糞菌移植的臨床應用

1、糞菌移植,能治大病的-----“民間偏方”,內(nèi)容提要,腸道菌群分布特點及功能糞菌移植定義及發(fā)展史糞菌移植適應癥糞菌移植的方法糞菌移植的安全性及效果評估糞菌移植展望,腸道菌群分布特點,,,,黏膜深層：類桿菌、消化鏈球菌、韋榮球菌和優(yōu)桿菌,黏膜表層：大腸桿菌和腸球菌,,黏膜中層：雙歧桿菌和厭 氧乳桿菌,,腸道菌群分布特點,腸道菌群功能,腸道菌群在調(diào)節(jié)代謝、調(diào)控炎癥、調(diào)控腸道上皮發(fā)育、誘導先天性免疫、參與物質(zhì)代謝等方面發(fā)揮重要作用

2、腸道菌群紊亂與感染性疾病、免疫性疾病和代謝性疾病的發(fā)生和發(fā)展具有密切的關(guān)系重建腸道菌群主要有三種途徑：抗生素、益生菌和FMT,內(nèi)容提要,腸道菌群分布特點及功能糞菌移植定義及發(fā)展史糞菌移植適應癥糞菌移植的方法糞菌移植的安全性及效果評估糞菌移植展望,糞菌移植定義,糞菌移植（Fecal Microbiota Transplantation，F(xiàn)MT）：是從健康人糞便中分離功能菌群，然后移植到患者消化道，通過重建患者腸道菌群而實現(xiàn)對疾

3、病的治療2012年，Borody and Khoruts將糞菌移植定義為一種特殊的器官移植,Borody TJ，et al. Nat Rev Gastroenterol Hepatol,2012,9(2):88-96,糞菌移植發(fā)展史,起源在中醫(yī)東晉（317~420年）時期，葛洪著《肘后備急方》記載用新鮮的糞汁或發(fā)酵的糞水治?。骸帮嫾S汁一升，即活?！?明代李時珍所著的《本草綱目》記載了多達二十多種用人糞治病的療方用來治療嚴重腹瀉、發(fā)

4、熱、腹痛、嘔吐等,糞菌移植發(fā)展史,發(fā)展在西醫(yī)1958年美國外科醫(yī)生Ben Eiseman等首次報導FMT治療嚴重偽膜性腸炎1983年FMT治療難辨梭狀芽孢桿菌感染（Clostridium Difficile Infection，CDI)1989年，Borody用以治療慢性便秘、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病目前，全球范圍內(nèi)共治療500例CDI病例，成功率高達90%以上由于全球CDI的挑戰(zhàn)，胃腸道微生物復雜性在健康中和和預防疾病的作用凸

5、現(xiàn)，糞菌移植引起了極大的關(guān)注2012年7月《美國胃腸病學雜志》重點推薦了Brandt等最新應用糞菌移植治療難辨梭狀芽孢桿菌感染多中心研究結(jié)果，成功率高達98%，其中91%的患者通過一次移植即可治愈2013年《新英格蘭醫(yī)學雜志》報道了糞菌移植成功治療難辨梭狀芽孢桿菌相關(guān)性疾病，其效果顯著優(yōu)于萬古霉素2014年，糞菌移植技術(shù)被美國《時代》周刊評為2013年十大醫(yī)學突破之一,內(nèi)容提要,腸道菌群分布特點及功能糞菌移植定義及發(fā)展史糞菌移

6、植適應癥糞菌移植的方法糞菌移植的安全性及效果評估糞菌移植展望,糞菌移植適應癥,胃腸道疾病適應癥難辨梭狀芽孢桿菌感染腸炎(偽膜性腸炎)（CDI）炎癥性腸?。↖BD、UC）抗生素相關(guān)性腹瀉腸易激綜合征（IBS）復發(fā)性CDI壞死性小腸結(jié)腸炎頑固性便秘食物腸道過敏自身免疫相關(guān)性腸病,糞菌移植適應癥,非胃腸疾病適應癥帕金森病慢性疲勞綜合征多發(fā)性硬化肥胖癥代謝綜合癥肌痙攣-肌緊張障礙綜合重度抑郁癥嚴重失眠特

7、發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)類風濕關(guān)節(jié)炎口臭痤瘡,糞菌移植作用機制,大量補充腸道的有益菌抑制腸道的致病菌補充抗菌物質(zhì)補充免疫抗體(SIgA)調(diào)節(jié)腸道內(nèi)環(huán)境，改善腸道的舒適度修復病變的腸黏膜下調(diào)或上調(diào)細胞因子補充各種消化酶促進腸道的營養(yǎng)物質(zhì)吸收調(diào)節(jié)腸道菌群與腦的信號通路,內(nèi)容提要,腸道菌群分布特點及功能糞菌移植定義及發(fā)展史糞菌移植適應癥糞菌移植的方法糞菌移植的安全性及效果評估糞菌移植展望,供體選擇,絕對

8、排除標準未能提供知情同意書當?shù)匚⑸锔腥?如致病性細菌、病毒、卵子和寄生蟲)正在患傳染病者惡性腫瘤化療者慢性胃腸道疾病消化性潰瘍病胃食管返流病胃腸道息肉炎癥性腸病腸易激綜合征慢性便秘旅行者腹瀉當前有胃腸道癥狀抗生素治療者免疫抑制藥物和生物制劑的治療者對腸道微生物群的藥物影響（如質(zhì)子泵抑制劑,促胃腸動力藥、類固醇、阿司匹林、益生菌等)高風險的生活方式(如靜脈吸毒、性風險行為等),相對排除標準胃腸道外科手

9、術(shù)史代謝綜合征糖尿病異常的身體質(zhì)量指數(shù)(要在18-25歲之間，kg/m2)系統(tǒng)性自身免疫性疾病過敏性疾病(如哮喘和濕疹)慢性疼痛綜合征(如慢性疲勞綜合癥和纖維肌痛)神經(jīng)疾病,糞菌移植成人供體的篩查,糞菌移植受者的篩查,糞菌液的制備—器械準備,糞菌分離手術(shù)間無菌手套、手術(shù)衣滅菌器械（燒杯、燒瓶、漏斗、玻棒、壓舌板、換藥碗、紗布）治療盤50ml注射器×6支生理鹽水500ml ×1袋,糞菌液的制備流

10、程,方法一供菌者于術(shù)晨排新鮮糞便于滅菌容器中，稱取其中成形軟便部分約100g置于滅菌燒杯中加入約37℃生理鹽水25ml攪拌成勻漿狀用雙層無菌紗布過濾后得到棕黃色混濁液體，將其注入滅菌玻璃瓶中留存?zhèn)溆梅椒ǘ?0g新鮮糞便樣本放入容器中加生理鹽水250ml進行攪拌將攪拌混勻后的糞菌液置于氮氣生物工程廚內(nèi)分別用直徑2.0、1.0、0.5、0.25mm鋼絲濾網(wǎng)從粗到細逐級過濾以除去大顆粒物質(zhì)得到少渣菌液將少渣菌液冰上轉(zhuǎn)運至實驗室

11、，離心半徑6cm，6000r/min，離心15min，得到懸浮于溶液上1/2菌液所得菌液一般于室溫條件下直接用于FMT移植，也可加入無菌甘油后置于-80℃液氮中保存，最長可保存８周,糞菌移植的途徑,經(jīng)鼻胃（腸）管或胃鏡活檢通道將糞菌液注至十二指腸，30min后可正常飲食經(jīng)結(jié)腸鏡活檢通道將菌液自回盲瓣開始，邊緩慢退鏡邊噴灑，直至糞菌液遍布全結(jié)直腸以100ml上清液隔日１次行保留灌腸經(jīng)皮內(nèi)鏡下盲腸造口置管術(shù)建立菌液移植通道，此通道可

12、留置使用，療效確切口服糞菌膠囊,糞菌液的移植量,成人結(jié)腸移植量300ml，保留4h上消化道移植量為65-75ml500ml 治愈率97.3%，復發(fā)率4.7%,糞菌移植方式的比較,經(jīng)上消化道給予的問題黃金湯不可口臭味（異物）嘔吐等低位結(jié)腸微生物不適合腸道生理學可能破壞局部的腸道正常菌群平衡,糞菌移植方式的比較,結(jié)腸鏡優(yōu)勢直觀評估結(jié)腸粘膜的病變程度并排除合并疾病“沖洗”異常宿主微生物群，促進供者的微生物群植入

13、減少腸道病變中的細胞因子實用性，安全，操作簡單等,內(nèi)容提要,腸道菌群分布特點及功能糞菌移植定義及發(fā)展史糞菌移植適應癥糞菌移植的方法糞菌移植的安全性及效果評估糞菌移植展望,糞菌移植的禁忌癥,發(fā)熱腸梗阻、腸穿孔、腸出血胃及十二指腸潰瘍嚴重免疫缺陷者多器官功能衰竭,糞菌移植的注意事項,嚴格遵守糞菌移植的適應癥、禁忌癥一定要簽署知情同意書糞便要新鮮，最好在1-2小時內(nèi)完成移植操作過程嚴格無菌糞菌移植術(shù)中術(shù)后密切觀察病

14、情變化，操作動作輕柔，防止腸穿孔等并發(fā)癥,糞菌移植的安全性,全世界已經(jīng)治療超過5 000例，尚未報道嚴重的不良事件缺乏有效對照資料、無高質(zhì)量臨床實驗證據(jù)FMT適用于治療常規(guī)手段治療失敗的腸道細菌相關(guān)性疾病，是選擇性治療，而不是治療普通疾病或者嚴重疾病的初級治療,糞菌移植常見并發(fā)癥及處理,糞菌移植后可能出現(xiàn)腹脹、腹瀉、嘔吐、發(fā)熱等，應對癥及補充電解質(zhì)液體，并尋找發(fā)生的原因操作過程中可能出現(xiàn)上下消化道黏膜損傷、出血、穿孔、感染，應立即

15、請外科會診防止正常糞便污染。供菌者留糞時間過長而造成糞菌被污染，應及時進行糞菌移植術(shù)其他可能發(fā)生的無法預料的或不能防范的并發(fā)癥對出現(xiàn)上述并發(fā)癥者即刻轉(zhuǎn)入重癥病房觀察和治療,糞菌移植術(shù)后隨訪,糞菌移植的成功標準（UC）,糞菌移植有效標準（在糞菌移植2w時進行評估）糞常規(guī)中紅細胞、白細胞及粘液明顯減少或正常2w時復查腸鏡示腸道黏膜病變顯著好轉(zhuǎn)結(jié)合患者癥狀及腸鏡結(jié)果，行Mayo評分，以Mayo評分比基線值（移植前一天）下降≥30%

16、及≥3分，且便血的評分降幅≥1或該項為0分或1分，作為糞菌移植治療有效的標準,內(nèi)容提要,腸道菌群分布特點及功能糞菌移植定義及發(fā)展史糞菌移植適應癥糞菌移植的方法糞菌移植的安全性及效果評估糞菌移植展望,糞菌移植的未來,通過DNA測序檢測明確具體的功能菌群, 進行特異性的菌群移植, 可能會提高移植的安全性FMT所構(gòu)造的菌群間相互作用的微環(huán)境, 是否是治療有效的關(guān)鍵FMT能否會導致細菌的變異FMT能否會引起繼發(fā)性炎癥性疾病, 甚