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1、2016生物一輪復(fù)習(xí)第35講,胚胎工程,胚胎工程的概念: 胚胎工程指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),如胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過(guò)處理后獲得的胚胎,還需要移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代,以滿足人類(lèi)大各種需求。,操作對(duì)象:早期胚胎和配子技術(shù)手段:胚胎移植、體外受精、 胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等理論基礎(chǔ):哺乳動(dòng)物的體內(nèi)受精和早期
2、 胚胎的發(fā)育規(guī)律,胚胎工程,配子的形成,精子的發(fā)生卵細(xì)胞的形成,1個(gè)精原細(xì)胞(染色體數(shù):2n),1個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞(染色體數(shù):2n),2個(gè)次級(jí)精母細(xì)胞(染色體數(shù):n),,,,4個(gè)精子細(xì)胞(染色體數(shù):n),體細(xì)胞(染色體數(shù):2n),,有絲分裂細(xì)胞分化,間期:細(xì)胞體積增大、染色體復(fù)制,前期:聯(lián)會(huì)、四分體(非姐妹染色單體交叉互換)中期:同源染色體排列在赤道板兩側(cè)后期:同源染色體分離(非同源染色體自由組合)末期:形成2個(gè)次級(jí)精母
3、細(xì)胞,著絲點(diǎn)分裂,染色單體分離,,4個(gè)2種精子(染色體數(shù):n),變形,,,減數(shù)第一次分裂,減數(shù)第二次分裂,精子細(xì)胞變形中的主要變化:,1.細(xì)胞核——2.高爾基體——3.中心體——4.線粒體——5.細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)——,精子頭的主要部分,頭部的頂體,精子的尾,線粒體鞘膜(尾的基部),原生質(zhì)滴(球狀,最后脫落),細(xì)胞核是精子遺傳物質(zhì)儲(chǔ)存和復(fù)制的場(chǎng)所,也是參與精、卵結(jié)合和后代遺傳特性與細(xì)胞代謝活動(dòng)的控制中心。而線粒體則是有氧呼吸產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)
4、能量的場(chǎng)所。精子的線粒體集中于尾的基部形成線粒體鞘膜,是精子維持生存和運(yùn)動(dòng)能量的“動(dòng)力工廠”或“發(fā)動(dòng)機(jī)”。,精子細(xì)胞變成精子的過(guò)程中,細(xì)胞中很多結(jié)構(gòu)會(huì)消失,而細(xì)胞核和線粒體都保留下來(lái),對(duì)這一現(xiàn)象怎樣理解?為什么精子中的線粒體集中在尾的基部?,1、發(fā)生部位:卵巢和輸卵管2、時(shí)間: ? 卵原細(xì)胞和初級(jí)卵母細(xì)胞的形成在胚胎時(shí)期;(卵巢) ? 減數(shù)第一次分裂是在雌性動(dòng)物排卵前后完成;(卵巢) ?減數(shù)第二次分裂是在精子和卵子結(jié)
5、合的過(guò)程完成的。(輸卵管),(二)卵子的發(fā)生,,動(dòng)物的胚胎在性別分化以后,雌性胎兒卵巢內(nèi)的卵原細(xì)胞,通過(guò)有絲分裂增加其數(shù)量,演變?yōu)槌跫?jí)卵母細(xì)胞,被卵泡細(xì)胞包圍形成卵泡。卵子從卵泡排出,進(jìn)入輸卵管叫排卵排“初級(jí)卵母細(xì)胞”或者“次級(jí)卵母細(xì)胞”,卵原細(xì)胞,有絲分裂,多個(gè)卵原細(xì)胞,染色體復(fù)制,初級(jí)卵母細(xì)胞,MⅠ,第一極體,次級(jí)卵母細(xì)胞,,,兩個(gè)第二極體,,第二極體,卵子,,,退化消失,卵子發(fā)生過(guò)程,MⅡ,在卵巢中,排卵前后完成,進(jìn)入輸卵管,
6、在受精過(guò)程完成,被卵泡細(xì)胞包圍,形成卵泡,胎兒時(shí)期完成,,,,,生長(zhǎng),形成透明帶和卵黃膜,1.一個(gè)卵泡中能形成幾個(gè)成熟的卵子?2.排卵是指卵子從卵泡中排出,還是指卵泡從卵巢中排出?3.剛排出的卵是成熟的卵子嗎?它在母體的什么部位與精子受精?,答:剛排出的卵子尚未完全成熟,僅完成第一次減數(shù)分裂,需要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟,直到減數(shù)第二次分裂的中期才能與精子結(jié)合完成受精過(guò)程。排出的卵 子是在輸卵管內(nèi)與精子受精的。,答:
7、正常情況下,一個(gè)卵泡只能形成一個(gè)成熟的卵子。,答:是指卵子從卵泡中排出。,卵子和精子發(fā)生的比較,睪丸的曲細(xì)精管(場(chǎng)所唯一),卵巢(MⅠ)、輸卵管(MⅡ)(場(chǎng)所不唯一),初情期,性別分化后開(kāi)始,卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲(chǔ)備在出生前完成,減Ⅱ分裂在精子和卵子結(jié)合過(guò)程中完成,① MⅠ和MⅡ是連續(xù)的,需變形成蝌蚪狀精子 ②細(xì)胞質(zhì)均等分配,① MⅠ和 MⅡ是不連續(xù)的,不需變形,卵子是球狀的 ②細(xì)胞質(zhì)不均等分配,形成4個(gè)精子細(xì)胞,形成1個(gè)卵細(xì)胞和3個(gè)
8、極體,① 原始生殖細(xì)胞的增殖為有絲分裂②生殖細(xì)胞的成熟為減數(shù)分裂③成熟過(guò)程均經(jīng)一次復(fù)制和兩次分裂④子細(xì)胞中的染色體數(shù)目減半,二、受精,精子和卵子結(jié)合形成合子(即受精卵)的過(guò)程。2.場(chǎng)所:輸卵管。 是不是所有動(dòng)物的受精過(guò)程都發(fā)生在輸卵管中?,受精前的準(zhǔn)備階段:1)精子獲能:精子必須在雌性動(dòng)物的生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后,才獲得受精能力的生理現(xiàn)象.2)卵子的準(zhǔn)備:在輸卵管中發(fā)育到減數(shù)第二次分裂的中期,才具有與精子受精的能力,哺乳動(dòng)物
9、受精過(guò)程示意圖,哺乳動(dòng)物受精過(guò)程示意圖,卵細(xì)胞膜,二)受精階段:1)精子穿越放射冠和透明帶 頂體反應(yīng)使頂體內(nèi)的酶釋放出來(lái)并溶解放射冠內(nèi)的卵丘細(xì)胞 透明帶反應(yīng)是防止多精入卵受精的第一道屏障2)精子進(jìn)入卵細(xì)胞膜卵細(xì)胞膜封閉作用是防止多精入卵受精的第二道屏障3)原核形成: 雄原核形成和雌原核形成4)配子結(jié)合: 雌雄原核融合形成合子(受精卵),卵子受精的標(biāo)志: 當(dāng)在卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個(gè)極體時(shí),說(shuō)明卵子
10、已經(jīng)受精。,注意:1.區(qū)分受精的標(biāo)志和受精完成的標(biāo)志 2.精子和卵子 發(fā)生的區(qū)別,雌雄原核融合,形成合子(即核融合形成受精卵),意義,維持每種生物前后代體細(xì)胞中染色體數(shù)目的恒定 ;對(duì)于生物的遺傳和變異十分重要。,受精后8天。受精卵完成"著陸",微微嵌入子宮內(nèi)膜。此時(shí)它分裂發(fā)育為幾百個(gè)細(xì)胞。,胚胎發(fā)育,三.胚胎發(fā)育,1、個(gè)體發(fā)育的起點(diǎn)——受精卵 受精卵一形成就
11、在輸卵管內(nèi)進(jìn)行有絲分裂。2、卵裂期——輸卵管 分裂方式:有絲分裂; 細(xì)胞數(shù)目: 細(xì)胞體積: 胚胎總體積:,增加,變小,基本不變,受精卵在卵膜內(nèi)完成發(fā)育,所需營(yíng)養(yǎng)來(lái)自受精卵本身,故發(fā)育過(guò)程早期胚胎體積基本無(wú)變化,桑葚胚——在透明帶內(nèi) 細(xì)胞數(shù)目:32個(gè)左右。 細(xì)胞特點(diǎn): 每個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能,屬于全能性細(xì)胞。 你有方法證明嗎?,,囊胚期,滋養(yǎng)層:發(fā)育成胚胎的胎膜和胎盤(pán)附屬結(jié)構(gòu)或胚外結(jié)構(gòu)
12、,胚胎可通過(guò)這些組織從母體中獲得正常發(fā)育所需的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞:即胚胎干細(xì)胞,是一種未分化的細(xì)胞,具有全能性,能發(fā)育胎兒各種組織,成完整的胚胎,滋養(yǎng)層,內(nèi)細(xì)胞團(tuán),囊胚腔,囊胚的形成——細(xì)胞開(kāi)始分化,后期從透明帶內(nèi)孵化出,受精卵,第一次卵裂,第二次卵裂,第三次卵裂,桑椹胚,囊胚,原腸胚,———————內(nèi)胚層——中胚層——原腸胚,胚的發(fā)育:,按照一定的次序向內(nèi)運(yùn)動(dòng),受精卵——卵裂——囊胚,原腸胚的形成,受精卵,卵裂期,桑椹胚,
13、囊胚(內(nèi)含囊胚腔),原腸胚(內(nèi)含原腸腔),胎兒形成,,,,,,:在透明帶內(nèi)進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎總體積并不增加,或略有減少。,:由具有全能性細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞數(shù)在32個(gè)左右,排列緊密,形似桑椹,,內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒各組織,滋養(yǎng)層細(xì)胞:發(fā)育成胎膜和胎盤(pán),:最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂,,滋養(yǎng)層外胚層中胚層內(nèi)胚層原腸腔,試管動(dòng)物技術(shù),是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)移
14、植產(chǎn)生后代的技術(shù)。,快速繁殖動(dòng)物優(yōu)良品種,目的:,技術(shù)手段:,體外受精和早期胚胎培養(yǎng),試管動(dòng)物技術(shù)的三個(gè)基本操作環(huán)節(jié):,第一步:體外受精,第二步:胚胎的早期培養(yǎng),第三步:胚胎移植,精子,卵子,,,受精卵,,早期胚胎,,幼體,①,②,③,,新個(gè)體,哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)育過(guò)程,試管 動(dòng)物,,一. 體 外 受 精,概念:采取雌性動(dòng)物的卵細(xì)胞和雄性動(dòng)物的精子,使其在試管受精。,過(guò)程: (1)卵母細(xì)胞的收集和培養(yǎng); (2)精子的收集和獲能
15、; (3)獲能精子和卵細(xì)胞的受精。,“試管動(dòng)物”,思考:子代數(shù)目的多少取決于精子數(shù)還是卵子數(shù)?,方法1:給供體注射促性腺激素,使一頭母畜的卵巢一次排出比自然情況下多幾倍到十幾倍的卵子(超數(shù)排卵),之后從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。,(一 ). 卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng),,從屠宰母畜卵巢采集卵母細(xì)胞直接從活體動(dòng)物卵巢吸取卵母細(xì)胞,1. 鼠、兔、豬、羊:,用促性腺激素處理, 從輸卵管中沖卵,2.大家畜或大型動(dòng)物:
16、,(二 ). 精子的采集和獲能,收集精子的方法:精子體外獲能方法:,假陰道法(牛、馬等體型大的)手握法(豬、犬等體型小的動(dòng)物電刺激法(野生或經(jīng)濟(jì)動(dòng)物),培養(yǎng)法(放如獲能液中)化學(xué)誘導(dǎo)法(肝素溶液或鈣離子載體A23187)。,在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^(guò)程。,體外受精,二. 胚胎早期培養(yǎng),1。概念:將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液培養(yǎng),繼續(xù)培養(yǎng),在人工環(huán)境下培養(yǎng)成早期胚胎。2。培養(yǎng)液:成分復(fù)雜(不同時(shí)期成分不同)除無(wú)機(jī)鹽和
17、有機(jī)鹽類(lèi)外,還要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等。,胚胎培養(yǎng)比組織、細(xì)胞培養(yǎng)要難。,其他方式,二、體外受精和胚胎體外培養(yǎng),,二、體外受精和胚胎體外培養(yǎng),胚胎移植,1.概念: 將雌性動(dòng)物的 ,或者通過(guò)其他方式得到的胚胎,移植到 的、 的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。,同種,生理狀態(tài)相同,早期胚胎,1、供、受體的選擇和處理(使用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理、超數(shù)排卵處理)
18、 2、 配種或人工授精;3、胚胎收集(沖卵)、檢查(胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚)、培養(yǎng)或保存(-196OC的液氮) 4、胚胎移植:手術(shù)法(引出子宮和卵巢將其注入)、非手術(shù)法(用移植管將其送入子宮) 5、對(duì)受體母畜進(jìn)行是否妊娠的檢查。,胚胎移植的基本程序,不同動(dòng)物胚胎移植時(shí)間不同,桑椹胚階段:牛、羊,8個(gè)或16細(xì)胞胚階段:小鼠、家兔,4個(gè)細(xì)胞胚階段:試管嬰兒,胚胎的來(lái)源: 雌性動(dòng)物的早期胚胎或體外受精及其他方式得到的胚胎
19、。供體:提供胚胎的個(gè)體。受體:接受胚胎的個(gè)體。受體的條件:同種、生理狀態(tài)相同。,胚胎移植的意義⑴加速育種工作和品種改良;⑵大量節(jié)省購(gòu)買(mǎi)種畜的費(fèi)用;⑶一胎多產(chǎn);⑷保存品種資源和瀕危物種;⑸可充分發(fā)揮優(yōu)秀個(gè)體的繁殖潛能縮短繁殖周期,增加一生繁殖的后代數(shù)量。,供體和受體共同繁殖后代有什么好處?,可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖能力供體的主要職能: 只產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎,大大縮短了供體本身的繁殖周期,增
20、加了供體一生繁殖的后代數(shù)量。受體的職能: 擔(dān)任繁重而漫長(zhǎng)的妊娠和育仔的任務(wù),(1)對(duì)供體、受體進(jìn)行選擇,供體: 遺傳性能和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的個(gè)體;受體: 健康和正常繁殖能力的個(gè)體處理: 同期發(fā)情具體做法: 注射相關(guān)激素。,同期發(fā)情技術(shù):主要是借助外源激素剌激卵巢,使其按照預(yù)定的要求發(fā)生變化,使處理母畜的卵巢生理機(jī)能都處于相同階段,從而達(dá)到同期發(fā)情。,(2)采集卵
21、母細(xì)胞方法: 超數(shù)排卵具體做法: 注射促性腺激素,(3)配種或人工受精,精子來(lái)源: 同種優(yōu)良的雄性動(dòng)物。,(4)胚胎的收集,在配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)(沖卵)。,(5)對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查 胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚,(6)胚胎的保存或移植 -196OC的液氮保存,(7)胚胎的移植,方法一:手術(shù)法
22、方法二:非手術(shù)法,(8)對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查,(9)受體母牛產(chǎn)下胚胎移植的犢牛,試管動(dòng)物 與 克隆動(dòng)物相比生殖方式:技術(shù)手段:遺傳規(guī)律:,有性生殖 無(wú)性生殖,核移植技術(shù)、胚胎移植,遵循 無(wú),體外受精胚胎移植,選擇,供體母牛,受體母牛,,,……同期發(fā)情處理……,,超數(shù)排卵,,供體公牛,,配種,,沖卵,,質(zhì)量檢查、培養(yǎng),,胚胎移植,,,妊娠檢查,,分娩(胚胎移植的
23、犢牛),胚胎移植的基本程序,同期發(fā)情技術(shù):主要是借助外源激素剌激卵巢,使其按照預(yù)定的要求發(fā)生變化,使處理母畜的卵巢生理機(jī)能都處于相同階段,從而達(dá)到同期發(fā)情。,準(zhǔn)備移植的胚胎,移植到任何一頭動(dòng)物子宮內(nèi)都能發(fā)育嗎?胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌性供體和受體之間進(jìn)行,因?yàn)橥N動(dòng)物之間的生理特征相近,進(jìn)行胚胎移植易于成功。,.,.,供體和受體之間進(jìn)行胚胎移植時(shí)會(huì)不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)?同種動(dòng)物之間基本上不排斥,能否直接從母體子宮內(nèi)進(jìn)行胚胎收集?為
24、什么?能。因?yàn)椴溉閯?dòng)物的早期胚胎形成后,在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子宮建立組織上的聯(lián)系,而是處于游離狀態(tài)。,.,.,移植的胚胎能否保留供體雙親的特性?胚胎雖然與受體有生理和組織上的聯(lián)系,但遺傳特性不受受體的影響,胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ),1.哺乳動(dòng)物發(fā)情排卵后,不管是否妊娠,在一段時(shí)間內(nèi)同種動(dòng)物的供體和受體生殖器官的生理變化是相同的。為供體胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境,2.哺乳動(dòng)物的早期胚胎形成后處于游離狀態(tài),在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子
25、宮建立組織上的聯(lián)系。為胚胎的收集提供了可能,3.受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能,4.供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但移入受體的供體胚胎,其遺傳特性在孕育過(guò)程中不受任何影響。,2.胚胎移植成功與否的條件有哪些?,(1)胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌性供體和受體之間進(jìn)行。(2)進(jìn)行胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要相同。,1.胚胎移植成功的標(biāo)志是什么?,移植的胚胎在受體內(nèi)能正常發(fā)
26、育并分娩,(2)應(yīng)該怎樣選擇供體公、母牛和受體母牛?,供體公、母牛應(yīng)該是具有人類(lèi)所需的優(yōu)良遺傳性狀的個(gè)體,而受體母牛必須具有正常的孕育、生殖后代的能力,在②中,為什么要用促性腺激素處理供體母牛?,用促性腺激素處理供體母牛是為了引起超數(shù)排卵,這樣就可以獲得較多的胚胎,在促性腺激素處理供體母牛前,為什么需要對(duì)供體和受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理?,對(duì)供體和受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理,才能使它們的生理?xiàng)l件達(dá)到同步或一致,使供體的胚胎移入受體后有相同或
27、相似的生存條件,二 . 胚胎分割,指借助顯微操作技術(shù)(采用機(jī)械方法)將早期胚胎切割成幾等份,再移植到代孕母子宮,產(chǎn)生同卵多仔后代的技術(shù)。,,優(yōu)勢(shì):,可成倍增加胚胎數(shù)量,可以快速繁殖良種畜。,2.特點(diǎn): 后代具有相同的遺傳物質(zhì), 因此胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。3、理論基礎(chǔ) 動(dòng)物胚胎細(xì)胞的全能性。 所以胚胎分割的時(shí)期為:囊胚或桑椹胚。,4、選擇的
28、胚胎: 發(fā)育良好的,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。5、使用的主要儀器: 實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀。6、具體操作: 用分割針或分割刀片將胚胎切開(kāi),吸出其中的半個(gè)胚胎,注入預(yù)先準(zhǔn)備好的空透明帶中,或直接將裸半胚移植給受體。,7、操作注意事項(xiàng): ①對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí),要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。 ②胚胎分割的份數(shù)越多,操作的難度會(huì)越大,移植的成功率也越低。,8、
29、胚胎分割技術(shù)的缺陷 (1)剛出生動(dòng)物的體重偏低,毛色和斑紋還存在差異; (2)采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胎的可能性是有限的。,,“試管動(dòng)物”與“克隆動(dòng)物”的比較,,①試管動(dòng)物生殖實(shí)質(zhì)是正常的有性生殖,只不過(guò)受精、早期胚胎發(fā)育在試管中(體外)進(jìn)行。②克隆動(dòng)物生殖的實(shí)質(zhì)是無(wú)性生殖,依賴動(dòng)物細(xì)胞核(高度分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核)具有全能性;特有的操作程序是核移植!,,胚胎干細(xì)胞的來(lái)源與應(yīng)用,簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)
30、的一類(lèi)細(xì)胞。,專能干細(xì)胞,多能干細(xì)胞,全能干細(xì)胞,特點(diǎn),只能分化成一種類(lèi)型或功能密切相關(guān)的兩種類(lèi)型的細(xì)胞,能分化成多種細(xì)胞或組織,但不能發(fā)育成完整個(gè)體,能形成機(jī)體的所有組織器官,發(fā)育成完整個(gè)體,舉例,上皮組織基底層的干細(xì)胞,成纖維細(xì)胞,造血干細(xì)胞,胚胎干細(xì)胞,干細(xì)胞的分類(lèi),三 . 胚胎干細(xì)胞,2.特點(diǎn): 1)形態(tài):體積小.細(xì)胞核大,核仁明顯 2)功能:具有發(fā)育的全能性.可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞 3)在體外培養(yǎng)的
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