1-1 加入各種成分，搖勻，最后再加入0.025mol/CaCl2溶液并同時開始計時，靜置，第一管、第二管每15s傾斜

10、一次， 第三管每隔5s傾斜一次，觀察器中的血漿已不能流動即已完全凝固，并分別記錄三個試管的血漿凝固時間。表二 內(nèi)源性和外源性凝血的觀察 試劑              試管號 1 2 3 富血小板血漿

11、(ml)       0.2  少血小板血漿ml)                 0.2        0.2  

12、 生理鹽水 (ml)         0.2      0.2     肺組織浸液(ml)              &

13、#160;                 0.2  0.025mol/LCaCl2溶液   0.2   0.2        0.

14、2  血漿凝固時間,,,,,【分析討論】 1.表一： (1)比較第一管（放棉花管）與第二管（石蠟油潤滑管）內(nèi)血液凝固的速度，并分析產(chǎn)生區(qū)別的原因。 (2)比較第三管（37℃管）與第四管（冰浴管）內(nèi)血液凝固的速度，并分析產(chǎn)生區(qū)別的原因。 (3)分析第五管與第六管內(nèi)血凝方面發(fā)生變化的原因。,表二： 1.纖維蛋白原在凝血過程中有何作用？ 2.血小板在凝血過程中有何作用？